生物技術(shù)制藥試題(編輯修改稿)
2025-05-01 23:42 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ：天然培養(yǎng)基 、 合成培養(yǎng)基 和 無(wú)血清培養(yǎng)基。鼠源性單克隆抗體改造后的小分子抗體類型 人－鼠嵌合抗體、改形抗體 、Fab抗體 、單鏈抗體、單域抗體 和分子識(shí)別單位 ?？贵w藥物的特點(diǎn) 特異性 、多樣性 和定向性 。B微生物轉(zhuǎn)化中常用微生物有 細(xì)菌 、放線菌 和霉菌 。B載體的結(jié)構(gòu)包括 抗性基因 、 啟始復(fù)制子、多克隆位點(diǎn) 和標(biāo)記基因。 B蛋白質(zhì)類藥物按分子大小分離提取方法有：超濾 、透析 、層析 和離心 。B鼠源性單克隆抗體改造后的小分子抗體類型 人－鼠嵌合抗體、改形抗體 、Fab抗體 、單鏈抗體、單域抗體 和分子識(shí)別單位 。蛋白質(zhì)類藥物分離提取方法有：沉淀法（鹽析、有機(jī)溶劑、等電點(diǎn)）；按分子大小分離（超濾、透析、層析、離心）；電荷（離子交換、層析、電泳、等電聚焦）；親和層析法（酶與底物、抗原與抗體、激素與受體）。 氨基酸類藥物的分離純化方法氨基酸的生產(chǎn)：蛋白質(zhì)水解，鹽酸水解迅速、完全，色氨酸被破壞，絲氨酸部分破壞；堿水解易產(chǎn)生消旋作用；酶水解不完全。發(fā)酵法，從發(fā)酵液中提取。和學(xué)合成與酶促合成法，化學(xué)合成產(chǎn)物混旋需拆分，酶促合成效果較好。分離方法：沉淀法（溶解度差異），吸附法（吸附能力差異），離子交換法（所帶電荷不同）。A動(dòng)物核酸類藥物主要種類和用途DNA：能改善機(jī)體虛弱疲勞、與細(xì)胞毒藥物合用可提高細(xì)胞毒藥物對(duì)癌細(xì)胞的選擇性作用，與紅霉素合用，可降低毒性、提高療效；RNA：口服可用于精神遲緩、記憶衰退、動(dòng)脈硬化性癡呆、靜注用于刺激造血和促進(jìn)白細(xì)胞生成、治療慢性肝炎、肝硬化和初期癌癥；輔酶A用于動(dòng)脈硬化、白細(xì)胞、血小板減少，肝、腎病等；ATP：用于心力衰竭、心肌炎、心肌梗死、腦動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈硬化、急性脊髓灰質(zhì)炎、肌肉萎縮、慢性肝炎等。試述微生物的生物轉(zhuǎn)化及其特點(diǎn)答案要點(diǎn)：微生物的生物轉(zhuǎn)化是指微生物對(duì)有機(jī)化合物某一特定部位（基團(tuán)）的作用，使它轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)上相類似的另一種化合物。轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物不是由營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)微生物細(xì)胞的一系列代謝過(guò)程后產(chǎn)生的，而是利用微生物細(xì)胞的酶系對(duì)底物某一特定部位進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)形成的。生物轉(zhuǎn)化的特點(diǎn)：專一性，底物及產(chǎn)物空間結(jié)構(gòu)專一；產(chǎn)量高，一個(gè)酶促反應(yīng)可代替幾個(gè)化學(xué)反應(yīng)，收率高；反應(yīng)條件溫和，常溫常壓，可改善工人勞動(dòng)條件，避免減少使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或有毒物質(zhì)；可進(jìn)行化學(xué)法難以進(jìn)行的反應(yīng)。基因工程技術(shù)生產(chǎn)藥物的優(yōu)點(diǎn)是什么？答案要點(diǎn)：大量生產(chǎn)過(guò)去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床使用提供有效的保障；可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便對(duì)其生理、生化和結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入的研究，從而擴(kuò)大這些物質(zhì)的應(yīng)用范圍；可以發(fā)現(xiàn)、挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)；內(nèi)源生理活性物質(zhì)在作為藥物使用時(shí)存在的不足之處，可通過(guò)基因工程和蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造和去除；可獲得新型化合物，擴(kuò)大藥物篩選來(lái)源。基因工程藥物生產(chǎn)的基本過(guò)程是什么？答案要點(diǎn)：基因工程技術(shù)就是將重組對(duì)象的目的基因插入載體，拼接后轉(zhuǎn)入新的宿主細(xì)胞，構(gòu)建成工程菌，實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重新組合，并使目的基因在工程菌內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)。基因工程藥物制造的主要程序是：目的基因的克??；構(gòu)建DNA重組體；將DNA重組體轉(zhuǎn)入宿主菌構(gòu)建工程菌；工程菌的發(fā)酵；外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離純化；產(chǎn)品的檢驗(yàn)等。通常將基因工程藥物的生產(chǎn)分為上游和下游技術(shù)。上游階段是研究開(kāi)發(fā)必不可少的基礎(chǔ)，它主要是分離目的基因，構(gòu)建工程菌，主要在實(shí)驗(yàn)室完成。下游階段是從工程菌的大規(guī)模培養(yǎng)到產(chǎn)品的分離純化、質(zhì)量控制，該階段是將實(shí)驗(yàn)室成果產(chǎn)業(yè)化、商品化?？寺≌婧嘶虺Ｓ玫姆椒ㄓ心膸追N？答案要點(diǎn)：克隆真核基因常用的方法有逆轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。一、逆轉(zhuǎn)錄法逆轉(zhuǎn)錄法就是先分離純化目的基因的mRNA，再反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA，然后進(jìn)行互補(bǔ)DNA的克隆表達(dá)。從產(chǎn)生該蛋白質(zhì)的真核細(xì)胞中提取mRNA，以其為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，反轉(zhuǎn)錄合成
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