微生物的純培養(yǎng)及顯微技術(shù)(編輯修改稿)
2025-02-10 00:05 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 單細(xì)胞分離 ★必須借助于低倍顯微鏡 （較大的微生物） 或顯微操作儀 （較小的微生物）； ★對(duì)操作技術(shù)要求高，多限于高度專(zhuān)業(yè)化的科學(xué)研究。 選擇培養(yǎng)分離 ★ 適宜于從自然界中分離、尋找有用的微生物或劣勢(shì)生長(zhǎng) 微生物。 1）利用選擇培養(yǎng)基直接分離 ● 原理：根據(jù)待分離微生物的特點(diǎn)選擇不同的培養(yǎng)條件。如 分離高溫菌，可在高溫條件下培養(yǎng)；分離某種抗生素的抗 性菌株可在加有抗生素的平板上分離。 2）富集培養(yǎng) ● 原理：利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，制定特定 的環(huán)境條件，使僅適應(yīng)于該條件的微生物生長(zhǎng)（即抑制大 多數(shù)微生物的生長(zhǎng)），從而使其在群落中的數(shù)量大大增加， 進(jìn)而對(duì)其進(jìn)行分離。如分離降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物配置 以對(duì)羥基苯甲酸為唯一碳源的培養(yǎng)基。 ★ 富集培養(yǎng)是分離微生物最強(qiáng)有力的手段之一。它可以用來(lái) 分離培養(yǎng)出由科學(xué)家設(shè)計(jì)的特定環(huán)境中能生長(zhǎng)的微生物。 三） 二元培養(yǎng)物分離 ● 二元培養(yǎng)物：如果培養(yǎng)物中只含兩種微生物，而且有意識(shí) 地保持其二者之間特定關(guān)系的培養(yǎng)物稱(chēng)為二元培養(yǎng)物。 ★ 適宜于不能或很難得到純培養(yǎng)的微生物。 ★ 如病毒是二元培養(yǎng)物保存的最有效途徑，因?yàn)椴《臼羌?xì)胞 生物的嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生物。 四）不同的微生物有不同的最適方法，在實(shí)踐中根據(jù)需要采取其 最適方法。 四、微生物的保藏技術(shù) 1） 目的：為了保證微生物研究和應(yīng)用工作的順利進(jìn)行，通過(guò)分 離純化的微生物必須通過(guò)各種保藏技術(shù)保藏。 2） 要求：不死；不被污染；不變異。 3） 原理：根據(jù)菌種特性及保藏目的的不同，給微生物以特定的 條件，使其存活而得以延續(xù)。 A： 利用培養(yǎng)基或宿主對(duì)微生物菌株進(jìn)行連續(xù)接種； B：改變其所處的環(huán)境條件如干燥、低溫、缺氧等令菌株的代 謝水平降低，乃至完全停止，達(dá)到半休眠或完全休眠的狀 態(tài)，使其在一定時(shí)間內(nèi)得以保存。 4）保藏方法 （ 1） 傳代培養(yǎng)保藏 ● 類(lèi)型：瓊脂斜面、半固體瓊脂柱及液體培養(yǎng)基 ● 注意： A， 在規(guī)定時(shí)間內(nèi)接種（一般 1個(gè)月） B， 降低培養(yǎng)物的代謝或防止培養(yǎng)物干燥可延長(zhǎng)傳代 保藏的時(shí)間。 ● 優(yōu)點(diǎn)：使用方便。 ●缺點(diǎn)： ★工作繁瑣 ； ★ 容易污染； ★ 易導(dǎo)致菌種的衰退。 （ 2）冷凍保藏 ● 原理：將微生物處于冷凍狀態(tài)使其代謝作用停止以達(dá)到保 藏的目的 （降低溫度） 。 ● 方法： ★ 液氮 （ 196℃ ）； ★ 70 ℃ 低溫冰箱； ★ 20 ℃ 普通冰箱 （溫度越低越好） ● 注意：盡量減小冰晶對(duì)細(xì)胞（主要是細(xì)胞膜）的損傷。 ★ 速凍；
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