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正文內(nèi)容

冠心病患者輔助性t細(xì)胞亞群17的變化及意義(編輯修改稿)

2025-02-11 01:12 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 TTGCCCAGAACC3′,反義引物5′CTGCCCATCATTGCTGTTAATCC3′。STAT3:正義引物5′TGCCTTATCAGGGCTGGGATAC3′,反義引物5′GGGACCTTTAGACACGCAAGGA3′。GAPDH:正義引物5′GCACCGTCAAGGCTGAGAAC3′,反義引物5′TGGTGAAGACGCCAGTGGA3′。配制20 ΜL反應(yīng)體系,在IQ5型熒光定量PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增。反應(yīng)條件為:95 ℃預(yù)變性10 s,95 ℃ 5 s,61 ℃ 15 s,72 ℃ 10 s,共45個(gè)循環(huán),結(jié)果以GAPDH為管家基因,2△△CT計(jì)算mRNA的相對(duì)表達(dá)。    ELISA法檢測(cè)血清IL17A的濃度   應(yīng)用ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè),酶標(biāo)儀測(cè)在450 nm波長(zhǎng)處的吸光度值,IL17A的靈敏度為4 ng/L。    統(tǒng)計(jì)學(xué)分析   。CKMB、TnI用四分位數(shù)間距表示,患者的基本情況、生化指標(biāo)和細(xì)胞百分率以均數(shù)177。標(biāo)準(zhǔn)差(x177。s)表示。CKMB、TnI和mRNA水平不符合正態(tài)分布,用MannWhitney U檢驗(yàn),組間的比較用Bonferroni 法調(diào)整檢驗(yàn)水準(zhǔn)?;颊叩囊话阗Y料和細(xì)胞百分率符合正態(tài)分布,采用方差分析(ANOVA),方差齊的數(shù)據(jù)采用SNK檢驗(yàn),不齊的用GamesHowell檢驗(yàn)。P。   2 結(jié)  果    各組患者的一般情況和生化指標(biāo)的比較   各組患者的年齡、性別、高血壓、血脂等冠心病的危險(xiǎn)因素的比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P),AMI組的CKMB、TnI較其余3組均顯著升高(P,表1)。表1 各組患者的一般情況和生化指標(biāo)的比較    各組患者Th17細(xì)胞百分率的比較   UA組和AMI組患者Th17(IL17A/CD4+T)細(xì)胞的百分率分別為(177。)%和(177。)%,較SA組的(177。)%和對(duì)照組的(177。)%明顯升高(P,圖1),而UA組和AMI組、SA組和對(duì)照組的兩兩比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。圖1 UA組和AMI組外周血Th17細(xì)胞的百分率明顯升高A:各組患者CD4+IL17A+細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞百分率的流式細(xì)胞圖(各1例,以CD4+細(xì)胞為例)。B:各組患者Th17細(xì)胞百分率的比較,與對(duì)照組和SA組比較,*P。    各組患者Th17細(xì)胞相關(guān)基因mRNA表達(dá)的比較   與對(duì)照組比較,AMI組患者Th17細(xì)胞相關(guān)基因IL17A、RORΓt和STAT3 mRNA表達(dá)均顯著升高(P)。與對(duì)照組比較,UA組患者IL17A和STAT3 mRNA表達(dá)顯著升高(P),而RORΓt僅有增高的趨勢(shì)(P=)。與SA組比較,AMI組患者IL17A和RORΓt mRNA表達(dá)顯著升高(P),而STAT3 mRNA表達(dá)僅有增高趨勢(shì)(P=)。與SA組比較,UA組患者IL17A、RORΓt和STAT3 mRNA表達(dá)雖有增高趨勢(shì),但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖2)。    各組患者血漿IL17A濃度的檢測(cè)情況   血漿IL17A濃度在對(duì)照組和SA組僅有1例可檢測(cè)出,在UA組和AMI組分別有3和2例檢測(cè)到,其余均低于試劑盒的最低檢測(cè)水平而未能檢測(cè)。因此,我們不便比較各組血漿IL17A的濃度。圖2 各組患者Th17細(xì)胞相關(guān)基因mRNA表達(dá)的比較   3 討  論   在不同類型的冠心病中,急性冠脈綜合征(ACS)是其中非常嚴(yán)重的類型。ACS包括不穩(wěn)定性心絞痛和急性心肌梗死,是由于不穩(wěn)定的AS斑塊破潰和斑塊內(nèi)出血,繼發(fā)血栓形成,導(dǎo)致冠脈管腔完全或不完全阻塞引起。在不穩(wěn)定斑塊的破潰中,免疫細(xì)胞尤其是T淋巴細(xì)胞起著重要的作用[56]。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為,輔助性T細(xì)胞亞群1(Th1)促進(jìn)AS斑塊破裂[7],而調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)可能使斑塊更趨于穩(wěn)定[8]。   近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的Th17細(xì)胞是一種新的CD4+T細(xì)胞亞型,主要分泌IL17A等細(xì)胞因子,RORΓt和STAT3是Th17細(xì)胞分化和分泌IL17A的關(guān)鍵核轉(zhuǎn)錄因子。Th17細(xì)胞在多種自身免疫疾病如EAE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和炎癥性腸病的發(fā)生中起著至關(guān)重要的作用。而在AS的發(fā)生發(fā)展中,多數(shù)研究表明IL17A促進(jìn)了AS的發(fā)生[910],但亦有研究表明IL17A可能對(duì)AS起保護(hù)作用[11]。為進(jìn)一步
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