【文章內容簡介】 體內。 9 水的主要生理功能是參與代謝反應，作為反應的介質，提供氫、氧元素；參與物質運輸；傳遞熱量，調節(jié)體溫。9 培養(yǎng)基中的生長因素的主要功能是作為酶的重要組成成分。 9化學物質滅菌只適用于局部空間或某些器械消毒。 9 用于輻射滅菌的射線有 X 射線， y 射線和紫外線。 9 紫外線殺菌最有效波長為2537A。 9 干熱滅菌主要用于器械、容器的滅菌。 9 濕熱滅菌是直接采用蒸汽滅菌。 9 工業(yè)微生物選育的目的是改良菌種的特性，使其符合工業(yè)生產的要求。 9 工業(yè)微生物選 育的方法主要有自然選育、誘變育種、雜交育種、原生質體融合育種、基因工程育種技術。100、 誘變育種的誘變因素主要分物理、化學和生物學三類。 10 誘變育種整個過程就是誘變和篩選的重復。 10 通過基因工程改造后的菌株稱為工程菌。 10 斜面低溫保藏微生物菌種是利用低溫短期保存菌種方法。 10 液體石蠟封存法保存菌種不適用于能利用石蠟的微生物。 10 砂土管保存菌種的方法僅適用于產孢子的放線菌、霉菌以及產芽孢的細菌。 10 冷凍干燥保存法適用于各種菌種的保存。 10 超低溫保藏菌種的方法適用于各種菌種，其操作要 點在于慢凍速融。 10 工業(yè)微生物細菌的培養(yǎng)方法有表面培養(yǎng)法、深層培養(yǎng)法、透析法和萃取培養(yǎng)法。 10 微生物細胞的液體表面培養(yǎng)方法都是氣體在基質表面上進行交換。 1 液體表面培養(yǎng)法的優(yōu)點就是簡單易行，投資少及適用于小型生產。 11 液體深層培養(yǎng)法又可分為需氧深層培養(yǎng)和厭氧深層培養(yǎng)。 11 深 層通氣培養(yǎng)是在純種條件下，強制通人無菌空氣到密閉發(fā)酵罐中進行培養(yǎng)的方式。 11 在分批培養(yǎng)過程中，細胞生長大致有四個階段：遲滯期；對數生長期；平衡期；死亡期。 11連續(xù)培養(yǎng)法的優(yōu)點是設備利用率高，缺點是易于染菌。 11 碳源豐富造成的生理酸性營養(yǎng)環(huán)境不利于放線菌孢子形成。 11 一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導放線菌孢子形成。 11 霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麥皮、麥粒等天然農產晶為培養(yǎng)基。 11 細菌的斜面培養(yǎng)基多采用碳源限量而氮源豐富的配方。 119 微生物培養(yǎng)與培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度、 PH 值，溶解氧、培養(yǎng)時間、泡沫、 C0菌濃及產物濃度等有關。 1 微生物培養(yǎng)的溫度應略低于微生物生長的最適溫度。 12 大多數細菌適于中性或微堿性環(huán)境，放線菌喜微堿性，而酵母菌和霉菌則喜酸性。12 發(fā)酵液的需氧量 ，受菌體濃度，基質的種類和濃度以及培養(yǎng)條件等因素的影響。 12 供融合用的親株要求性能穩(wěn)定并帶有遺傳標記，采用的遺傳標記 — 般為營養(yǎng)缺陷型和抗生素抗性等遺傳性狀。12 細菌和放線菌主要采用溶菌酶制備原生質體。 12 對于酵母菌和霉菌原生質體的制備，則一般采用蝸牛酶和纖維素酶。 12 高滲培養(yǎng)基稱為原生質體穩(wěn)定液。 12 一般原生質體融合選用 40006000分子量的聚乙二醇較好。 12 影響原生質體再生的因素主要有菌種的特性，原生質體制備條件，再生培養(yǎng)基成份，再生培養(yǎng)條件等。 12酵母原生質體融合主要分為 原生質體制備，原生質體融合及融合子的選擇。 1 放線菌原生質體融合中相關培養(yǎng)基為 SI 培養(yǎng)基， GPYG培養(yǎng)基， P3培養(yǎng)基， PWP 液， P 培養(yǎng)基， R2 培養(yǎng)基及 R3 培養(yǎng)基。 13R R3 培養(yǎng)基屬于放線菌原生質體再生培養(yǎng)基。 13 7， 8— 二甲基— 10— (D— 11— 核糖基 )異咯嗪即維生素 B2。 13 氫化可的松屬于糖皮質激素，臨床上主要用于抗炎、抗過敏等。 13 植物細胞工程包括植物細胞及其原生質體的培養(yǎng)，植物原生質體融合，細胞大規(guī)模培養(yǎng)及次生代謝物的生產。 13 植物培養(yǎng)細胞無錨地依賴性及接觸抑制性。 13 植物細胞生長的最適 pH通常為 5． 86． 0。 13 植物細胞實驗室培養(yǎng)法是懸浮、微室、平板、看護、懸滴及單花粉等多種培養(yǎng)方乒。 13 懸浮培養(yǎng)特點是培養(yǎng)過程中，細胞總數不斷增加，一定時間后產量達最高點，生長趨于停止。 13 植物細胞接種濃度通常為 細胞／毫升。 1 植物細胞單細胞培養(yǎng)技術有平板培養(yǎng)法，微室培養(yǎng)法、看護培養(yǎng)法等。 14 微室培養(yǎng)法的優(yōu)點是可直接觀察分裂繁殖及分化全過程，胞質環(huán)流規(guī)律及線粒體生長與分裂活動，亦可進行連續(xù)觀察原生質體融合，細胞壁再生及融合后細胞分 裂活動，同時可進行顯微攝像。 