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正文內(nèi)容

微生物實(shí)驗(yàn)室病原微生物評估報告(編輯修改稿)

2025-05-04 03:30 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 可通過性接觸傳播,其中輕癥或無癥狀的淋病患者是重要的傳染源。其傳播途徑主要包括性交傳染,還可通過非性接觸傳播,如通過接觸患者分泌物污染的用品(衣褲、床上用品、毛巾、浴盆、馬桶等)間接感染;孕婦淋病患者當(dāng)羊膜破裂,可繼發(fā)羊膜腔內(nèi)及胎兒感染;新生兒經(jīng)過患淋病的母體產(chǎn)道時??梢鹆芫匝垩?;另外尚可通過醫(yī)護(hù)人員的手和器具引起醫(yī)源性感染。 本病最初多侵犯尿道、宮頸內(nèi)膜,繼而可波及前列腺、精囊、副睪、子宮內(nèi)膜及輸卵管。有時肛門、直腸、咽粘膜、眼結(jié)膜也可受染。尚可經(jīng)血行播散引起菌血癥、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎及腦膜炎,可引起死亡或不育、不孕、失明及尿道狹窄等后果。由于本病潛伏期短、傳染性強(qiáng)、后果嚴(yán)重,因此它是我國當(dāng)前重點(diǎn)防治的性病之一。二、淋病奈瑟菌的生物學(xué)特性 淋病奈瑟菌屬奈瑟菌屬,鏡下呈腎形,常成雙排列,鄰近面扁平或稍凹,像兩瓣黃豆對在一起。革蘭氏染色陰性,呈粉紅色,美藍(lán)染色呈藍(lán)色。急性炎癥期細(xì)菌多在患者分泌物的少部分中性粒細(xì)胞的胞漿中,慢性期則多在細(xì)胞外,且有些可呈單個球形或四聯(lián)狀。人工培養(yǎng)后形態(tài)亦常呈球形、單個、成雙或四聯(lián)排列。 淋球菌適于潮濕(相對溫度80%~85%)、溫暖(℃~℃)、中性偏堿(~)、含5%~10%二氧化碳的條件下生長。最怕干燥,在完全干燥環(huán)境下只能存活1~2小時,對溫度變化敏感,超過38℃或低于30℃則不能生長,在培養(yǎng)基上室溫放置1~2天即可死亡,在39℃ 存活13小時,42℃存活15分鐘,50℃存活5分鐘。如在不完全干燥的衣褲、被褥、毛巾、玩具上則可存活18~24小時。一般消毒劑容易將它殺滅,在 1:4000硝酸銀溶液中7分鐘死亡,1%石炭酸溶液中3分鐘內(nèi)死亡。 淋球菌較為嬌嫩,酶系統(tǒng)不完整,初代培養(yǎng)普通培養(yǎng)基不易成功,需在含有動物蛋白的培養(yǎng)基上,且含有二氧化碳的條件下才能生長。淋球菌在血瓊脂培養(yǎng)基孵育24小時后,~1mm的圓形稍隆起,濕潤光滑,半透明,邊緣呈花瓣狀,有粘性的露滴狀菌。 淋球菌的生化反應(yīng)不發(fā)達(dá),只分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不分解麥芽糖及蔗糖。藉助上述生化特性亦可與腦膜炎球菌及其他奈瑟菌相鑒別。淋球菌能產(chǎn)生氧化酶和過氧化氫酶,在診斷上有一定意義。三、淋病奈瑟菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其診斷細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其它檢查(1) 涂片檢查:取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為5060%,且有假陽性,因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因?yàn)槠渌紊鷮僭谘什渴钦5木?。另外對癥狀不典型的涂片陽性應(yīng)作進(jìn)一步檢查。(2)培養(yǎng)檢查:淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對癥狀很輕或無癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。 目前國外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的ThayerMartin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基。國內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長。在36℃,70%濕度,含 5%10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),2448小時觀察結(jié)果。培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài),革蘭氏染色,氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等鑒定。培養(yǎng)陽性率男性 80%95%,女性8090%。培養(yǎng)后需根據(jù)菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)做出鑒定。