【文章內(nèi)容簡介】
點 RNA聚合酶是一種 蛋白質(zhì) ,能 識別并與調(diào)控序列 中的 結合位點結合 ,能 催化 DNA轉(zhuǎn)錄為 RNA 啟動子 終止子 啟動子: 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷,它是 RNA聚合酶識別和結合的部位,有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得蛋白質(zhì) 終止子: 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷,能終止DNA的轉(zhuǎn)錄 起始密碼子?終止密碼子? 細胞的基因結構 與 RNA聚合酶結合位點 RNA聚合酶 A G G T C A C G T C G T C C A G T G C A G C A G G U C A C G U C G 啟動子 終止子 成熟 mRNA 反轉(zhuǎn)錄 反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因 cDNA cDNA不含非編碼區(qū)的啟動子、終止子 不含編碼區(qū)的內(nèi)含子 基因表達載體的組成: 目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。 基因表達載體的構建 a、目的基因 b、啟動子 c、終止子 d、標記基因 e、 復制原點 基因的運載體、目的基因、啟動子、終止子和 標記基因 等都是 DNA片斷,如何將它們連接起來? 質(zhì)粒 目的基因 限制酶 DNA連接酶 重組 DNA 質(zhì)粒 DNA分子 一個 切口 兩個 黏性末端 兩個 切口 獲得目的基因 DNA 連接酶 重組 DNA分子(重組質(zhì)粒) 同一種 限制酶 目的基因與運載體的結合過程,實際上是不同來源的基因重組的過程。 基因表達載體的構建 質(zhì)粒中插入啟動子、終止子和標記基因 等 DNA片斷,也是同樣的重組方法