課時(shí)克隆技術(shù)ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-14 18:12 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 免動物細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。 4．應(yīng)用 (1)生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品：干擾素、疫苗、單克隆抗體。 (2)檢測并判斷某毒性物質(zhì)毒性的大小。 (3)臨床醫(yī)學(xué)研究。 拓展提升 植物組織培養(yǎng)與動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 4．如圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖， 請據(jù)圖回答。 (1)容器 A中放置的是動物器官或組織。它一 般取自 ______________________________。 (2)容器 A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的 處理是 ________，然后用 __________________酶 處理，這是為了使細(xì)胞分散開來。這樣做的目的 是 ______________________。 (3)培養(yǎng)首先在 B瓶中進(jìn)行。瓶中的培養(yǎng)基成 分有 _________________________________________等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后，有許多細(xì)胞衰老死亡，這時(shí)培養(yǎng)到第___代，到這時(shí)的培養(yǎng)稱為 _________。 對位訓(xùn)練 動物胚胎或幼齡動物的器官、組織 剪碎組織 胰蛋白 (或膠原蛋白 ) 使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸 葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清 10 原代培養(yǎng) (4)為了把 B瓶中的細(xì)胞分裝到 C瓶中，用 __________處理，然后配制成 _________，再分裝。 (5)在 C瓶中正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡，原因是 ________________。 胰蛋白酶 細(xì)胞懸液 細(xì)胞沒有發(fā)生癌變 排雷 (1)培養(yǎng)的過程分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個(gè)大階段。當(dāng)培養(yǎng)到第 10代左右，出現(xiàn)許多細(xì)胞衰老死亡現(xiàn)象，這時(shí)為原代培養(yǎng)；到第 10代左右需要用胰蛋白酶處理，使細(xì)胞分散，從玻璃瓶壁上脫離下來，配制成細(xì)胞懸液繼續(xù)培養(yǎng)，此時(shí)的培養(yǎng)屬于傳代培養(yǎng)。 (2)在傳代培養(yǎng)到 50代左右時(shí)，大部分細(xì)胞死亡，有些細(xì)胞可能發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變，還能繼續(xù)增殖。如果無此現(xiàn)象，則說明細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒有改變，無癌變特點(diǎn)，并不是到 50代時(shí)必須發(fā)生癌變。 考點(diǎn) 120 關(guān)注生物新技術(shù) —— 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體 1．動物細(xì)胞融合 (1)概念：兩個(gè)或多個(gè)動物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。 (2)原理：生物膜的流動性。 (3)方法：聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。 (4)意義：①突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能；②成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段；③制備單克隆抗體。 2．單克隆抗體 (1)取相應(yīng) B細(xì)胞前必須先注射相應(yīng)抗原，形象地說先“打針”，否則失敗。 (2)誘導(dǎo)融合的兩種細(xì)胞名稱及作用。 免疫過的 B淋巴細(xì)胞 (漿細(xì)胞 )—— 產(chǎn)生抗體；骨髓瘤細(xì)胞 —— 無限增殖。 (3)誘導(dǎo)融合與原生質(zhì)體融合的不同方法。 動物細(xì)胞誘導(dǎo)融合的特有方法 —— 滅活的病毒誘導(dǎo)。 (4)兩次篩選的目的及方法 ①在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞 (漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 )和融合的具有同種核的細(xì)胞 (BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞 )都會死亡，只有融合的雜種細(xì)胞 (雜交瘤細(xì)胞 )才能生長。這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一的特異性抗體。 ②經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞 (很多種雜交瘤細(xì)胞 )，需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。 (5)兩種培養(yǎng)提取場所 ①體外培養(yǎng) —— 培養(yǎng)液提取。 ②體內(nèi)小鼠腹腔中培養(yǎng) —— 小鼠腹水中提取。 拓展提升 植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體的制備的比較 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合（單克隆抗體的制備） 理論 基礎(chǔ) 細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖 融合前處理 酶解法去除細(xì)胞壁 (纖維素酶、果膠酶 ) 注射特定抗原，免疫處理正常小鼠 促融 方法 (1)物理法：離心、振動、電刺激等 (2)化學(xué)法：聚乙二醇(PEG) (1)物、化法：與植物細(xì)胞融合相同；(2)生物法：滅活的病毒 過程 第一步 原生質(zhì)體的制備 (酶解法 ) 正常小鼠免疫處理 第二步 原生質(zhì)體的融合 (物、化法 ) 動物細(xì)胞的融合 (物、化、生法 ) 第三步 雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng) 雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng) 第四步 雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定 單克隆抗體的提純 對位訓(xùn)練 5． 1975年科學(xué)家首次利用 B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請據(jù)圖回答問題： (1)病原體注入小鼠體內(nèi)后，要經(jīng)過 ____細(xì)胞處理后，才能被免疫細(xì)胞識別。 (2)制備單克隆抗體所用的 B淋巴細(xì)胞一般從脾中采集，然后以 ________________________作誘導(dǎo)劑，使 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。通過篩選和克隆培養(yǎng)，獲得的雜交瘤細(xì)胞具有 ____ ____________________________ 吞噬 滅活的仙臺病毒或聚乙二醇 產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖 既能 的特點(diǎn)。 (3)單克隆抗體的特點(diǎn)是 ________________。根據(jù)上圖寫出應(yīng)用雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體的兩種主要方法 _________ __________________。 解析 滅活的仙臺病毒和聚乙二醇均可誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合。雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具有兩個(gè)親代細(xì)胞的遺傳特性?？梢栽隗w外也可以在體內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞獲得單克隆抗體。 排雷 (1)制備單克隆抗體時(shí)選用一種抗原處理的 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，它會兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性 —— 在體外培養(yǎng)條件下能不
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