培養(yǎng)陽性率男性為80%~95%,女性為 80%~90%。(3)抗原檢測1.固相酶免疫試驗(yàn)(EIA):可用來檢測臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長時間遠(yuǎn)送時使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。2.直接免疫熒光試驗(yàn):通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免疫熒光試驗(yàn)。但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實(shí)驗(yàn)人員的判斷水平,故該實(shí)驗(yàn)尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。(4)基因診斷1.淋球菌的基因探針診斷:淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。淋球菌的基因擴(kuò)增檢測 PCR技術(shù)和連接酶鏈反應(yīng)的出現(xiàn)進(jìn)一步提高了檢測淋球菌的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡便的優(yōu)點(diǎn),可以直接檢測臨床標(biāo)本中極微量的病原體。(5)藥敏試驗(yàn) 對培養(yǎng)陽性者可進(jìn)一步用紙片擴(kuò)散法做藥敏試驗(yàn),或用瓊脂平皿稀釋法測定藥物最小抑菌濃度(MIC),以及用紙片酸度定量法檢測β-內(nèi)酰胺酶(使用 Whatman I號濾紙PPNG菌株能使其顏色由藍(lán)變黃,陽性為PPNG,陰性為NPPNG),以確定淋球菌對抗生素的敏感性,合理選擇用藥。四、淋病的預(yù)防淋病奈瑟菌的預(yù)防要點(diǎn)如下:。,以防止淋球菌感染。,可應(yīng)用于已知與淋病患者有性接觸者。,徹底消滅傳染源。,不與家人、小孩(尤其女孩)同床、共浴。,防止新生兒淋病性眼炎發(fā)生。,方可結(jié)婚、生育和安排工作。五、淋病奈瑟菌的生物安全防護(hù)根據(jù)《病原微生物生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中的有關(guān)規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)霍亂弧菌屬于三類,BSL2。相關(guān)的防護(hù)事宜包括:(1)操作要求實(shí)驗(yàn)時,未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任同意,限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。對于污染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。注射和吸取感染材料時,只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進(jìn)行人工處理,要不將之小心放入不會被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前,應(yīng)按照相關(guān)的規(guī)定進(jìn)行消毒。所有的培養(yǎng)物、儲存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近實(shí)驗(yàn)室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。離開該系統(tǒng)進(jìn)行消毒的物料,在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝,其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時,要立即向?qū)嶒?yàn)室主任報告。進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察、治療,保留書面記錄。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其他傳染源污染后,?shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消毒。污染的設(shè)備在送去修理、維護(hù)前,要按照相關(guān)的規(guī)定消毒;在離開設(shè)施轉(zhuǎn)移前,要按照相關(guān)的規(guī)定打包運(yùn)輸。(2)安全設(shè)備正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護(hù)設(shè)施、或物理遏制裝置。確定可能形成傳染性濺出物的實(shí)驗(yàn)過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標(biāo)本等。