論文資料-谷氨酸發(fā)酵工藝流程1word可編輯(編輯修改稿)
2024-11-24 14:37 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 l％，氯化鈉 ％，瓊脂 2％， 。 ：葡萄糖 ％，玉米漿 ％；，尿素 ％，磷酸氫二鉀 0． 12％，硫酸鎂 ％， 。 ：葡萄糖 12％，玉米漿 ％，磷酸二氫鉀 ％，硫酸鎂％， 。 搖瓶復(fù)篩發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖 18％，玉米漿 ％，甘蔗糖蜜 ％，磷酸二氫鉀 ％，硫酸鎂 ％． 。 培養(yǎng)方法 斜面菌種： 32～ 33℃ 培養(yǎng)， 22h。 一級種子： 32—33℃ 培養(yǎng)，往復(fù)式搖床，沖程 76mm，轉(zhuǎn)速 100r／ min， 9h。 搖瓶發(fā)酵：往復(fù)式搖床，沖程 80mm。裝量： 20ml／ 500ml 三角瓶。接種量： 5％。生物工程 課程論文 6 轉(zhuǎn)速：前期 100r／ min，第一次加尿后 125rJmin。溫度：前期 32～ 33℃ ，后期 34～ 350C。轉(zhuǎn)速：前期 100r／ min，后期 125dmin。 pH： 40％尿素控制。 分析方法及分析儀器 谷氨酸： YSI 一 2700 生物傳感器。 谷氨酸菌種的分離 挑一環(huán)生產(chǎn)斜面到裝有生理鹽水，、小玻璃珠三角瓶中，振蕩搖勻，稀釋， 10。 5～ 10。6 涂平板 _挑選 30 個單菌落移接到生產(chǎn)斜面上 (每個菌落接 2 支斜面 )培養(yǎng) 48h_其中 30 支斜面存人超低溫冰箱保存，另外相同順序編號的 30 支斜面則進行搖瓶產(chǎn)酸試驗。 初篩 每株兩瓶分三批進行初篩。發(fā)酵周期 24h。放瓶后，測定谷氨酸含量。從中選出產(chǎn)酸較高的 6 株。 復(fù)篩 經(jīng)初篩選出 6 株，繼續(xù)進行搖瓶復(fù)篩試驗。發(fā)酵周期 46h，以生產(chǎn)菌作為對照，共進行了 3 次對比實驗。并選出產(chǎn)酸最高的兩株。 現(xiàn)在微生物廣泛應(yīng)用于工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、醫(yī)藥衛(wèi)生及國防事業(yè)，但微生物 的世代時期一般是很短的，在傳代過程中易發(fā)生變異甚至死亡，因此常常造成工業(yè)生產(chǎn)菌種的退化，并有可能使優(yōu)良菌種丟失。所以。 。 菌種是從事微生物學以及生命科學研究的基本材料，特別是利用微生物進行生產(chǎn)。所以菌種保藏是入行微生物研究和微生物育種工作的重要組成部分。其任務(wù)首先是使菌種不死亡。 同時還要盡可能設(shè)法把菌種的優(yōu)良性狀保持下來而不致向壞的方面轉(zhuǎn)化。研究菌種保藏就是要采用最合適的保存方法 ，使菌種的變異和死亡減少到最低限度。 菌種保藏主要是根據(jù)菌種的生理生化特點。 。 使孢子或菌體的生長代謝活動盡量降低，以減少其變異。一般可通過保持培養(yǎng)基營養(yǎng)成分在最低水平、缺氧狀態(tài)、干燥和低溫，使菌種處于 “休眠 ”狀態(tài)，抑制其繁殖能力。 菌種的保藏方法很多一般有一面幾種： 生物工程 課程論文 7 斜面保藏是一種短期、過度的保藏方法。 用新鮮斜面接種后在最適條件下培養(yǎng)得到菌體或孢子 生長豐滿后，放在 4度冰箱保存。一般存期為三到六個月。 適合于產(chǎn)孢子或芽孢的微生物。先將沙與土洗凈烘干過篩后。 將沙與土按（ 1~2）： 1混合均勻。 分裝于小試管中，裝料高度大約為 1cm左右。 121度間歇滅菌 3次，滅菌實驗合格后烘干備用。一般沙用 80目過篩，土用 80~100目過篩。其次，將斜面孢子制成孢子懸浮液接入沙土中或?qū)⑿泵姹庸蜗轮苯优c沙土混合置干燥器中用真空泵抽干 ,放在冰箱內(nèi)保存 .一般保存期為 1年左右 . 法 對于不產(chǎn)孢子或芽孢的微生物，一般不用沙土管保藏。為了方便，可以采用甘油菌絲速凍法。由于該法的保藏溫度為 20℃ ，為了避免微生物受損傷致死。 需要甘油作為保護劑。先配置濃度為 50%的甘油溶液。 121℃ 滅菌；再制備濃度為 108 ~ 810 個 /mL的菌懸液；最后將菌懸液和甘油溶液以等體積混合均勻后，置于 20℃ 保藏。 向培養(yǎng)成熟的菌種斜面上倒?jié)B入滲出一層滅過菌的石蠟油，用量要高出斜面 1cm，然后保存在冰箱中。此法可適用于不能利用石蠟油作碳 源的細菌、霉菌、酵母等微生物的保存。保存期約一年左右。 真空冷凍干燥保藏法是目前常用的較理想的一種方法。其基本原理是在較低的溫度下（ 18℃ ），快速的將細胞凍結(jié)，并且保持細胞完整。 然后在真空中使水分生華。在這樣的環(huán)境中，微生物的生長和代謝暫時停止，不易發(fā)生變異。因此，菌種可以保藏很長時間，一般五年左右。這種保藏方法雖然需要一定的設(shè)備，要求亦比較嚴格。 但由于該方法保藏效果好，對各種微生物都適用，所以國內(nèi)外都普遍適用。 此法是適用范圍最廣的微生物保藏法。尤其是不產(chǎn)孢子的菌絲體用其他保存方法不當可用此法保存效果較好保存期最長。用液氮能長期保存菌種，這是因為液氮的溫度可達 196℃ ，遠遙低于其新陳代謝溫度（ 130℃ ），所以此時菌種的代謝活動已停止，化學作用亦隨之消失。液氮超低溫保藏法簡便易行，關(guān)鍵是要有液氮灌、冰箱設(shè)備。該法要點是：將要保藏的生物工程 課程論文 8 菌種置于 10%甘油中，密封與安剖內(nèi)，先將菌液降至 0℃ ，再以每分鐘降低 1℃ 的速度，一直將至 35℃ ，然后將安剖放入液氮罐中保存。 法 適用于一些難于用常規(guī)方法保藏的動植物病原體和病毒。 化學法 化學藥品滅菌法
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