14 看護培養(yǎng)法培養(yǎng)時間較微室培養(yǎng)長。 14 細胞突變的主要原因是染色體缺失、重復、倒位、異位、堿基順序轉換、顛換及移碼所引起； 14 植物細胞培養(yǎng)物易發(fā)生自發(fā)突變，其突變頻率在 107—— 106 之間。 14 人工誘發(fā)植物細胞突變的化學因素主要有堿基類似物、烷化劑、抗生素等。14 篩選植物突變細胞的目的在于獲得某些藥物高產細胞株或某些物質轉化的高產酶細胞株。 14 篩選細胞突變體主要依據細胞表型變化。 14 自離體植物細胞培養(yǎng)物中篩選細胞突變體的方法有直接選擇法，間接選擇法 及綠島法。 14 植物細胞培養(yǎng)物處于無組織及無器官分化的分散狀態(tài)時許多重要基因并不表達。 14 目前已建立植物細胞種質保存法有：干燥保存法，液體石蠟覆蓋法，低溫保存法，低壓低氧保存法及超低溫深凍保存法。 150、 超低溫深凍保存法系將植物種質于 — 196℃的液氮中保存。 15 常用的冰凍保護劑有 DMSO，甘油， PEG，葡萄糖、山梨糖及蔗糖。 15 為提高存活力，凍存材料應選用抗寒力強的幼齡培養(yǎng)細胞。 15 對于種子、花粉、球莖、塊莖等高度脫水材料可以采用快速降溫凍存。 15 對于不耐寒植物細胞需采用慢速冰凍法。 15 對于木本植物冬芽凍存物需于 0℃慢速化凍。 15 深凍細胞活力及存活率測定的方法有再培養(yǎng)法、二醋酸熒光素染色法及氯化三苯四氮唑還原法。 15 再培養(yǎng)法是檢查細胞活力的根本方法。 15 植物原生質體制備的材料應用較多的是葉片，愈傷組織及懸浮培養(yǎng)細胞。 15 高等植物細胞壁主要成分為纖維素，其次為半纖維素、果膠質及蛋白質。 160、 植物原生質體制備時的脛壁酶有纖維素酶，果膠酶，半纖維素酶，蝸牛酶及崩潰酶。 16 纖維素蝴時的 pH 值為 5． 4。 16 果膠酶最適． pH 值為 5． 8。 16 纖維素酶及果膠酶混合使用的 PH值為 5． 45． 6 之間。 16 脫壁酶液采用 0． 45um 微孔濾膜過濾除菌。 16 純化植物原生質體的方法有離心法、飄浮法、界面法及滴洗法。 16 植物原生質體活力甜定方法有：根據形態(tài)特征判斷其活力，活體染色法及熒光染料活體染色法。16 大多數植物原生質培養(yǎng) 13day 即再生新細胞壁。 16 大多數植物原生質體通常在 12 周內發(fā)生第一次分裂。 16 誘導生根的培養(yǎng)基含有低濃度生長素，而不含有分裂素。 170、 植物細胞融合實質是其原生質體融合。 17 PEG誘導植物細胞融合時，關鍵是 PEG作用時間。 17 PEG 誘導植物細胞融合的， PEG 規(guī)格和純度影響結果。17 植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的目的在于通過規(guī)模培養(yǎng)，獲得細胞，初級及次級代謝產物，為藥品、食品及化工行業(yè)提供服務。 17 植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)設備有漿式攪拌罐，多孔板式攪拌罐、卡普蘭式螺旋漿攪拌罐及空氣提升式培養(yǎng)罐。 17 動物細胞工程的內容十分廣泛，包括人工受精、．胚胎移植、體外受精、性別選擇、細胞融合等。 17 原代動物培養(yǎng)細胞一般繁殖 50 代即退化死亡。 17動物細胞所需營養(yǎng)要求高，其碳源不可為無機物。 17 開發(fā)動物細胞無血清培養(yǎng)基，將促進動物細胞 工程的發(fā)展。 17 動物細胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)動物器官，組織及細胞的營養(yǎng)液體，只有維持液及生長液之分。 180、 動物細胞培養(yǎng)基的維持液含低濃度或不含小牛血清，生長液含 5％ 20％的小牛血清。 18 以組織塊為材料的培養(yǎng)方法叫組織塊培養(yǎng)法。 18 細胞培養(yǎng)包括細胞及細胞團塊單層培養(yǎng)及單細胞克隆培養(yǎng) 18 細胞培養(yǎng)又分初代培養(yǎng)，二倍體細胞培養(yǎng)及確立細胞株培養(yǎng)。 18 動物細胞培養(yǎng)材料采源有胚胎及成體的組織和器官。 18人皮膚細胞分散較難，適宜于用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)。 18 組織塊培養(yǎng)法又分為血漿凝固培養(yǎng)法，膠原固著培 養(yǎng)法及無基質固著培養(yǎng)法。187 動物細胞培養(yǎng)條件 — 般為 37℃， 5％ C02。 18 小牛血清可以保護動物細胞免受胰酶的消化。 18 動物細胞培養(yǎng)時通人 C02 以維持培養(yǎng)基的 p11值。 190、 正常組織原代單層細胞不能無限期繁殖。19 微量板細胞克隆法是分離混雜細胞的優(yōu)良方法。 19 微量板細胞克隆法是可以用于建立純細胞系，檢查細胞遺傳性的一致性，分離細胞變種，評價藥物及毒物對細胞生長的影響，篩選淋巴細胞雜交瘤及基因工程細胞，制備單克隆抗體并用于病毒學研究。 19 二倍體細胞培養(yǎng)壽命