涉及高濃度或大體積的傳染源時,若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機(jī),若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實(shí)驗(yàn)室內(nèi)離心。當(dāng)必須在生物安全柜外處理標(biāo)本時,需采取面部保護(hù)措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或?yàn)⒌矫嫔?。在?shí)驗(yàn)室內(nèi),必須使用專用的防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域時,防護(hù)服必須留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。防護(hù)服可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中??赡芙佑|潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時,要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用,不能用于接觸“潔凈”的表面(鍵盤、電話等),也不應(yīng)當(dāng)戴著到實(shí)驗(yàn)室外。要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后,要洗手。結(jié)核桿菌的生物危害評估報告一、結(jié)核桿菌的傳播與致病結(jié)核桿菌通常指結(jié)核分枝桿菌和牛分枝桿菌,其中結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)是引起人類結(jié)核病的主要病原體。 結(jié)核分枝桿菌的主要傳染途徑是經(jīng)呼吸道傳播,由排菌的肺結(jié)核病人在咳嗽、噴嚏或大聲說話時隨呼吸道分泌物排出到空氣中,或排菌的肺結(jié)核病人隨地吐痰通過再生氣溶膠(塵埃),攜帶結(jié)核桿菌,飛揚(yáng)在空氣中,被健康的人吸入后發(fā)生感染和發(fā)病,因此排菌的肺結(jié)核患者(尤其是痰涂片陽性未經(jīng)治療者)是結(jié)核病的主要傳染源。一般結(jié)核病患者痰中結(jié)核桿菌越多,傳播的危險性越大。患者排出的飛沫在110微米者,在空氣中漂浮時間長,傳染性越大?;颊卟∽兒桶Y狀越嚴(yán)重,傳染性也越大。周圍人群與患者接觸越密切者,受感染的機(jī)會越多。與患者同處于空氣不流通的室內(nèi)的密切接觸者,受感染的可能性增大。未受結(jié)核感染的人是結(jié)核病易感人群,由于結(jié)核病是人畜共患病,哺乳類動物如牛、鹿、猴、豬、貓、狗等也都可以患結(jié)核病。 感染結(jié)核桿菌后,終身都有可能發(fā)病,發(fā)病時間因人而異,一般2個月~20年才發(fā)病。典型肺結(jié)核起病緩慢,病程較長,有低熱、倦怠、食欲不振、咳嗽及少量咯血。但多數(shù)患者病灶輕微,無顯著癥狀。(1)癥狀?、偃戆Y狀 表現(xiàn)為午后低熱、乏力、食欲不振、消瘦、盜汗等。②呼吸系統(tǒng)癥狀 通常為干咳或帶少量黏液痰;繼發(fā)感染時,痰呈粘液膿性。約1/3患者有不同程度咯血,咯血后常有低熱。大咯血時可發(fā)生失血性休克,偶因血塊阻塞大氣道引起窒息。病灶炎癥累及壁層胸膜時,相應(yīng)胸壁有刺痛,一般多不劇烈,隨呼吸及咳嗽而加重。若并發(fā)氣胸或大量胸腔積液,呼吸困難癥狀尤為嚴(yán)重。(2)體征 早期病灶小或位于肺組織深部,多無異常體征。若病變范圍較大,患側(cè)肺部呼吸運(yùn)動減弱,叩診呈濁音,聽診時呼吸音減低,或?yàn)橹夤芊闻莺粑?。因肺結(jié)核好發(fā)于肺上葉尖后段及下葉背段,故鎖骨上下、肩胛區(qū)叩診略濁,咳嗽后偶可聞及濕啰音,對診斷有參考意義。肺部病變發(fā)生廣泛纖維化或胸膜粘連增厚時,患側(cè)胸廓常呈下陷、肋間隙變窄、氣管移位與叩濁,對側(cè)可有代償性肺氣腫征。二、結(jié)核桿菌的生物學(xué)特性從分類學(xué)上看結(jié)核桿菌屬于裂殖菌綱、放線菌目、分枝桿菌科、分枝桿菌屬。 結(jié)核分枝桿菌正常典型的形態(tài)是直或稍彎曲、兩端鈍圓的桿菌,菌體長14納米,無芽胞、無莢膜、無鞭毛,生長發(fā)育期間有分枝生長傾向。鏡下常呈單個散在或呈“人、V、T、Y”形排列,菌體多時細(xì)菌扭集一起呈繩索狀、束狀或叢狀。此外結(jié)核桿菌菌體還具有多形態(tài)特征,受不良生長條件的影響可分別表現(xiàn)為桿菌型 (基本形態(tài))、濾過型、顆粒型和球菌型(L型)4種不同的類型。 分枝桿菌生長緩慢,在人工培養(yǎng)基內(nèi)繁殖一代約需1520小時,一般需24周或更長時間始見菌落生長,甚至有極少數(shù)生長極為緩慢者需8周以上才開始有菌落生長。它為專性需氧菌,生長的溫度范圍是3540℃,pH 。