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微生物實(shí)驗(yàn)室病原微生物評(píng)估報(bào)告-wenkub.com

2025-04-04 03:30 本頁(yè)面
   

【正文】 它是存在于人和動(dòng)物腸道內(nèi)的條件致病菌,易致泌尿道和呼吸道感染,它也可發(fā)生傷口感染、菌血癥和敗血癥,尤其易發(fā)于下列危險(xiǎn)因素的患者:如長(zhǎng)期住院(特別是在ICU)、患嚴(yán)重疾病、長(zhǎng)期應(yīng)用廣譜抗生素、進(jìn)行侵襲性操作、應(yīng)用放療或化療及免疫抵制劑等患者。一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用,不能用于接觸“潔凈”的表面(鍵盤(pán)、電話等),也不應(yīng)當(dāng)戴著到實(shí)驗(yàn)室外。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),必須使用專用的防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。(2)安全設(shè)備正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級(jí)生物安全柜、或其他合適的人員防護(hù)設(shè)施、或物理遏制裝置。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時(shí),要立即向?qū)嶒?yàn)室主任報(bào)告。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前,應(yīng)按照相關(guān)的規(guī)定進(jìn)行消毒。注射和吸取感染材料時(shí),只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。很多志賀菌株可能對(duì)氨芐青霉素和四環(huán)素耐藥。過(guò)早地應(yīng)用高滲性液體(牛奶,鼻飼、自制電解質(zhì)混合液)可引起高張性損害,包括抽搐。Sd株口服后,因腸道無(wú)鏈霉素它不生長(zhǎng)也不立即死亡,而產(chǎn)生SIgA,但只對(duì)同型菌的再感染有保護(hù)作用,故使用此菌苗時(shí)應(yīng)考慮到當(dāng)?shù)爻R?jiàn)流行菌型。臟衣和床單應(yīng)放在帶蓋的桶內(nèi)用肥皂水浸泡然后再煮沸消毒。,測(cè)定病人糞便中或增菌培養(yǎng)液中細(xì)菌及其可溶性抗原。糞便免疫學(xué)檢查與細(xì)菌培養(yǎng)比較具有早期快速診斷的優(yōu)點(diǎn),但由于糞便中抗原成分復(fù)雜,易出現(xiàn)假陽(yáng)性,故目前臨床上尚未廣泛應(yīng)用。這些拭子及大便標(biāo)本均應(yīng)立即鏡檢及培養(yǎng),標(biāo)本接種于腸道桿菌選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基上,℃培養(yǎng)1824h,取可疑菌落進(jìn)行生化反應(yīng)和血清鑒定,以確定菌群和菌型;如不能立即培養(yǎng),可放于30%甘油緩沖鹽水保存液中。確診則依賴于糞便培養(yǎng)出痢疾桿菌。ST和內(nèi)毒素的持續(xù)存在的聯(lián)合作用可能與志賀菌感染的溶血性尿毒綜合征等并發(fā)癥有關(guān)。正是依據(jù)O抗原的不同以及生化反應(yīng)的結(jié)果將志賀菌分成了4個(gè)血清群和32個(gè)血清型;而K抗原存在于A群和C群的全部菌型以及B群種的部分菌種中,不耐熱,對(duì)分類無(wú)意義,但它的存在將阻斷O抗原與相應(yīng)抗血清的凝集作用,故可先以100℃60min破壞之。它們最適的生長(zhǎng)溫度為37℃,~,對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不高,可在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。但有HLAB27基因型的病人在志賀菌病后常常比較容易發(fā)生關(guān)節(jié)炎或明顯的Reiter綜合征。除此以外,還可發(fā)生繼發(fā)性細(xì)菌感染,特別是衰弱和脫水的病人。若不治療,患兒可在12日內(nèi)死亡;若患兒存活,非粘液性腹瀉,急于排便,系軟便或含有粘液,膿及常有血液的水瀉。志賀菌可穿入低位腸段的粘膜,引起粘液分泌,充血,白細(xì)胞浸潤(rùn),水腫,并常有表淺粘膜潰瘍。蒼蠅可作為機(jī)械性媒介,水源性傳播不常見(jiàn)。