【文章內(nèi)容簡介】 、subculture cell monoclonal antibody、第三章參考答案一、名詞解釋分辨率：區(qū)分開兩個質(zhì)點間的最小距離。細胞培養(yǎng)：把機體內(nèi)的組織取出后經(jīng)過分散（機械方法或酶消化）為單個細胞，在人工培養(yǎng)的條件下，使其生存、生長、繁殖、傳代，觀察其生長、繁殖、接觸抑制、衰老等生命現(xiàn)象的過程。細胞系：在體外培養(yǎng)的條件下，有的細胞發(fā)生了遺傳突變，而且?guī)в邪┘毎攸c，失去接觸抑制，有可能無限制地傳下去的傳代細胞。細胞株：在體外一般可以順利地傳40—50代，并且仍能保持原來二倍體數(shù)量及接觸抑制行為的傳代細胞。原代細胞培養(yǎng)：直接從有機體取出組織，通過組織塊長出單層細胞，或者用酶消化或機械方法將組織分散成單個細胞，在體外進行培養(yǎng)，在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。傳代細胞培養(yǎng)：原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細胞匯合以后，需要進行分離培養(yǎng)（即將細胞從一個培養(yǎng)器皿中以一定的比率移植至另一些培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)），否則細胞會因生存空間不足或由于細胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭，將影響細胞的生長，這一分離培養(yǎng)稱為傳代細胞培養(yǎng)。細胞融合：兩個或多個細胞融合成一個雙核細胞或多核細胞的現(xiàn)象。一般通過滅活的病毒或化學物質(zhì)介導，也可通過電刺激融合。單克隆抗體：通過克隆單個分泌抗體的B淋巴細胞，獲得的只針對某一抗原決定簇的抗體，具有專一性強、能大規(guī)模生產(chǎn)的特點。二、填空題光學放大系統(tǒng)，照明系統(tǒng)，機械和支架系統(tǒng)；光源的波長，物鏡的鏡口角，介質(zhì)折射率。紫外光；電子束。物鏡和照明系統(tǒng)的位置顛倒。透射電鏡，掃描電鏡。固定，包埋，切片，染色。超速離心法，層析法，電泳法。差速離心法，密度梯度離心法。電磁，玻璃。（小鼠骨髓）瘤細胞，B淋巴細胞；單克隆抗體。相差顯微鏡；暗視野顯微鏡；冰凍蝕刻。1成纖維樣細胞，上皮樣細胞。三、選擇題A，B，A，C，C，A，A，B，C，C，1D，1A，1B，1D，1A，1A，1C，1B，1B，C，2D、2C，2C，2D，2D。四、判斷題√，√，√，1五、簡答題超薄切片的樣品制片過程包括哪些步驟？答案要點：固定，包埋，切片，染色。熒光顯微鏡在細胞生物學研究中有什么應(yīng)用？答案要點：熒光顯微鏡是以紫外線為光源，照射被檢物體發(fā)出熒光，在顯微鏡下觀察形狀及所在位置，圖像清晰，色彩逼真。熒光顯微鏡可以觀察細胞內(nèi)天然物質(zhì)經(jīng)紫外線照射后發(fā)熒光的物質(zhì)（如葉綠體中的葉綠素能發(fā)出血紅色熒光）；也可觀察誘發(fā)熒光物質(zhì)（如用丫啶橙染色后，細胞中RNA發(fā)紅色熒光，DNA發(fā)綠色熒光），根據(jù)發(fā)光部位，可以定位研究某些物質(zhì)在細胞內(nèi)的變化情況。比較差速離心與密度梯度離心的異同。答案要點：二者都是依靠離心力對細胞勻漿懸浮扔中的顆粒進行分離的技術(shù)。差速離心是一種較為簡便的分離法，常用于細胞核和細胞器的分離。