【文章內(nèi)容簡介】 大收縮反應(yīng)的單收縮曲線中，可以利用RM6240多道生理信號采集儀測出收縮幅度、收縮時間、舒張時間、潛伏期這一系列指標(biāo)，并可利用公式計算：收縮速率=收縮幅度/收縮時間，舒張速率=收縮幅度/舒張時間。健康且彈跳力正常的黑斑蛙，50177。5g，雌雄兼用，購于廣西玉林洞口市場，經(jīng)王曉平教授鑒定為正品。生藥千斤拔塊根，購于廣西玉林市中藥材市場，經(jīng)王曉平教授鑒定為正品。RM6240多道生理信號采集儀（成都儀器廠）、精密電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）、張力換能器、冰箱、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、眼科剪、眼科鑷、毀髓針、蛙板、固定針、玻璃分針、神經(jīng)屏蔽盒、滴管、培養(yǎng)皿、玻璃分針、鋅銅弓、污物缸、棉線、量筒、燒杯、鐵架臺等。氯化鈉（分析純）GB/T12662006購于廣東西隴化工股份有限公司，生產(chǎn)批號為：1004151。西洋參膠囊6g（*12粒/盒）Q/FSTL 0048B購于福建斯特龍生物藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號：20140401。(1) 千斤拔水提液的制備：將購回的生藥千斤拔用萬能粉碎機粉碎1次，得到千斤拔粗粉。采用水煎的方式，用10倍體積的去離子水浸泡1h，加熱煮沸1h，趁熱濾取藥液；再加8倍量水，煮沸30 min，合并兩次濾液，濃縮至1g/ml備用（用時加去離子水稀釋至所需濃度）[17]。(2)%蛙類生理鹽水： 溶解于100mL去離子水即得。(3)%西洋參膠囊溶液：（即5粒）西洋參膠囊溶解于500mL去離子水即得。按常規(guī)方法制備青蛙坐骨神經(jīng)排腸肌標(biāo)本[15]，破壞腦和脊髓：取青蛙一只，用紗布包裹青蛙的四肢和軀干，露出頭部，用自來水沖洗干凈。用左手握住青蛙，用食指壓住頭部前端使頭前俯，拇指按壓背部；右手持刺蛙針從枕骨大孔向前刺入顱腔，左右攪動搗毀腦組織，然后將刺蛙針退到枕骨大孔，不拔出而是將其尖轉(zhuǎn)向后平行插入脊柱管中搗毀脊髓，插入椎管時，青蛙后肢立即失去緊張性，多數(shù)情況出現(xiàn)尿失禁。若腦脊髓破壞完全，可見青蛙四肢松弛，呼吸消失。剝皮：自青蛙的兩側(cè)腋部以下完全剝離皮膚（注意:可事先剪去尾椎末端及泄殖腔附近皮膚，使剝離更容易）。而后倒提青蛙腿，使其頭部向下，用手術(shù)剪橫向剪開腹部肌肉，看清脊神經(jīng)后，用粗剪刀剪斷脊柱。右手捏住斷端邊緣皮膚，向下剝?nèi)ト亢笾つw，將標(biāo)本置于盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中。將手和用過的器械洗凈后再進行以下步驟（a）分離兩腿：用粗剪刀縱向剪開脊柱（尾扛骨留在一側(cè))和與后兩肢相連的肌肉，再用粗剪刀剪開趾骨聯(lián)合。將已分離的標(biāo)本浸入盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中。（b）剪斷股骨：取一條腿，先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部，然后用固定針將標(biāo)本背部認(rèn)清坐骨固定于干凈的蛙板上。用玻璃分針循股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝，縱向分離暴露坐骨神經(jīng)的大腿部分，直至分離至腘窩神經(jīng)分叉處。然后剪斷二頭肌、半膜肌和半膜肌肌腱，并繞至前方剪斷股四頭肌腱[18]。（c ）游離腓腸肌：用玻璃分針或鑷子分離腓腸肌與跟腱，并穿線結(jié)扎。在結(jié)扎遠端用粗剪刀剪斷跟腱，左手執(zhí)線提起腓腸肌，用手術(shù)剪剪去其周圍組織，但保留腓腸肌起始點與骨的聯(lián)系。完成腓腸肌標(biāo)本：用粗剪刀自膝關(guān)節(jié)周圍向上剪除并刮凈所有大腿肌肉，巨膝關(guān)節(jié)約1cm處剪斷股骨。棄去上段股骨，保留部分即為腓腸肌標(biāo)本。將標(biāo)本放入盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中待用。%蛙類生理鹽水蘸濕的鋅銅弓接觸坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生收縮，則表示標(biāo)本機能正常。輕提腓腸肌上的結(jié)扎線，%蛙類生理鹽水中浸泡穩(wěn)定1520分鐘后進行實驗。將標(biāo)本的股骨頭固定在肌槽的骨頭固定孔內(nèi)，神經(jīng)搭在肌槽電極上，腓腸肌肌腱上的扎線與張力換能器接頭相連，換能器輸出端與計算機1通道，刺激電極與坐骨神經(jīng)相連，電極接頭與計算機程控刺激器輸出端相連。調(diào)節(jié)好扎線的張力，不可過松或過緊，以使肌肉自然拉平為宜（保證肌肉一旦收縮，即可牽動張力傳感器的應(yīng)變梁）[19]。另外腓腸肌在雙層玻璃槽中設(shè)有流加浸潤裝置，以防止測定過程中標(biāo)本的挪動以及干燥，使得測定出現(xiàn)人為誤差。