本屬細(xì)菌分布于全世界,是炎癥性痢疾的典型病原菌,很多地區(qū)5%~10%的腹瀉性疾病是由該菌屬所致。實(shí)驗(yàn)室在處理過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生氣溶膠,所以懷疑假結(jié)核棒狀桿菌的菌株必須在生物安全柜內(nèi)處理。:硝酸鹽 陰性;尿素 陽(yáng)性;4. PCR 是一種快速的試驗(yàn),可以在接受到菌株后34 小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。三、細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其它檢查:革蘭染色呈革蘭陽(yáng)性桿菌、多型性、錐形或棒狀的細(xì)菌末端略有彎曲。有時(shí)菌體染色不均勻呈柵欄狀排列。假結(jié)核棒狀桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告一、細(xì)菌的傳播與致病 假結(jié)核棒狀桿菌廣泛分布于自然界的水和土壤中,是一種條件致病菌。可能接觸潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時(shí),要戴手套。當(dāng)必須在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí),需采取面部保護(hù)措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或?yàn)⒌矫嫔?。污染的設(shè)備在送去修理、維護(hù)前,要按照相關(guān)的規(guī)定消毒;在離開(kāi)設(shè)施轉(zhuǎn)移前,要按照相關(guān)的規(guī)定打包運(yùn)輸。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒的物料,在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝,其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。對(duì)于污染的銳器,必須時(shí)刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。(1)操作要求實(shí)驗(yàn)時(shí),未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任同意,限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。若一旦發(fā)生了中毒,則立即停止食用可疑污染的食品,多飲水。四、細(xì)菌的防治 蠟樣芽胞桿菌所引起的食物中毒多因食品在食用前保存溫度較高(20℃以上)和放置時(shí)間較長(zhǎng),故對(duì)中毒的預(yù)防包括:由于蠟樣芽胞桿菌在15℃以下不繁殖,剩飯、剩菜應(yīng)放在低溫保存。:1)動(dòng)力試驗(yàn);2)根狀生長(zhǎng)試驗(yàn);3)溶菌活性試驗(yàn);4)蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn):蠟樣芽胞桿菌有動(dòng)力、強(qiáng)溶血、不形成根狀菌落,或不產(chǎn)生蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶。將可疑食物置無(wú)菌乳缽中,加適量生理鹽水研磨后,劃線接種于普通瓊脂平板或血瓊脂平板,若為嘔吐物可直接劃線接種于上述平板,于37℃培養(yǎng)。將陽(yáng)性管培養(yǎng)物劃線接種于MYP平板,于30℃培養(yǎng)2448小時(shí)。某些不適合用平板計(jì)數(shù)法的脫水淀粉類食品也可用此法檢驗(yàn)。將平板置30℃培養(yǎng)24小時(shí),并檢查菌落周圍有沉淀圈者,表示產(chǎn)生卵磷脂酶。加Butterfield磷酸鹽緩沖稀釋液450mL,以高速()均質(zhì) 2min。采集可疑食物或收集糞便和嘔吐物進(jìn)行直接涂片染色鏡檢和其他操作。此外蠟桿芽胞桿菌耐熱,其食物中毒菌株中的游離芽胞能耐受100℃30分鐘,而干熱滅菌需120℃60分鐘才能殺死。在普通瓊脂上生成的菌落較大,直徑310mm,灰白色、不透明,表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀,邊緣常呈擴(kuò)展?fàn)罟识妹? 蠟樣芽胞桿菌為革蘭氏陽(yáng)性大桿菌,35μm,需氧或兼性需氧,生長(zhǎng)6h即可形成原形芽胞,芽胞位于菌體的中心或次末端不突出菌體,菌體兩端較平整,多數(shù)呈鏈狀排列,與炭疽桿菌相似。