【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】
點(diǎn) RNA聚合酶是一種 蛋白質(zhì) ,能 識(shí)別并與調(diào)控序列 中的 結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合 ,能 催化 DNA轉(zhuǎn)錄為 RNA 啟動(dòng)子 終止子 啟動(dòng)子: 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷,它是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得蛋白質(zhì) 終止子: 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷,能終止DNA的轉(zhuǎn)錄 起始密碼子?終止密碼子? 細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu) 與 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn) RNA聚合酶 A G G T C A C G T C G T C C A G T G C A G C A G G U C A C G U C G 啟動(dòng)子 終止子 成熟 mRNA 反轉(zhuǎn)錄 反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因 cDNA cDNA不含非編碼區(qū)的啟動(dòng)子、終止子 不含編碼區(qū)的內(nèi)含子 基因表達(dá)載體的組成: 目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 a、目的基因 b、啟動(dòng)子 c、終止子 d、標(biāo)記基因 e、 復(fù)制原點(diǎn) 基因的運(yùn)載體、目的基因、啟動(dòng)子、終止子和 標(biāo)記基因 等都是 DNA片斷,如何將它們連接起來(lái)? 質(zhì)粒 目的基因 限制酶 DNA連接酶 重組 DNA 質(zhì)粒 DNA分子 一個(gè) 切口 兩個(gè) 黏性末端 兩個(gè) 切口 獲得目的基因 DNA 連接酶 重組 DNA分子(重組質(zhì)粒) 同一種 限制酶 目的基因與運(yùn)載體的結(jié)合過(guò)程,實(shí)際上是不同來(lái)源的基因重組的過(guò)程。 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 質(zhì)粒中插入啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因 等 DNA片斷,也是同樣的重組方法