高二生物同步課件：5-3血紅蛋白的提取和分離人教版選修i44張(編輯修改稿)
2025-02-04 13:17 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 色譜柱 加入和洗脫 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 4． 操作提示 (1)紅 細(xì)胞的洗滌 、 與 十分重要 。 洗滌次數(shù)過(guò)少 ，無(wú)法除去 ；離心速度 和時(shí)間 會(huì)使 等一同沉淀 ， 達(dá)不到分離效果 。 (2)色譜柱填料的處理 商品凝膠使用前需直接放在 中膨脹 ， 可以將加入其中的濕凝膠 ， 加速膨脹 。 洗滌次數(shù) 離心速度 離心時(shí)間 血漿蛋白 過(guò)高 過(guò)長(zhǎng) 白細(xì)胞 洗脫液 用沸水浴加熱 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 (3)凝膠色譜柱的裝填 在裝填凝膠柱時(shí) ， 不得有 存在 。 因其能攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的 ， 降低分離效果 。 (4)蛋白質(zhì)的分離 如果 ， 說(shuō)明色譜柱制作成功 。 氣泡 洗脫次序 紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng) 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 [思維激活 2] 透 析的目的是什么 ？ 依據(jù)了什么原理 ？ 提示 透析的目的在于去除血紅蛋白溶液中相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì) ， 透析依據(jù)的原理是半透膜只允許小分子透過(guò) ， 不允許大分子透過(guò) 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 1． 樣品的處理 (1)紅 細(xì)胞的洗滌 ① 目的：去除雜蛋白 。 ② 方法 a． 采集血樣 → → → → e.低速離心 → 重復(fù) d、 e步驟三次 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 (2)血紅蛋白的釋放 紅細(xì)胞在蒸餾水和甲苯的作用下破裂 ， 釋放出血紅蛋白 。 (3)分離血紅蛋白溶液 ① 將混合液進(jìn)行離心后 ， 會(huì)明顯看到試管中的溶液的分層情況 (從上往下 )：第 1層：無(wú)色透明的甲苯層；第 2層：脂溶性物質(zhì)的沉淀層 ——白色薄層固體；第 3層：血紅蛋白的水溶液 ——紅色透明液體；第 4層：其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物 。 ② 將液體用濾紙過(guò)濾 ， 除去脂溶性沉淀層 ， 于分液漏斗中靜置片刻后 ， 分出下層的紅色透明液體 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 ③ 目的：經(jīng)過(guò)離心使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開來(lái) ， 便于下一步對(duì)血紅蛋白的純化 。 (4)透析 ① 原理：透析袋能使小分子自由進(jìn)出 ， 而將大分子保留在袋內(nèi) 。 ② 過(guò)程：取 1 mL的血紅蛋白溶液裝入透析袋中 ， 將透析袋放入盛有 300 mL的物質(zhì)的量濃度為 20 mmol/L的磷酸緩沖液中 (pH為 )，透析 12 h。 ③ 目的： ； b． 用于更換樣品的緩沖液 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 2．凝膠色譜操作 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 3． 純度鑒定 ——SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳 判 斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求 ， 需要進(jìn)行蛋白質(zhì)純度的鑒定 。鑒定的方法中 ， 使用最多的是 SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳 。 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 4． 結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 項(xiàng) 目 分 析 血液樣品 的處理 ① 分層明顯 → 樣品處理完成 ② 分層不明顯的原因????? 洗滌次數(shù)少，未能除去血漿蛋白離心速度過(guò)高或時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 凝膠色譜 柱的裝填 ① 放一支與凝膠柱垂直的日光燈 → 直接檢查凝膠是否裝填得均勻 ② 加入大分子有色物質(zhì)如藍(lán)色葡聚糖－ 2 000 或紅色葡聚糖，若色帶均勻、狹窄、平整 → 裝填成功 熱點(diǎn)考向示例 隨堂達(dá)標(biāo)檢測(cè) 課堂互動(dòng)探究 教科書問(wèn)題解答 活頁(yè)規(guī)范訓(xùn)練 血紅蛋白
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