致嘔吐型綜合癥的腸毒素至今尚未提純,致腹瀉型綜合癥的腸毒素已提純,103。腹瀉型的潛伏期為615小時(shí),癥狀以水瀉、腹痙攣、腹痛為主,有時(shí)會(huì)有惡心等癥狀,病程約24小時(shí),這種類型的癥狀類似于產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的食物中毒。但也有在可疑食品中找不到蠟樣芽胞桿菌而引起食物中毒的情況,一般認(rèn)為是由于蠟桿芽胞桿菌產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素所致。蠟樣芽胞桿菌作為一種食源性疾病的報(bào)導(dǎo)較多,在各種食品中的檢出率也較高,如1982年犬飼等對(duì)日本名古屋所采1641份食品樣品中,有193份檢出了該菌、陽(yáng)性率為 %;1984年我國(guó)有關(guān)單位對(duì)南京市所采211份食品樣品中,有81份檢出了該菌,%。蠟樣芽胞桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告一、細(xì)菌的傳播與致病 蠟樣芽胞桿菌在自然界分布廣泛,常存在于土壤、灰塵和污水中,植物和許多生熟食品中常見(jiàn)。(3)實(shí)驗(yàn)室人員的防護(hù)從事結(jié)核桿菌檢測(cè)、研究的實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作,出現(xiàn)下列情況,不能進(jìn)入:身體出現(xiàn)開(kāi)放性損傷;患發(fā)熱性疾病;感冒、上呼吸道感染、或其他導(dǎo)致抵抗力下降的情況;妊娠、已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域內(nèi)連續(xù)工作4h以上,或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。并且操作者著二級(jí)生物防護(hù)用品。尤其是痰標(biāo)本進(jìn)行涂片制作時(shí),在打開(kāi)標(biāo)本容器、涂片、加熱固定時(shí)容易產(chǎn)生氣溶膠,為防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的氣溶膠導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室感染,所有操作應(yīng)在二級(jí)生物安全柜中進(jìn)行,并使用二級(jí)生物安全防護(hù)。病人留取標(biāo)本應(yīng)在獨(dú)立的房間,應(yīng)定時(shí)作好房間消毒,保持通風(fēng)。建立健全傳染病病原管理組織;制訂和完善傳染病實(shí)驗(yàn)室生物安全的技術(shù)操作規(guī)范;加強(qiáng)可能暴露于結(jié)核桿菌或潛在感染性材料的相關(guān)業(yè)務(wù)人員生物安全知識(shí)培訓(xùn)和風(fēng)險(xiǎn)和意識(shí)教育;切實(shí)落實(shí)各項(xiàng)管理制度,預(yù)防和控制實(shí)驗(yàn)室等渠道造成結(jié)核桿菌感染和傳播;加強(qiáng)部門間溝通與合作,加強(qiáng)對(duì)高暴露實(shí)驗(yàn)室工作人員的監(jiān)測(cè)工作,并保證他們能及時(shí)被發(fā)現(xiàn)與治療。(1)安全防護(hù) 大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室獲得性結(jié)核病是由于處理感染者標(biāo)本引起——可從痰、尿、組織、大便和其它體液標(biāo)本中分離到結(jié)核桿菌。對(duì)咯血患者,應(yīng)對(duì)癥治療,包括休息、止咳、鎮(zhèn)靜以及應(yīng)用止血藥如安絡(luò)血等。下標(biāo)數(shù)字表示每日用藥次數(shù);其余數(shù)字表示用藥月數(shù),斜線前數(shù)字表示前2個(gè)月,斜線后字表示后幾個(gè)月。 臨床上肺結(jié)核化學(xué)治療的原則是早期、規(guī)律、全程、適量、聯(lián)合。肺結(jié)核分為五型:Ⅰ型為原發(fā)型肺結(jié)核;Ⅱ型為血行播散型肺結(jié)核;Ⅲ型為浸潤(rùn)型肺結(jié)核;Ⅳ型為慢性纖維空洞型肺結(jié)核;Ⅴ型為結(jié)核性胸膜炎。淺表淋巴結(jié)活檢,有助于結(jié)核的鑒別診斷。④ 其它檢查 結(jié)核病患者血像通常無(wú)改變,嚴(yán)重病例常有繼發(fā)性貧血,急性粟粒型肺結(jié)核時(shí)白細(xì)胞總數(shù)減低或出現(xiàn)類白血病反應(yīng)。