【正文】 和動物體內(nèi)培養(yǎng)法 體外培養(yǎng)法 (3)相比較植物體細胞雜交，動物細胞融合特有的誘導方式為滅活的病毒處理，其他物理、化學誘導融合的手段與植物體細胞雜交過程中原生質(zhì)體融合方法相同。 排雷 (1)制備單克隆抗體時選用一種抗原處理的 B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細胞，它會兼有兩個親本細胞的特性 —— 在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時能產(chǎn)生出某種特異性抗體。雜交瘤細胞同時具有兩個親代細胞的遺傳特性。根據(jù)上圖寫出應用雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體的兩種主要方法 _________ __________________。通過篩選和克隆培養(yǎng)，獲得的雜交瘤細胞具有 ____ ____________________________ 吞噬 滅活的仙臺病毒或聚乙二醇 產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖 既能 的特點。請據(jù)圖回答問題： (1)病原體注入小鼠體內(nèi)后，要經(jīng)過 ____細胞處理后，才能被免疫細胞識別。 ②體內(nèi)小鼠腹腔中培養(yǎng) —— 小鼠腹水中提取。 ②經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞 (很多種雜交瘤細胞 )，需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。 (4)兩次篩選的目的及方法 ①在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞 (漿細胞和骨髓瘤細胞 )和融合的具有同種核的細胞 (BB融合細胞、瘤瘤融合細胞 )都會死亡，只有融合的雜種細胞 (雜交瘤細胞 )才能生長。 (3)誘導融合與原生質(zhì)體融合的不同方法。 (2)誘導融合的兩種細胞名稱及作用。 (4)意義：①突破有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能；②成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段；③制備單克隆抗體。 (2)原理：生物膜的流動性。如果無此現(xiàn)象，則說明細胞遺傳物質(zhì)沒有改變，無癌變特點，并不是到 50代時必須發(fā)生癌變。當培養(yǎng)到第 10代左右，出現(xiàn)許多細胞衰老死亡現(xiàn)象，這時為原代培養(yǎng)；到第 10代左右需要用胰蛋白酶處理，使細胞分散，從玻璃瓶壁上脫離下來，配制成細胞懸液繼續(xù)培養(yǎng)，此時的培養(yǎng)屬于傳代培養(yǎng)。 (5)在 C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細胞全部死亡，原因是 ________________。在此瓶中培養(yǎng)一段時間后，有許多細胞衰老死亡，這時培養(yǎng)到第___代，到這時的培養(yǎng)稱為 _________。 (3)培養(yǎng)首先在 B瓶中進行。 (2)容器 A中的動物器官或組織首先要進行的 處理是 ________，然后用 __________________酶 處理，這是為了使細胞分散開來。 (1)容器 A中放置的是動物器官或組織。 (3)臨床醫(yī)學研究。 4．應用 (1)生產(chǎn)細胞產(chǎn)品：干擾素、疫苗、單克隆抗體。 (4)在動物細胞培養(yǎng)過程中，一般情況下 10代以前的細胞核型不變， 10代以后有些細胞核型發(fā)生改變， 50代以后的細胞可能發(fā)生癌變。 (2)原理：細胞增殖。 ④氣體環(huán)境 —— 95%空氣＋ 5%CO2。 ③ 溫度和 pH—— (177。 2．操作流程 3．考點解讀 (1)培養(yǎng)條件 ①無菌、無毒的環(huán)境 —— 無菌處理、加抗生素殺菌、定期更換培養(yǎng)液。 (3)該技術(shù)在育種上應用時最大的優(yōu)點：克服遠緣雜交不親和的障礙。雜種植株特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。 (4)柴油是植物細胞的代謝產(chǎn)物，將柴油樹細胞培養(yǎng)進行到愈傷組織即可。過程④的結(jié)果是形成了愈傷組織，所以④為脫分化。 (2)過程②是把 a、 b兩個原生質(zhì)體融合在一起，所以稱為原生質(zhì)體融合。若利用此技術(shù)，將柴油樹細胞培養(yǎng)進行到 __過程 (填字母編號 )即可。 (4)隨“神六”太空旅行的種苗中，最受關(guān)注的是柴油樹試管苗。 (2)在利用雜種細胞培育雜種植株的過程中，運用的技術(shù)手段是 ____________，依據(jù)的原理是 __________，其中過程②稱為 ____________，與過程③密切相關(guān)的具有單層膜結(jié)構(gòu)的細胞器為 ________，過程④相當于 _______，⑤過程涉及的分裂方式為 ________。 (5)植物體細胞雜交的原理：原生質(zhì)體融合的過程利用了細胞膜的流動性，雜種細胞發(fā)育成雜種植株利用了細胞的全能性。 (3)雜種細胞 AB形成的標志：新的細胞壁的生成。人工誘導方法包括物理法，如離心、振動、電激；化學法，如聚乙二醇 (PEG)誘導等。根據(jù)酶的專一性原理，用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁。 考點 118 技術(shù)原理 —— 植物體細胞雜交 1．概念：植物體細胞雜交就是將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術(shù)。 (3)大規(guī)模栽培組織培養(yǎng)苗，獲取藥用成分。 排雷 明黨參是我國珍稀藥用植物，對其進行保護性開發(fā)利用可采用以下四種方法： (1)設(shè)計細胞培養(yǎng)反應器，實現(xiàn)藥用成分的工廠化生產(chǎn)。較高濃度的 2,4D能夠抑制細胞的生長；培養(yǎng)基中 加入蔗糖，是為了提供能源和維持細胞的滲透壓，加大蔗糖的濃度，幼苗得到較多的能源物質(zhì)，能源充足，單株幼苗的鮮重會增加，光合作用會下降，隨著蔗糖濃度的增加，會抑制幼苗對水分的吸收及代謝，則幼苗的鮮重會下降，如果培養(yǎng)基中不含蔗糖，光合作用又很弱，則不能滿足幼苗的生長需要。 降低 解析 題目考查知識點較為基礎(chǔ)，植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖 (克隆 )，其主要依據(jù)是植物細胞的全能性，即每一個細胞含有本物種全部的遺傳信息，植物組織培養(yǎng)所培養(yǎng)出的種苗與親本的遺傳特性相同，保持了親本的遺傳特性；植物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)基應是殺菌消毒的，還應在無菌環(huán)境中培養(yǎng)，以防止微生物的污染；由于愈傷組織可以持續(xù)培養(yǎng)，不斷分化，因此能夠快速大量地得到種苗。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機物的量____(能、不能 )滿足自身