電泳技術(shù)和常用電泳儀【精選(編輯修改稿)
2025-02-14 20:43 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 構(gòu)和分離模式 （五）毛細管等速電泳 毛細管內(nèi)首先導(dǎo)入具有比被分離各組分高電泳淌度的前導(dǎo)電解質(zhì)，然后進樣，隨后再導(dǎo)入比各分離組份低電泳淌度的尾隨電解質(zhì)，在強電場的作用下，各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中發(fā)生分離。 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （六）毛細管電色譜 它包含了電泳和色譜兩種機制，是在毛細管中填充 或在毛細管壁 上鍵合（或涂壁）固 定相，從而構(gòu)成毛細 管色譜柱，依靠電滲 流推動流動相，攜帶 樣品遷移，根據(jù)樣品 分子的質(zhì)荷比、分子 尺寸及分配系數(shù)的差 別而分離。 0613 CEC加壓毛細管電色譜儀 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 五、毛細管電泳儀的基本結(jié)構(gòu) 毛細管電泳儀的結(jié)構(gòu)并不復(fù)雜，主要有高壓源、毛細管柱、檢測器，以及兩 個供毛細管兩端插入而又可 和電源相連的緩沖液槽。 （一）毛細管柱 （二）檢測器 （三）毛細管電泳 法的進樣技術(shù) 0614毛細管電泳儀 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 六、常用各種電泳儀簡介 （一）穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀 穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀是中壓電泳儀。其輸出電壓的調(diào)節(jié)范圍為 0V～ 600V、輸出電流為 0mA～ 100mA。該機工作穩(wěn)定性好、調(diào)節(jié)范圍寬，并設(shè)有完善的短路保護電路和過流保護電路，是目前國內(nèi)中、低壓電泳實驗中應(yīng)用最廣泛的電泳儀之一。 0615 穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （二）全自動醋纖膜電泳儀 全自動醋纖膜電泳儀為全自動電泳儀，有可見光單系統(tǒng)，使用醋酸纖維薄膜電泳片，優(yōu)點為自動化程度高。只需將樣品、試劑、電泳片放好，人員可離機完成實驗并得到結(jié)果。 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （三）全自動熒光 /可見光雙系統(tǒng)電泳儀 全自動熒光 /可見光雙系統(tǒng)電泳儀為全自動電泳儀，具有熒光 /可見光雙系統(tǒng)，在使用熒光試劑項目如 CK、 LD同工酶時為全自動。只需將樣品、試劑、瓊脂糖凝膠電泳膠片放好后，操作人員可離機完成實驗并得到結(jié)果。 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （四）全自動瓊脂糖電泳儀 全自動電泳儀，有可見光單系統(tǒng)，使用瓊脂糖凝膠電泳膠片，優(yōu)點為靈敏度高，可適用于低濃度蛋白檢驗 。該儀器自動化程度較差，當電泳結(jié)束和染色脫色完成后，工作人員必須將電泳片由機器中取出。 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （五）雙向電泳及雙向電泳 液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用 雙向電泳是將樣品進行電泳后，在它的直角方向再進行一次電泳。雙向電泳第一向為等電聚焦，第二向為梯度 SDS電泳。樣品經(jīng)過電荷與質(zhì)量兩次分離后可得到分子的等電點、分子量等信息。這是目前所有電泳技術(shù)中分辨率最高，信息量最多的技術(shù)，已成為分析復(fù)雜蛋白混合物的基本工具。 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （六）高效毛細管電泳及高效毛細管電泳 質(zhì)譜聯(lián)用 高效毛細管電泳是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為推動力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。高效毛細管電泳是一種迅速發(fā)展的分離技術(shù)，儀器簡單、操作簡便、分析速度快、分離效率高、操作模式多、開發(fā)分析方法容易、實驗成本低、消耗少、應(yīng)用范圍極廣。 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （七）毛細管電泳芯片 利用毛細管電泳芯片可以進行 DNA長度分析、序列分析和基因分型等研究。是利用芯片分離熒光標記的寡核苷酸，整個分離過程在 45s之內(nèi)，而芯片的長度僅為 。因為其可承載高電壓（ 2300V/cm）并具有較小的樣品體積，故有利于得到較好的分離效果。 第四節(jié) 毛細管電泳的基本結(jié)構(gòu)和分離模式 （八） DNA測序系統(tǒng) 該系統(tǒng)利用凝膠毛細管的原理，將多道毛細管陣列設(shè)計，用四種不同的熒光染色標記 4種核苷酸，在模板上合成 DNA單鏈，然后在 DNA外切酶的作用下進行堿基的連續(xù)水解和釋放，用激光識別和記錄釋放的堿基。 0616 DNA測序系統(tǒng) 第五節(jié) 電泳儀的臨床應(yīng)用 一、 血清蛋白電泳 新鮮血清經(jīng)醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳、染色后，通?？梢?5條帶，即清蛋白、 ? ? ?和 ?球蛋白。許多疾病總血清蛋白濃度和各蛋白組分的比例有所改變，通過血清蛋白電泳圖譜能幫助我們對某些疾病進行診斷及鑒別診斷。 0617 血清蛋白電泳圖譜 第五節(jié) 電泳儀的臨床應(yīng)用 二、尿蛋白電泳 臨床進行尿蛋白電泳的主要目的是：①確定尿蛋白的來源；②了解腎臟病變的嚴重程度（選擇性蛋白尿與非選擇性蛋白尿），從而有助于診斷和預(yù)后的判斷。 當不能進行腎活檢時 ，尿蛋白電泳結(jié)果能 很好地協(xié)助臨床判斷 腎臟的主要損害。 0618 尿蛋白電泳圖譜 第五節(jié) 電泳儀的臨床應(yīng)用 三、 血紅蛋白及糖化血紅蛋白電泳 應(yīng)用電泳法鑒別患者血液中 Hb的類型及含量，對于貧血類型的臨床診斷及治療具有重大意義。 Hb電泳結(jié)果應(yīng)根據(jù)不同年齡人群進行分析。 0619 血紅蛋白電泳圖譜 第五節(jié) 電泳儀的臨床應(yīng)用 ? 四、免疫固定電泳 ? 可對各類 Ig及其輕鏈進行分型，最常用于臨床常規(guī) M蛋白的分型與鑒定。一般用于單克隆 Ig增殖病、單克隆 Ig病、本周氏蛋白和游離輕鏈病、多組分單克隆 Ig病、重鏈病、 ? CSF寡克隆蛋白鑒 ? 別、多克隆 Ig病的 ? 診斷和鑒別診斷。 0620 免疫固定電泳圖譜 第五節(jié) 電泳儀的臨床應(yīng)用 五、 同工酶電泳 同工酶電泳用于臨床上常見的同工酶或同工酶亞型分析。 1．乳酸脫氫酶 (LD/LDH)同工酶： 2．肌酸激酶（ CK）同工酶： 3． CK同工酶亞型：
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