結(jié)核菌素試驗(yàn)有助于判斷有無(wú)結(jié)核菌感染。胸部CT檢查對(duì)于發(fā)現(xiàn)微小或隱蔽性病變,了解病變范圍及病變鑒別等方面均有幫助。PCR技術(shù)檢測(cè)結(jié)核菌 DNA快速、簡(jiǎn)便,并可鑒定菌型,不足之處是可能出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。痰菌陽(yáng)性表明其病灶是開(kāi)放性的,具有傳染性。培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高且特殊,培養(yǎng)基需含雞蛋、血清、氨基酸、甘油等營(yíng)養(yǎng)豐富的復(fù)雜有機(jī)物及少量無(wú)機(jī)鹽類。鏡下常呈單個(gè)散在或呈“人、V、T、Y”形排列,菌體多時(shí)細(xì)菌扭集一起呈繩索狀、束狀或叢狀。因肺結(jié)核好發(fā)于肺上葉尖后段及下葉背段,故鎖骨上下、肩胛區(qū)叩診略濁,咳嗽后偶可聞及濕啰音,對(duì)診斷有參考意義。病灶炎癥累及壁層胸膜時(shí),相應(yīng)胸壁有刺痛,一般多不劇烈,隨呼吸及咳嗽而加重。(1)癥狀?、偃戆Y狀 表現(xiàn)為午后低熱、乏力、食欲不振、消瘦、盜汗等。未受結(jié)核感染的人是結(jié)核病易感人群,由于結(jié)核病是人畜共患病,哺乳類動(dòng)物如牛、鹿、猴、豬、貓、狗等也都可以患結(jié)核病。患者排出的飛沫在110微米者,在空氣中漂浮時(shí)間長(zhǎng),傳染性越大。脫掉手套后,要洗手。防護(hù)服可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí),若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機(jī),若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開(kāi),則可在開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室內(nèi)離心。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其他傳染源污染后,?shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消毒。轉(zhuǎn)移到就近實(shí)驗(yàn)室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。非一次性銳器必須放置在堅(jiān)壁容器中,轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。,方可結(jié)婚、生育和安排工作。,徹底消滅傳染源。(5)藥敏試驗(yàn) 對(duì)培養(yǎng)陽(yáng)性者可進(jìn)一步用紙片擴(kuò)散法做藥敏試驗(yàn),或用瓊脂平皿稀釋法測(cè)定藥物最小抑菌濃度(MIC),以及用紙片酸度定量法檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶(使用 Whatman I號(hào)濾紙PPNG菌株能使其顏色由藍(lán)變黃,陽(yáng)性為PPNG,陰性為NPPNG),以確定淋球菌對(duì)抗生素的敏感性,合理選擇用藥。2.直接免疫熒光試驗(yàn):通過(guò)檢測(cè)淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免疫熒光試驗(yàn)。培養(yǎng)陽(yáng)性率男性 80%95%,女性8090%。 目前國(guó)外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的ThayerMartin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽(yáng)性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。淋球菌能產(chǎn)生氧化酶和過(guò)氧化氫酶,在診斷上有一定意義。 淋球菌較為嬌嫩,酶系統(tǒng)不完整,初代培養(yǎng)普通培養(yǎng)基不易成功,需在含有動(dòng)物蛋白的培養(yǎng)基上,且含有二氧化碳的條件下才能生長(zhǎng)。如在不完全干燥的衣褲、被褥、毛巾、玩具上則可存活18~24小時(shí)。急性炎癥期細(xì)菌多在患者分泌物的少部分中性粒細(xì)胞的胞漿中,慢性期則多在細(xì)胞外,且有些可呈單個(gè)球形或四聯(lián)狀。