【文章內(nèi)容簡介】 比較上， Jagannath 等 [25]研究認為，在使用 Ⅱ 、 Ⅲ 期 幼蟲做 抗原進行間接血凝 (IHA)和皮膚變態(tài)反應(yīng) (ID)的羊 狂 蠅蛆病檢測時， IHA效果較ID敏感， Ⅱ 期 幼蟲抗原性 比 Ⅲ 期 幼蟲好 [25]。 Garfias 等 [38]還用雙向免疫擴散 (DD)和IHA方法研究了 羊狂蠅 幼蟲抗原與羊胃腸道線蟲的交叉免疫反應(yīng)。 Marchenko 等 [39]還通過用 ELISA 法 測定了宿主抗羊鼻蠅 蛆 特異性抗體動力學(xué)的方法，發(fā)現(xiàn)抗體水平與幼蟲齡期、寄生數(shù)量，以及宿主的年齡密切相關(guān)。 病理學(xué) 羊 狂 蠅是一種重要的寄生性蠅類， 其最主要宿主 是 綿羊 ， 寄生部位通常 為 羊的鼻腔、額竇等部位 [2]，偶而 也可 移 行 侵入氣管和肺 [8]，甚至 達 腦 [22]。引起的主要病理變化有竇 黏膜 水腫、壞死，鼻卡他，鼻竇蓄膿，鼻軟骨變形，以及 鼻黏膜 受刺激后的 打 噴嚏、呼吸粗厲 等慢性鼻炎的癥狀。偶 而 感染 人 后多為眼蠅蛆病，主要癥狀是流淚、有異物感，懼光，可導(dǎo)致角膜混濁、 結(jié)膜炎 ，甚至失明 [ 40]，但蟲體通常不能正常 發(fā)育 [41]。 危害及臨床癥狀 羊鼻蠅蛆成蟲在襲 擊羊群產(chǎn)幼蟲（蛆）時，會造成羊只的恐慌， 騷動不安，互相擁擠。 導(dǎo)致其頻頻甩頭或 鼻孔緊帖 于 地面 ，嚴重影響羊只的采食及休息，也容易對羊只造成外在傷害。當幼蟲在鼻腔內(nèi)固著或移動時，以口前鉤和體表小刺機械地刺激和損傷 鼻黏膜 ，引起鼻腔 黏膜 和額竇 黏 膜發(fā)炎和腫脹 [1]。初期 患羊 鼻腔受到刺激，產(chǎn)生大量清鼻液，后由于病情惡化及繼發(fā)細菌感染導(dǎo)致產(chǎn)生大量粘稠的，甚至膿樣鼻液，更嚴重的會有帶血鼻液流出。大量鼻液干涸后，在鼻腔及鼻孔周圍形成鼻痂，導(dǎo)致羊只呼吸困難?；佳虮憩F(xiàn)為打噴嚏，甩鼻子，搖頭，磨牙，磨鼻，流淚，眼瞼浮腫，食欲減退，日 漸消瘦 [1]。數(shù)月后癥狀逐漸減輕，幼蟲在鼻腔深處穩(wěn)定 生長 發(fā)育，當發(fā)育為三期幼蟲時，蟲體變硬，增大，且開始向鼻腔淺部移 行 ，因此，癥狀又有所加劇。當個別幼蟲進入顱腔，損傷腦膜或因鼻竇發(fā)炎波及腦膜時，會引 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 5 起神經(jīng)癥狀，病羊表現(xiàn)為運動失調(diào)，旋轉(zhuǎn)運動，頭彎向一側(cè)或發(fā)生麻痹，即所謂的“假 性 回旋癥” [1]。最后，病羊因食欲廢絕，衰竭而死 亡。 羊狂蠅幼蟲偶爾侵害人體或其他動物，以眼部多為見，雌蠅有在陽光較強的白天急速而突然飛向人或其他哺乳動物的眼角、口部等處 ,產(chǎn)下幼蟲并隨即迅速飛走的習(xí)性。因人的眼角膜反光較其它部位強 ,成蠅趨 光而飛向眼睛部位 ,當碰撞時即將幼蟲產(chǎn)于眼中 ,由于幼蟲活動與結(jié)膜接觸后 ,幼蟲即用口鉤、尾鉤、棘刺固著于眼組織 ,對眼瞼及結(jié)膜產(chǎn)生強烈刺激 ,若侵入眼球 ,可致眼球破壞而失明。由羊狂蠅幼蟲所致的眼蠅蛆病在我國已報道 540 余例 [42]。羊狂蠅幼蟲侵害人體其他部位較少見，致鼻咽部蠅蛆病更為罕見，我國 1958年來共報道 10余例 [43～ 45]。多發(fā)生在牧區(qū) 6～ 9月份 ,男性和女性相比是 2: 1,年齡分布在 5～ 44歲之間 ,職業(yè)一般是農(nóng)民、學(xué)生、戰(zhàn)士。感染者多發(fā)生在一側(cè)眼睛 ,取出的蟲體多者 40 余條 ,少者 2條 ,平均 10 多條 [46]。 羊鼻蠅蛆病的防治 根據(jù)羊 狂 蠅 蛆 的寄生規(guī)律， 大多 學(xué)者 統(tǒng)一 認為在成蟲產(chǎn)幼蟲的高峰期 對該病 實施防治措施 [ 1 47]。但如何解決后續(xù)感染并打斷這種寄生蟲的生活史循環(huán)，尚無有效的 措施 。 