酶聯(lián)免疫吸附技術在食品農藥殘留檢測(編輯修改稿)
2025-02-09 20:56 本頁面
【文章內容簡介】 。多克隆抗體偶爾會不識別農藥分子 ,從而影響了標準曲線的準確性。單克隆抗體不僅特異性高 ,而且產生抗體的單克隆細胞可在體外傳代繁殖 ,不受動物免疫時間限制。近些年來 ,隨著人們對免疫球蛋白結構的認識和 DNA重組技術的發(fā)展 ,抗體進入了第一個發(fā)展階段 — 抗體庫 。將多種抗原一起免疫小鼠 ,免疫后無菌條件下取出小鼠脾 ,提取脾細胞總 RNA。以 RNA逆轉錄合成的 cDNA為模板 ,PCR擴增抗體 ,將抗體中的輕重鏈連接成單鏈抗體 ScFv(Singlechain variable fragment)。這些重組抗體比常規(guī)單、多克隆抗體的生產速度快 ,可通過誘變改變抗體特性 ,使抗體的特異性更強 ,而且最明顯的優(yōu)勢是利用這項技術生產的噬菌體抗體庫可同時檢測多個農藥殘留 ,可制備成試劑盒用于農藥殘留檢測。 ELISA檢測（競爭法測抗原） 結果預測 空白 陽性 待測顯色 — + +注： “+”無色或極淺； “—” 深色。 討論樣品中的抗原和酶標抗原可競爭與固相抗體結合 ,待測樣品中抗原含量越高 ,則與固相抗體結合的越多 ,使得酶標抗原與固相抗體結合的機會就越少 ,甚至沒有機會結合 ,這樣加入底物后就不顯色或顯色很淺為陽性 ,顯色深者為陰性 [8]
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