單收縮曲線的測定：單刺激；延時：20ms；強度：；波寬：；放大倍數(shù) ：20倍；DC：30Hz；掃描速度：閾強度的測定：起始刺激：；增量：；刺激時間間隔：30ms；刺激次數(shù)：25；延時：50ms；波寬： ，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別浸潤5min、10min、15min三個時間段，%蛙類生理鹽水（作為陰性對照組）、低濃度（）、中濃度（）、高濃度（1g/ml）的千斤拔水提液浸潤、%西洋參膠囊溶液（作為陽性對照組）。 將儀器連接完畢以后，進行骨骼肌單收縮分析，單擊菜單 “實驗項目”在肌肉神經(jīng)實驗中選定“刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系”項單擊。啟動刺激開關(guān)后，當(dāng)肌肉出現(xiàn)收縮時，記錄閾強度每一組測3次；當(dāng)顯示通道出現(xiàn)最大收縮反應(yīng)的完整單收縮曲線（共記錄25個曲線）時，測量單收縮的四個時期：潛伏期、收縮幅度、收縮期與舒張期。從25個單收縮曲線中隨機抽取5個，測量每個已抽取的單收縮曲線的潛伏期（ms），收縮幅度（g），收縮時間（ms）舒張時間（ms），并利用公式計算：收縮速率=收縮幅度/收縮時間，舒張速率=收縮幅度/舒張時間[20]；分別取3次閾強度（v）測定值的平均值。，分別檢測千斤拔水提液劑量組各收縮指標(biāo)與空白組之間的差異顯著性，各數(shù)據(jù)均采用表示。如表1所示，陰性對照組中各腓腸肌的閾強度無明顯變化，且西洋參對照組與陰性對照組的域強度變化基本一致。與陰性對照組相比，Ⅰ組浸潤腓腸肌低、中、高濃度的閾強度均降低，差異有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P，P)；Ⅱ組浸潤溶液為低濃度、中濃度和高濃度時閾強度隨藥液濃度增加先降低后升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意(P )；Ⅲ組千斤拔水提液低、中、高濃度時，閾強度先降低后升高, 差異有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P)。與西洋參對照組相比，Ⅰ組浸潤腓腸肌低、中、高濃度的閾強度均降低，低、中濃度時差異有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P)，高濃度時差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P)；Ⅱ組浸潤溶液為低濃度、中濃度時域強度降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P)；高濃度時閾強度升高，差異有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P)；Ⅲ組浸潤溶液為低、中、高濃度時域強度先降低后升高，差異有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P，P)；西洋參對照組與陰性對照組相比，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三組腓腸肌的腓腸肌的閾強度均降低，但降低幅度并不明顯，Ⅰ組差異有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P)，Ⅱ組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P)，Ⅲ組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P )。表明當(dāng)千斤拔水提液濃度較低且處理時間較短時, 坐骨神經(jīng)腓腸肌的閾強度降低(P), 即興奮性升高； 隨著千斤拔水提液濃度的升高，處理時間的延長閾強度升高(P，P ), 即興奮性降低, 甚至低于用藥前水平。據(jù)記錄以及統(tǒng)計學(xué)分析表1 千斤拔對青蛙坐骨神經(jīng)腓腸肌閾強度（/v）的影響（）Table 1 Flemingia philippinensis Merr. et Rolfe impact on frog sciatic gastroemius threshold intensity (/v) （）分組Ⅰ組Ⅱ組 Ⅲ組陰性對照組（%g/ml） 177。177。 177。低濃度（）177。**▲▲177。*▲177。**▲▲中濃度（）177。 **▲▲177。* ▲ 177。**▲▲高濃度 （1g/ml）177。 **▲177。*▲▲177。**▲▲西洋參對照組 （%g/ml） 177。 ** 177。*177。與陰性對照組相比：*P，**P ；與陽性對照組相比：▲P，▲▲P 結(jié)果見表2。腓腸肌隨著藥液浸潤時間的增加，陰性對照組腓腸肌的收縮幅度無明顯變化。與陰性對照組相比，Ⅰ組收縮幅度隨藥液濃度的增加先升高后降低，低濃度收縮幅度升高不明顯，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P）；中濃度時腓腸肌的收縮幅度升高明顯，差異有極顯著的意義（P）；高濃度時腓腸肌的收縮幅度極顯著低于用藥前水平(P)。Ⅱ組收縮幅度隨藥液濃度的增加先升高后降低，差異均