因為在密度均一的介質(zhì)中，顆粒越大沉降越快，反之則沉降較慢。這種離心方法只能將那些大小有顯著差異的組分分開，而且所獲得的分離組分往往不很純；而密度梯度離心則是較為精細的分離手段，這種方法的關(guān)鍵是先在離心管中制備出蔗糖或氯化銫等介質(zhì)的濃度梯度并將細胞勻漿裝在最上層，密度梯度的介質(zhì)可以穩(wěn)定沉淀成分，防止對流混合，在此條件下離心，細胞不同組分將以不同速率沉降并形成不同沉降帶。為什么電子顯微鏡不能完全替代光學顯微鏡？答案要點：電子顯微鏡用電子束代替了光束，大大提高了分辨率，電子顯微鏡相對光學顯微鏡是個飛躍。但是電子顯微鏡：樣品制備更加復雜；鏡筒需要真空，成本更高；只能觀察“死”的樣品，不能觀察活細胞。光學顯微鏡技術(shù)性能要求不高，使用容易；可以觀察活細胞，觀察視野范圍廣，可在組織內(nèi)觀察細胞間的聯(lián)系；而且一些新發(fā)展起來的光學顯微鏡能夠觀察特殊的細胞或細胞結(jié)構(gòu)組分。因此，電子顯微鏡不能完全代替光學顯微鏡。相差顯微鏡在細胞生物學研究中有什么應(yīng)用？答案要點：相差顯微鏡通過安裝特殊裝置（如相差板等）將光波通過樣品的光程差或相差位轉(zhuǎn)換為振幅差，由于相差板上部分區(qū)域有吸光物質(zhì)，使兩組光線之間增添了新的光程差，從而對樣品不同同造成的相位差起“夸大作用”，樣品表現(xiàn)出肉眼可見的明暗區(qū)別。相差顯微鏡的樣品不需染色，可以觀察活細胞，甚至研究細胞核、線粒體等到細胞器的形態(tài)。比較放大率與分辨率的含義。答案要點：二者都是衡量顯微鏡性能的指標。通常放大率是指顯微鏡所成像的大小與樣本實際大小的比率；而分辨率是指能分辨或區(qū)分出的被檢物體細微結(jié)構(gòu)的最小間隔，即兩個點間的最小距離。放大率對分辨率有影響，但分辨率不僅僅取決于放大率。掃描隧道顯微鏡具有哪些特點？答案要點：①高分辨率：具有原子尺度的高分辨率本領(lǐng)，~，；②直接探測樣品的表面結(jié)構(gòu)：可繪出立體三維結(jié)構(gòu)圖像；③可以在真空、大氣、液體（接近于生理環(huán)境的離子強度）等多種條件下工作；④非破壞性測量：由于沒有高能電子束，對表現(xiàn)沒有破壞作用（如輻射、熱損傷等），能對生理狀態(tài)下的生物大分子和活細胞膜表面的結(jié)構(gòu)進行研究，樣品不會受到損傷而保持完好；⑤掃描速度快，獲取數(shù)據(jù)的時間短，成像快。六、論述題試比較光學顯微鏡與電子顯微鏡的區(qū)別。答案要點：光學顯微鏡是以可見光為照明源，將微小的物體形成放大影像的光學儀器；而電子顯微鏡則是以電子束為照明源，通過電子流對樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級放大后在熒光屏上成像的大型儀器。它們的不同在于：①照明源不同：光鏡的照明源是可見光，電鏡的照明源是電子束；由于電子束的波長遠短于光波波長，因而電鏡的放大率及分辨率顯著高于光鏡。②透鏡不同：光鏡為玻璃透鏡；電鏡為電磁透鏡。③分辨率及有效放大本領(lǐng)不同：，放大倍數(shù)為1000倍；，放大倍數(shù)106倍。④真空要求不同：光鏡不要求真空；電鏡要求真空。⑤成像原理不同：光鏡是利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化成像；而電鏡則是利用樣品對電子的散射和透射形成明暗反差成像。⑥生物樣品制備技術(shù)不同：光鏡樣品制片技術(shù)較簡單，通常有組織切片、細胞涂片、組強壓片和細胞滴片等；而電鏡樣品的制備較復雜，技術(shù)難度和費用都較高，在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作，還需要制備超薄切片。