論文資料-谷氨酸發(fā)酵工藝流程1word可編輯(編輯修改稿)
2024-11-24 14:37 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 l％，氯化鈉 ％，瓊脂 2％， 。 ：葡萄糖 ％，玉米漿 ％；，尿素 ％，磷酸氫二鉀 0． 12％，硫酸鎂 ％， 。 ：葡萄糖 12％，玉米漿 ％，磷酸二氫鉀 ％，硫酸鎂％， 。 搖瓶復(fù)篩發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖 18％，玉米漿 ％，甘蔗糖蜜 ％，磷酸二氫鉀 ％，硫酸鎂 ％． 。 培養(yǎng)方法 斜面菌種： 32～ 33℃ 培養(yǎng)， 22h。 一級種子： 32—33℃ 培養(yǎng)，往復(fù)式搖床，沖程 76mm，轉(zhuǎn)速 100r／ min， 9h。 搖瓶發(fā)酵：往復(fù)式搖床，沖程 80mm。裝量： 20ml／ 500ml 三角瓶。接種量： 5％。生物工程 課程論文 6 轉(zhuǎn)速：前期 100r／ min，第一次加尿后 125rJmin。溫度：前期 32～ 33℃ ，后期 34～ 350C。轉(zhuǎn)速：前期 100r／ min，后期 125dmin。 pH： 40％尿素控制。 分析方法及分析儀器 谷氨酸： YSI 一 2700 生物傳感器。 谷氨酸菌種的分離 挑一環(huán)生產(chǎn)斜面到裝有生理鹽水，、小玻璃珠三角瓶中，振蕩搖勻，稀釋， 10。 5～ 10。6 涂平板 _挑選 30 個單菌落移接到生產(chǎn)斜面上 (每個菌落接 2 支斜面 )培養(yǎng) 48h_其中 30 支斜面存人超低溫冰箱保存，另外相同順序編號的 30 支斜面則進(jìn)行搖瓶產(chǎn)酸試驗(yàn)。 初篩 每株兩瓶分三批進(jìn)行初篩。發(fā)酵周期 24h。放瓶后，測定谷氨酸含量。從中選出產(chǎn)酸較高的 6 株。 復(fù)篩 經(jīng)初篩選出 6 株，繼續(xù)進(jìn)行搖瓶復(fù)篩試驗(yàn)。發(fā)酵周期 46h，以生產(chǎn)菌作為對照，共進(jìn)行了 3 次對比實(shí)驗(yàn)。并選出產(chǎn)酸最高的兩株。 現(xiàn)在微生物廣泛應(yīng)用于工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、醫(yī)藥衛(wèi)生及國防事業(yè)，但微生物 的世代時期一般是很短的，在傳代過程中易發(fā)生變異甚至死亡，因此常常造成工業(yè)生產(chǎn)菌種的退化，并有可能使優(yōu)良菌種丟失。所以。 。 菌種是從事微生物學(xué)以及生命科學(xué)研究的基本材料，特別是利用微生物進(jìn)行生產(chǎn)。所以菌種保藏是入行微生物研究和微生物育種工作的重要組成部分。其任務(wù)首先是使菌種不死亡。 同時還要盡可能設(shè)法把菌種的優(yōu)良性狀保持下來而不致向壞的方面轉(zhuǎn)化。研究菌種保藏就是要采用最合適的保存方法 ，使菌種的變異和死亡減少到最低限度。 菌種保藏主要是根據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn)。 。 使孢子或菌體的生長代謝活動盡量降低，以減少其變異。一般可通過保持培養(yǎng)基營養(yǎng)成分在最低水平、缺氧狀態(tài)、干燥和低溫，使菌種處于 “休眠 ”狀態(tài)，抑制其繁殖能力。 菌種的保藏方法很多一般有一面幾種： 生物工程 課程論文 7 斜面保藏是一種短期、過度的保藏方法。 用新鮮斜面接種后在最適條件下培養(yǎng)得到菌體或孢子 生長豐滿后，放在 4度冰箱保存。一般存期為三到六個月。 適合于產(chǎn)孢子或芽孢的微生物。先將沙與土洗凈烘干過篩后。 將沙與土按（ 1~2）： 1混合均勻。 分裝于小試管中，裝料高度大約為 1cm左右。 121度間歇滅菌 3次，滅菌實(shí)驗(yàn)合格后烘干備用。一般沙用 80目過篩，土用 80~100目過篩。其次，將斜面孢子制成孢子懸浮液接入沙土中或?qū)⑿泵姹庸蜗轮苯优c沙土混合置干燥器中用真空泵抽干 ,放在冰箱內(nèi)保存 .一般保存期為 1年左右 . 法 對于不產(chǎn)孢子或芽孢的微生物，一般不用沙土管保藏。為了方便，可以采用甘油菌絲速凍法。由于該法的保藏溫度為 20℃ ，為了避免微生物受損傷致死。 需要甘油作為保護(hù)劑。先配置濃度為 50%的甘油溶液。 121℃ 滅菌；再制備濃度為 108 ~ 810 個 /mL的菌懸液；最后將菌懸液和甘油溶液以等體積混合均勻后，置于 20℃ 保藏。 向培養(yǎng)成熟的菌種斜面上倒?jié)B入滲出一層滅過菌的石蠟油，用量要高出斜面 1cm，然后保存在冰箱中。此法可適用于不能利用石蠟油作碳 源的細(xì)菌、霉菌、酵母等微生物的保存。保存期約一年左右。 真空冷凍干燥保藏法是目前常用的較理想的一種方法。其基本原理是在較低的溫度下（ 18℃ ），快速的將細(xì)胞凍結(jié)，并且保持細(xì)胞完整。 然后在真空中使水分生華。在這樣的環(huán)境中，微生物的生長和代謝暫時停止，不易發(fā)生變異。因此，菌種可以保藏很長時間，一般五年左右。這種保藏方法雖然需要一定的設(shè)備，要求亦比較嚴(yán)格。 但由于該方法保藏效果好，對各種微生物都適用，所以國內(nèi)外都普遍適用。 此法是適用范圍最廣的微生物保藏法。尤其是不產(chǎn)孢子的菌絲體用其他保存方法不當(dāng)可用此法保存效果較好保存期最長。用液氮能長期保存菌種，這是因?yàn)橐旱臏囟瓤蛇_(dá) 196℃ ，遠(yuǎn)遙低于其新陳代謝溫度（ 130℃ ），所以此時菌種的代謝活動已停止，化學(xué)作用亦隨之消失。液氮超低溫保藏法簡便易行，關(guān)鍵是要有液氮灌、冰箱設(shè)備。該法要點(diǎn)是：將要保藏的生物工程 課程論文 8 菌種置于 10%甘油中，密封與安剖內(nèi)，先將菌液降至 0℃ ，再以每分鐘降低 1℃ 的速度，一直將至 35℃ ，然后將安剖放入液氮罐中保存。 法 適用于一些難于用常規(guī)方法保藏的動植物病原體和病毒。 化學(xué)法 化學(xué)藥品滅菌法
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