自然科學]in-fusion克隆技術介紹(編輯修改稿)
2025-02-14 20:04 本頁面
【文章內容簡介】 只要載體末端和插入片段末端具有 15個同源堿基， InFusion就可以將 任意 PCR片段插入任意線性化載體中。?必須進行限制性內切酶酶切和連接?需要獨一無二、兼容的酶切位點?極少的合適酶切位點InFusion不受限制性酶切位點的限制 ，因此在目的片段及使用的載體中是否存在合適的酶切位點并不妨礙克隆。?亞克隆繁瑣?多片段不能同時克隆InFusion能夠在 一次反應中同時克隆多個片段，無需進行亞克隆。?對于大片段克隆效率較低?對于插入片段有限制InFusion系統(tǒng)能夠 高效克隆 kb DNA片段。?非定向克隆需要篩選目的片段插入方向 正確的克隆InFusion是 基因定向克隆技術 ，因此無需進行目的基因片段正確插入的克隆的篩選。?會附加多余堿基序列 InFusion是 無縫克隆：不附加任何多余堿基序列。?不適合中型和大規(guī)?？寺」こ?InFusion技術已經 成功用于多項高通量克隆工程。?InFusion174?？寺〖夹g的應用June 24, 202216 應用多片段克隆 構建載體模型插入突變位點 高通量克隆?June 24, 202217 應用實例實例：多個 DNA片段（ 1 kb, 2 kb, 3 kb)同時克隆【 方法 】 使用 TaKaRa高品質 PCR酶分別擴增 1 kb、 2 kb、 3 kb的目的 DNA片段 和 kb的載體，并將擴增產物混合，使用 InFusion174。 HD試劑盒完成 克隆。利用高效率的感受態(tài)細胞 StellarTM Competent Cells（產品編 號： 636763）轉化并進行藍 /白斑篩選。?引物設計及目的基因片段擴增Jun
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