酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)(編輯修改稿)
2025-02-09 20:56 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 。多克隆抗體偶爾會(huì)不識(shí)別農(nóng)藥分子 ,從而影響了標(biāo)準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)確性。單克隆抗體不僅特異性高 ,而且產(chǎn)生抗體的單克隆細(xì)胞可在體外傳代繁殖 ,不受動(dòng)物免疫時(shí)間限制。近些年來 ,隨著人們對(duì)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí)和 DNA重組技術(shù)的發(fā)展 ,抗體進(jìn)入了第一個(gè)發(fā)展階段 — 抗體庫 。將多種抗原一起免疫小鼠 ,免疫后無菌條件下取出小鼠脾 ,提取脾細(xì)胞總 RNA。以 RNA逆轉(zhuǎn)錄合成的 cDNA為模板 ,PCR擴(kuò)增抗體 ,將抗體中的輕重鏈連接成單鏈抗體 ScFv(Singlechain variable fragment)。這些重組抗體比常規(guī)單、多克隆抗體的生產(chǎn)速度快 ,可通過誘變改變抗體特性 ,使抗體的特異性更強(qiáng) ,而且最明顯的優(yōu)勢(shì)是利用這項(xiàng)技術(shù)生產(chǎn)的噬菌體抗體庫可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)農(nóng)藥殘留 ,可制備成試劑盒用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)。 ELISA檢測(cè)（競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原） 結(jié)果預(yù)測(cè) 空白 陽性 待測(cè)顯色 — + +注： “+”無色或極淺； “—” 深色。 討論樣品中的抗原和酶標(biāo)抗原可競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合 ,待測(cè)樣品中抗原含量越高 ,則與固相抗體結(jié)合的越多 ,使得酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合的機(jī)會(huì)就越少 ,甚至沒有機(jī)會(huì)結(jié)合 ,這樣加入底物后就不顯色或顯色很淺為陽性 ,顯色深者為陰性 [8]
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