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正文內(nèi)容

生物化學(xué)實驗報告論(編輯修改稿)

2025-02-14 23:36 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 G250蛋白質(zhì)復(fù)合物呈色后,在595nm下,吸光度與蛋白質(zhì)含量呈線性關(guān)系,故可用于蛋白質(zhì)濃度的測定。 、實驗儀器及用品 實驗試劑:(1)水;(2)標(biāo)準(zhǔn)蛋白液:牛血清蛋白()。(3)染液:考馬斯亮藍(lán)G250(%), 溶于50ml95%乙醇,再加入100ml濃磷酸,加蒸餾水定容到1000ml。(4)樣品液:取牛血清白蛋白()溶液,%NaCL稀釋至一定濃度。 、實驗內(nèi)容及步驟 、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 、取7支干凈試管,按下表進(jìn)行編號并加入試劑試劑1234567標(biāo)準(zhǔn)蛋白液(ml)0S水(ml)考馬斯亮藍(lán)染液(ml)蛋白質(zhì)濃度(ml)01020406080未知A5950.075 、數(shù)據(jù)記錄及處理 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,在坐標(biāo)紙上繪制出濃度吸光度曲線,測出未知液的吸光度后,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出未知液的濃度。 五、蛋白質(zhì)亞基分子量測定SDSPAGE凝膠電泳 掌握SDSPAGE凝膠電泳測定蛋白質(zhì)亞基分子量的基本原理和操作方法 5. 原理 SDS是一種陰離子去污劑,作為變性劑和助溶性試劑,能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵,使分子去折疊,破壞蛋白質(zhì)分子的二級,三級結(jié)構(gòu);而強還原劑,如二硫蘇糖
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