尚可經(jīng)血行播散引起菌血癥、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎及腦膜炎,可引起死亡或不育、不孕、失明及尿道狹窄等后果。 淋病患者是主要傳染源,有癥狀或無(wú)癥狀的患者均可通過(guò)性接觸傳播,其中輕癥或無(wú)癥狀的淋病患者是重要的傳染源。要備有帶滑石粉的乳膠手套。人員到非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域時(shí),防護(hù)服必須留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源的容器、采集感染標(biāo)本等。進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評(píng)估、觀察、治療,保留書(shū)面記錄。所有的培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。用過(guò)的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進(jìn)行人工處理,要不將之小心放入不會(huì)被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。對(duì)這些病人應(yīng)嚴(yán)格隔離,以防他們的細(xì)菌傳播。鄰氯青霉素,雙氯青霉素,TMPSMZ,環(huán)丙沙星及局部用莫匹羅星(mupirocin)可用于治療MRSA帶菌狀態(tài),但MRSA對(duì)這些藥物可產(chǎn)生抗藥性。某些嚴(yán)重的或有并發(fā)癥的感染,可能需要靜脈給藥治療6~8周,然后再口服治療1個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。這些細(xì)菌對(duì)氨基糖苷類和大環(huán)內(nèi)酯類(紅霉素,克拉霉素,阿齊霉素,林可霉素和氯林可霉素)的耐藥性也很普遍。雖然頭孢菌素和萬(wàn)古霉素都有效,但通常首選一種耐青霉素酶的青霉素。培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)在開(kāi)始治療前或更換抗生素之前獲取。3)無(wú)菌措施(如檢查病人前后徹底洗手和消毒合用的器械)至關(guān)重要。防止金黃色葡萄球菌對(duì)奶及其制品的污染:如牛奶廠要定期檢查奶牛的乳房,不能擠用患化膿性乳腺炎的牛奶;奶擠出后,要迅速冷至10℃以下,以防毒素生成、細(xì)菌繁殖。 如上述,注意與其他凝固酶陽(yáng)性的葡萄球菌的鑒別要點(diǎn):PYR(吡咯烷酮β萘基酰胺試驗(yàn)陰性;VP試驗(yàn)陽(yáng)性;鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)陰性。本試驗(yàn)金黃色葡萄球菌為陽(yáng)性。具體的測(cè)量方法也因此分為玻片法和試管法兩種。(1)血漿凝固酶試驗(yàn):血漿凝固酶是金黃色葡萄球菌所產(chǎn)生的,與其致病力有關(guān)的一種侵襲性酶,其作用是使血漿中的纖維蛋白在菌體表面沉積和凝固以阻礙吞噬細(xì)胞的吞噬。:可以選用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血平板和高鹽甘露醇平板,血平板用葡萄糖肉湯增菌培養(yǎng)基。 金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抵抗力,對(duì)磺胺類藥物敏感性低,但對(duì)青霉素、紅霉素等高度敏感。 金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在1015%NaCl肉湯中生長(zhǎng)。此外,金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。葡萄球菌形成的感染易局部化與此酶有關(guān);:金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫,可用來(lái)作為依據(jù)鑒定金黃色葡萄球菌;:金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生數(shù)種引起急性胃腸炎的蛋白質(zhì)性腸毒素,分為A、B、C、D、E及F五種血清型。X線變化在10~14日內(nèi)不明顯,骨質(zhì)疏松和骨皮質(zhì)反應(yīng)甚至更長(zhǎng)時(shí)間仍不能測(cè)出,而放射性核素骨掃描則常能較早出現(xiàn)異常。突然出現(xiàn)
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