培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高且特殊,培養(yǎng)基需含雞蛋、血清、氨基酸、甘油等營養(yǎng)豐富的復(fù)雜有機(jī)物及少量無機(jī)鹽類。而且結(jié)核桿菌隨著環(huán)境的改變易發(fā)生菌落形態(tài)、毒力、L型及藥物耐藥性變異,如在人工培養(yǎng)基上反復(fù)連續(xù)傳代,可產(chǎn)生變異而致毒力降低,三、結(jié)核桿菌的檢測與診斷(1)細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其它檢查① 結(jié)核菌檢查:是確診肺結(jié)核最特異性的方法,痰中找到結(jié)核菌為確診肺結(jié)核的主要依據(jù)。涂片抗酸染色鏡檢快速簡便。在我國非典型分枝桿菌尚屬少見,故抗酸桿菌陽性,肺結(jié)核診斷基本即可成立。痰菌陽性表明其病灶是開放性的,具有傳染性。培養(yǎng)法更為精確,尚可作藥物敏感試驗(yàn)與菌型鑒定。但結(jié)核菌生長緩慢,培養(yǎng)較為費(fèi)時,但精確可靠,特異性高。若涂片陰性或診斷有疑問時,培養(yǎng)尤其重要;而且,培養(yǎng)后可做藥物敏感性測定,指導(dǎo)臨床用藥。PCR技術(shù)檢測結(jié)核菌 DNA快速、簡便,并可鑒定菌型,不足之處是可能出現(xiàn)假陽性或假陰性。② 影像學(xué)檢查:胸部X線檢查可以發(fā)現(xiàn)肺內(nèi)病變的部位、范圍、有無空洞或空洞大小、洞壁厚薄等。X線對各類結(jié)核病的透過度不同,通過X線檢查能大致估計結(jié)核病灶的病理性質(zhì),并能早期發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核,以及判斷病情發(fā)展及治療效果,有助于決定治療方案。肺結(jié)核的常見X線表現(xiàn)包括:纖維鈣化的硬結(jié)病灶、浸潤性病灶以及干酪樣病灶等。胸部CT檢查對于發(fā)現(xiàn)微小或隱蔽性病變,了解病變范圍及病變鑒別等方面均有幫助。③ 結(jié)核菌素試驗(yàn):是診斷結(jié)核感染的參考指標(biāo)。使用的變應(yīng)原有舊結(jié)核菌素(old tuberculin, OT)和結(jié)核菌素的純化蛋白衍化物(purified protein derivative, PPD),現(xiàn)臨床多用PPD。(5IU),硬結(jié)平均直徑≥5mm為陽性反應(yīng)。結(jié)核菌素試驗(yàn)有助于判斷有無結(jié)核菌感染。若呈強(qiáng)陽性反應(yīng),常表示為活動性結(jié)核病。結(jié)核菌素試驗(yàn)陽性反應(yīng)僅表示曾有結(jié)核感染,并不一定現(xiàn)在患病。結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性反應(yīng)除表示沒有結(jié)核菌感染外,尚需考慮以下情況:結(jié)核菌在感染4~8周后才建立充分變態(tài)反應(yīng),在這之前,結(jié)核菌素試驗(yàn)可呈陰性;應(yīng)用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑,或營養(yǎng)不良、麻疹、百日咳等患者,結(jié)核菌素反應(yīng)亦可暫時消失。④ 其它檢查 結(jié)核病患者血像通常無改變,嚴(yán)重病例常有繼發(fā)性貧血,急性粟粒型肺結(jié)核時白細(xì)胞總數(shù)減低或出現(xiàn)類白血病反應(yīng)。血沉增快常見于活動性肺結(jié)核。用ELISA法檢測患者血清中特異性抗體,可對無痰或痰菌陰性者和肺外結(jié)核的診斷提供參考。纖支鏡檢查對于發(fā)現(xiàn)氣管內(nèi)膜結(jié)核、了解有無腫瘤、吸取分泌物、解除阻塞或作病原菌及脫落細(xì)胞檢查,以及取活組織作病理檢查等,均有重要診斷價值。淺表淋巴結(jié)活檢,有助于結(jié)核的鑒別診斷。(2)診斷和鑒別診斷  痰結(jié)核菌檢查不僅是診斷肺結(jié)核的主要依據(jù),亦是考核療效、隨訪病情的重要指標(biāo)。X線檢查是診斷肺結(jié)核的必要手段,對早期診斷、確定病變部位、范圍、性質(zhì)、了解其演變及選擇治療等均具有重要價值。在臨床診斷中,我國現(xiàn)用的分類法包括四部分,即肺結(jié)核類型、病變范圍及空洞部位、痰菌檢查、活動性及轉(zhuǎn)歸。肺結(jié)核分為五型:Ⅰ型為原發(fā)型肺結(jié)核;Ⅱ型為血行播散型肺結(jié)核;Ⅲ型為浸潤型肺結(jié)核;Ⅳ型為慢性纖維空洞型肺結(jié)核;Ⅴ型為結(jié)核性胸膜炎。還應(yīng)注意將結(jié)核病與肺癌、肺炎、支氣管擴(kuò)張、慢性支氣管哮喘和其它發(fā)熱性疾病如傷寒、敗血癥、白血病、縱隔淋巴瘤及結(jié)節(jié)病等進(jìn)行鑒別。四、結(jié)核桿菌的防治及
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