生物技術制藥乙肝疫苗制備(編輯修改稿)
2025-02-12 18:44 本頁面
【文章內容簡介】 重組分子。 根據已經測定的編碼乙肝病毒表面抗原決定簇基因序列，用化學合成法直接合成目的 基因。 用識別相同黏性末端的限制性內切酶將外源 DNA和質粒分子切開。 切 篩選和鑒定經轉化處理的酵母細胞，獲得外源基因高效表達的基因工程菌 菌種制備和發(fā)酵 用成功構造的基因工程菌進行擴大培養(yǎng)，經過逐級放大至發(fā)酵罐。 發(fā)酵過程應該具有下列特點： 原料以碳水化合物為主，不含有毒物質，并加入少量有機和無機氮源；能容易進行 大量有效的乙肝病毒表面抗原的生產；生物反應過程是以生命體的自動調節(jié)方式進行的，多個反應像一個反應一樣，在單一設備中進行；生產過程中，通常常溫進行，操作溫和，不考慮防爆問題；能夠高度選擇性的進行復雜化合物在特定部分的反應，如氧化、還原、官能團導入；生產過程中考慮防止雜菌的污染。 發(fā)酵過程中，可采用分批補料或連續(xù)流加補料以保證最優(yōu)生長和維持細胞濃度、生長速度和營養(yǎng)供應之間的適當平衡。 可添加誘導劑如乳糖到發(fā)酵液中去以誘導可調節(jié)啟動子的表達。 分離純化 細胞破碎 微濾 超濾 微濾 超濾 硅膠吸附 疏水層析 硫氰酸鹽處理 凝膠層析 離子交換層析 無菌過濾 無菌過濾 氫氧化鋁共沉淀 細胞破碎 微濾 超濾 發(fā)酵結束后，通過過濾或離心，使酵母與發(fā)酵液分離，然后細胞通過高壓勻漿機破碎，釋放出抗原。酵母的細胞壁較厚，比大腸桿菌難破碎，可在高壓勻漿機內施加幾千個大氣壓
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