七、翻譯細胞系 細胞株 細胞培養(yǎng) 細胞工程 細胞融合 原代細胞 傳代細胞 單克隆抗體第四章 細胞膜與細胞表面本章要點：本章闡述了細胞膜的基本結(jié)構(gòu)特征及其生物學功能，生物膜的結(jié)構(gòu)模型及膜的化學組成；重點闡述了細胞連接的結(jié)構(gòu)類型、特點及功能，并對細胞外基質(zhì)的組成、分子結(jié)構(gòu)及生物功能進行了簡單介紹。要求重點掌握生物膜的結(jié)構(gòu)模型、化學組成和功能特點；重點掌握細胞連接的基本類型、結(jié)構(gòu)特點及主要功能。 一、名詞解釋生物膜 脂質(zhì)體 雙型性分子（兼性分子） 內(nèi)在蛋白 外周蛋白 細胞外被 細胞連接 緊密連接 橋粒 膜骨架 1血影 1間隙連接 1細胞粘附分子 1細胞外基質(zhì)二、填空題細胞膜的最顯著特性是 和 。細胞膜的膜脂主要包括 、 和 ，其中以 為主。成熟的紅細胞是研究細胞質(zhì)膜的好材料，不僅沒有細胞核，也沒有 。動物細胞間的連接主要有 、 、 和 四種形式。細胞間隙連接的基本單位叫 ，由 組成，中間有一個直徑為 nm的孔道。構(gòu)成動物細胞外基質(zhì)的主要成分是 、 、 和 。膠原的基本結(jié)構(gòu)單位是 ，其肽鏈的結(jié)構(gòu)特點是 。蛋白聚糖是由 和核心蛋白的 殘基共價連接形成的巨分子。糖胺聚糖的結(jié)構(gòu)單位是 。膜骨架蛋白主要成分包括 、 、 和 等。參與錨定連接的骨架系統(tǒng)可分兩種不同形式，與中間纖維相連的主要包括 ，與肌動蛋白纖維相連的錨定連接主要包括 。三、選擇題生物膜是指（ ）。A、單位膜 B、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)二維排列構(gòu)成的液晶態(tài)膜C、包圍在細胞外面的一層薄膜 D、細胞內(nèi)各種膜的總稱E、細胞膜及內(nèi)膜系統(tǒng)的總稱生物膜的主要化學成分是（ ）。A、蛋白質(zhì)和核酸 B、蛋白質(zhì)和糖類 C、蛋白質(zhì)和脂肪 D、蛋白質(zhì)和脂類 E、糖類和脂類生物膜的主要作用是（ ）。A、區(qū)域化 B、合成蛋白質(zhì) C、提供能量 D、運輸物質(zhì) E、合成脂類細胞膜中蛋白質(zhì)與脂類的結(jié)合主要通過（ ）。A、共價鍵 B、氫鍵 C、離子鍵 D、疏水鍵 E、非共價鍵膜脂中最多的是（ ）。A、脂肪 B、糖脂 C、磷脂 D、膽固醇 E、以上都不是在電子顯微鏡上，單位膜為（ ）。A、一層深色帶 B、一層淺色帶 C、一層深色帶和一層淺色帶 D、二層深色帶和中間一層淺色帶 E、二層淺色帶和中間一層深色帶生物膜的液態(tài)流動性主要取決于（ ）。A、蛋白質(zhì) B、多糖 C、類脂 D、糖蛋白 E、糖脂膜結(jié)構(gòu)功能的特殊性主要取決于（ ）。A、膜中的脂類 B、膜中蛋白質(zhì)的組成 C、膜中糖類的種類D、膜中脂類與蛋白質(zhì)的關(guān)系 E、膜中脂類和蛋白質(zhì)的比例從上皮細胞的頂端到底部，各種細胞表面連接出現(xiàn)的順序是（ ）。A、緊密連接→粘合帶→橋粒→半橋粒 B、橋?！霕蛄！澈蠋Аo密連接C、粘合帶→緊密連接→半橋?！鷺蛄? D、緊密連接→粘合帶→半橋?！鷺蛄＜毎麅?nèi)中間纖維通過（ ）連接方式，可將整個組織的細胞連成一個整體。A、粘合帶 B、粘合斑 C、橋粒 D、半橋粒1體外培養(yǎng)的成纖維細胞通過（ ）附著在培養(yǎng)瓶上。