第十章吸光光度法absorptionphotometry—基于物質(zhì)對光(編輯修改稿)
2024-11-29 13:46 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 660 nm （二） 化學(xué)因素 ； —有色物離解、 締合 ....... 18 第三節(jié) 吸光光度法及儀器 一、目視法 c4 c3 c2 c1 c1 c2 c3 c4 ：簡單、可測微量，復(fù)合光，誤差大。 觀察方向 觀察方向 ： 19 二、 光電比色法 通過濾光片得一窄范圍的光 (幾十 nm) 光電比色計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖 ： （ 濾光片獲取單色光 ） A C ：準(zhǔn)確度較高（消除人眼的主觀因素） 選擇性較好（濾光片、參比液可消除干擾） 三、分光光度法 ：同上。 不同點(diǎn)： 光柵或棱鏡獲取單色光 四、基本構(gòu)造 由光源、單色器（分光系統(tǒng)）、吸收池（比色皿）、檢測系統(tǒng)、信號顯示系統(tǒng)五大部分組成。 單色光純度高（可精選某一波長，準(zhǔn)） 測定多組分（利用 A的加和性） 應(yīng)用范圍廣（無色、有色） ： 紫外 可見分光光度計(jì)組件 光源 單色器 吸收池 檢測器 信號顯示系統(tǒng) 氫燈，氘燈， 185 ~ 375 nm； 鎢燈， 400 ~ 2500 nm. 基本要求：光源強(qiáng)，能量分布均勻，穩(wěn)定 作用：將復(fù)合光色散成單色光 棱鏡 光柵 玻璃， 360 ~ 3200 nm, 石英， 200 ~ 4000 nm 平面透射光柵， 反射光柵 玻璃，光學(xué)玻璃，石英 作用：將光信號轉(zhuǎn)換為電信號，并放大 光電管，光電倍增管，光電二極管，光導(dǎo)攝像管（多道分析器） 表頭、記錄儀、屏幕、數(shù)字顯示 第四節(jié) 吸光光度法分析條件的選擇 （科研初步 ,與時俱進(jìn)） 一、顯色反應(yīng)及其條件的選擇 （一）顯色反應(yīng)和顯色劑 [定義 ]： 將被測組分轉(zhuǎn)變?yōu)?“ 有色物質(zhì) ” 的反應(yīng) M無色 + R = MR有色 (主要是絡(luò)合、氧化還原反應(yīng) ） 1. 對顯色反應(yīng)或顯色劑的要求： ⅰ 選擇性好（最好是特效反應(yīng)） ⅱ 靈敏度高（ ?max ﹥ 104L?mol1?cm1） ⅲ 對比度要大， (??max)最大吸收 波長相差 60nm以上 ⅳ MR穩(wěn)定，組成恒定 ⅴ 顯色反應(yīng)的條件要易于控制 廣義，有吸收 2. 顯色劑 R（ 自學(xué) P289－ P290） （ 二） 顯色反應(yīng)條件的選擇 1 1 1 1 2 3 4 5 6 6 ： [H+]一切反應(yīng)的基礎(chǔ) M的存在狀態(tài)， [H+] ↘ ， M會水解； [R]及顏色， [H+] ↗ ，影響 [R]（ 大多有機(jī)弱酸） 影響顏色（大多酸堿指示劑） MRn組成 （ CR） 為使顯色反應(yīng)完全，一般 R過量（同離子效應(yīng)），但 R也不能大過頭，否則，物極必反。 a. R本身有色，空白 ↗ b. 改變絡(luò)合比，例： Mo(Ⅴ )與 SCN: ?? ?? ???? ?? ?? 淺紅橙紅淺紅 ,6S C N,5S C N2 ,3 )S C N(Mo)S C N(Mo)S C N(MoCR由實(shí)驗(yàn)確定 3. 時間 t A t t 由實(shí)驗(yàn)確定。顯色后，至少應(yīng)保持到測定工作做完。 T 大多顯色反應(yīng)在室溫下進(jìn)行，但也有需要加熱才能完成的。 V=f(T) T↗ , V↗ 。 但 T 太 ↗ ，有色物分解。 合適的 T 由實(shí)驗(yàn)確定。 5. 溶劑和表面活性劑 ?溶劑影響有色絡(luò)合物的離解度 ?溶劑影響有色絡(luò)合物的顯色速度 ?溶劑影響有色絡(luò)合物的顏色 表面活性劑 a. 膠束增溶 b. 形成三元絡(luò)合物 －－ 實(shí)驗(yàn)確定，有點(diǎn)運(yùn)氣 6. 干擾及消除 干擾物本身有色或與顯色劑顯色， +干擾 干擾物與 M、 N反應(yīng)，使顯色不完全，－干擾 b. 消除 ?控制酸度 ，使 M顯色，干擾不顯色 ?氧化還原，改變干擾離子價(jià)態(tài) ?掩蔽 ?校正系數(shù) ?參比液：可消除顯色劑和某些離子的干擾 ?選擇 ?測 ，可避開干擾的吸收 ?增加顯色劑用量，將干擾灌飽 ?分離 二、儀器測量誤差 光度分析法的誤差除了來源于朗伯－比耳定律的偏離以外，儀器測量不準(zhǔn)確也是導(dǎo)致誤差的原因。 任何光度計(jì)都有一定的測量誤差。這些誤差可能來源于光源不穩(wěn)定、實(shí)驗(yàn)條件的偶然變動、讀數(shù)不準(zhǔn)確等。 P286頁圖 10－ 5： 偏離 A=?bC 對同一臺儀器，讀數(shù)的波動對 T是確定值， dT=； 但對 A卻不確定 )3(Cd
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