A、粘合斑 B、粘合帶 C、橋粒 D、半橋粒1下列細胞外基質(zhì)中（ ）起細胞外基質(zhì)骨架的作用。A、膠原 B、層纖連蛋白 C、纖連蛋白 D、蛋白聚糖1在下列蛋白中，除（ ）外，都是粘合帶所需要的。A、跨膜蛋白 B、細胞內(nèi)附著蛋白 C、肌動蛋白 D、中間纖維1有肌動蛋白參與的細胞連接類型是（ ）。A、緊密連接 B、橋粒 C、粘合帶 D、間隙連接1在細胞外基質(zhì)中將各種成分組織起來并與細胞表面結(jié)合的是（ ）。A、膠原 B、蛋白聚糖 C、纖連蛋白 D、中間纖維1能夠使細胞錨定靜止又能誘導細胞運動遷移的是（ ）。A、蛋白聚糖 B、纖連蛋白 C、層纖連蛋白 D、膠原四、判斷題脂質(zhì)體是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的趨勢而制備的人工膜。（ ）外在(外周)膜蛋白為水不溶性蛋白，形成跨膜螺旋，與膜結(jié)合緊密，需用去垢劑使膜崩解后才可分離。（ ）哺乳動物成熟的紅細胞沒有細胞核和內(nèi)膜體系，所以紅細胞的質(zhì)膜是最簡單最易操作的生物膜。（ ）連接子(connexon) 是錨定連接的基本單位。血影是紅細胞經(jīng)低滲處理后，質(zhì)膜破裂，釋放出血紅蛋白和其他胞內(nèi)可溶性蛋白后剩下的結(jié)構(gòu)，是研究質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)及其與膜骨架的關(guān)系的理想材料。（ ）上皮細胞、肌肉細胞和血細胞都存在細胞連接。（ ）—間隙連接和緊密連接都是脊椎動物的通訊連接方式。（ ）—透明質(zhì)酸是一種重要的氨基聚糖，是增殖細胞和遷移細胞外基質(zhì)的主要成分。（ ）+橋粒和半橋粒的形態(tài)結(jié)構(gòu)不同，但功能相同。（ ）—所有生物膜中的蛋白質(zhì)和脂的相對含量都相同。（ ）+五、簡答題簡述細胞膜的生理作用。生物膜的基本結(jié)構(gòu)特征是什么？與它的生理功能有什么聯(lián)系？試比較單位膜模型與流動鑲嵌模型的優(yōu)缺點。紅細胞質(zhì)膜蛋白及膜骨架的成分是什么？簡述細胞膜的基本特性。六、論述題動物細胞連接主要有哪幾種類型，各有何功能？胞外基質(zhì)的組成、分子結(jié)構(gòu)及生物學功能是什么？七、翻譯細胞表面的粘附分子 細胞膜 細胞連接 細胞外被 生物膜第四章參考答案一、名詞解釋生物膜 ：把細胞所有膜相結(jié)構(gòu)稱為生物膜。脂質(zhì)體：是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的而制備的人工膜。雙型性分子（兼性分子）：像磷子分子即含親水性的頭部、又含疏水性的尾部，這樣的分子叫雙性分子。內(nèi)在蛋白：分布于磷脂雙分子層之間，以疏水氨基酸與磷脂分子的疏水尾部結(jié)合，結(jié)合力較強。只有用去垢劑處理，使膜崩解后，才能將它們分離出來。外周蛋白：為水溶性蛋白,靠離子鍵或其它弱鍵與膜表面的蛋白質(zhì)分子或脂分子極性頭部非共價結(jié)合，易分離。細胞外被：細胞外被(cell coat)：又稱糖萼，細胞膜外表面覆蓋的一層粘多糖物質(zhì)，實際上是細胞表面與質(zhì)膜中的蛋白或脂類分子共價結(jié)合的寡糖鏈，是膜正常的結(jié)構(gòu)組分，對膜蛋白起保護作用，在細胞識別中起重要作用。細胞連接：細胞連接是多細胞有機體中相鄰細胞之間通過細胞膜相互聯(lián)系、協(xié)同作用的重要組織方式，在結(jié)