對成蟲的防治要 遵循 ， 炎熱的夏季堅持早晚放牧， 夏季成蟲飛翔產(chǎn)幼蟲時要避免中午放牧， 中午應(yīng)將羊留在舍內(nèi) 盡 可能避開成蟲的侵襲 [12]。 夏秋季不光是牧區(qū)的居民、學(xué)生 ,以及外出或去山林活動的人們 ,應(yīng)特別注意眼的衛(wèi)生和防護 ,避免 成 蠅的碰撞。一旦發(fā)生眼被飛 蠅的 撞擊 ,出現(xiàn)異物感、刺痛、流淚和紅腫等癥狀 ,應(yīng)及時到醫(yī)院眼科 ,及時徹底清 除眼內(nèi)幼蟲 ,沖洗、消炎 ,以免造成眼睛 的進一步損傷。對于本病 醫(yī)治 的越早越好 ,應(yīng)引起臨床上的高度重視。 對羊 狂 蠅蛆病的防治有一定難度，目前既無有效地免疫制劑，也不可能人為驅(qū)趕，唯一可行的方法是定期進行藥物驅(qū)蟲，以防患于未然 [48]。 通常采用化學(xué)藥物，來 消滅鼻腔內(nèi) Ⅰ 期幼蟲，可將 3%來蘇兒溶液噴入鼻腔內(nèi)，效果甚佳 [49]。 許多國家包括前蘇聯(lián)是使用 80%敵敵畏 乳油熏蒸的方法 [50～ 51]。 為防治成 蠅 產(chǎn)幼蟲，也可在羊只鼻腔周圍及鼻部涂 抹 敵敵畏軟膏 [52]。 我國許多地區(qū)在成 蠅 侵襲高峰期通過使用有機磷類藥物來 醫(yī)治 病羊， 收到一定 效果， 但安全系數(shù) 不高 ， 用 藥繁瑣，熏蒸時藥物不能有效 迅速 到達鼻腔以及額竇、角竇等部位而使 蟲體得以逃生是這類藥物的不足之處[53]。近年來，國內(nèi)外使用的 廣譜 抗生素類藥物 (伊維菌素、阿維菌素 等 )治療羊鼻蠅蛆病，效果較好；該 抗生素 可驅(qū)殺所有各部位各 期 幼蟲，且毒副作用小 [54～ 55]。 另外，人們也在尋找化學(xué)藥物以外的防制 措施 ，如 Kal39。vish[56]研究了對昆蟲致病真菌的生理學(xué)特征。他發(fā)現(xiàn)有些真菌的孢子懸液對羊狂蠅成蠅的致死率可達 100%，這無疑提示人們用微生物對 羊鼻蠅 進行生物防治可能是一條新的防制途徑。 薄新文等 [57]還深入研究了羊鼻蠅 蛆 的趨性和生物 鐘 ，以求尋找利用趨性進行生物防治的可6 羊鼻蠅蛆病病理學(xué)及鼻黏膜免疫學(xué)研究 能。他們發(fā)現(xiàn)成蟲有一定的趨溫性、趨光性、趨觸性；幼蟲為負趨光性， 成蟲 為正趨光性；成 蠅 多趨短波長光且雄性略 弱 于雌性。生物鐘表現(xiàn)為晝出型。 鼻腔免疫部分 鼻 腔 是上呼吸道的主要門戶， 鼻腔 黏膜結(jié)構(gòu)和免疫功能同整個呼吸道以及全身免疫 保 護密切相關(guān)。通過鼻內(nèi)免疫可 產(chǎn)生 對多種細菌和病毒等 黏膜 致病原侵襲的保護。 鼻黏膜 相關(guān)淋巴組織在局部黏膜免疫和全身系統(tǒng)免疫起著重要作用。由于共同黏膜 免疫系統(tǒng)的存在，鼻黏膜免疫可在遠距離黏膜部位產(chǎn)生免疫反 應(yīng)。對動物和人體的研究表明，當病原體刺激鼻腔時， 可激發(fā)鼻內(nèi)免疫 產(chǎn)生有效的抗多種病原體的免疫保護 [58] 鼻腔組織學(xué)特點 鼻腔內(nèi)面襯以黏膜，稱 鼻黏膜 。 鼻黏膜緊密地附著 于 骨和軟骨上，鼻黏膜 毛細血管 豐富 [59]。 鼻黏膜 由上皮和固有層組成，上皮為假復(fù)層柱狀纖毛上皮，基膜較厚，有多種細胞如纖毛細胞、杯狀細胞、基細胞、刷細胞等，固有層中含有豐富的血管和神經(jīng)以及腺體，還有多種細胞如成纖維細胞、纖維細胞、巨噬細胞、肥大細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和 T、 B淋巴 細胞等 [60]。鼻黏膜呼吸部和嗅部黏膜固有層中除了 有分支管泡狀的鼻腺（混合 腺），還分布著大量淋巴細胞，淋巴細胞在有些部位密集形成淋巴小結(jié) ， 其中含有許多淋巴濾泡和毛細血管后微靜脈 ((high epithelialvenules， HEV)。鼻黏膜呼吸部和嗅部黏膜固有層淺層還有管徑較小的毛細 淋巴管，而在其深層，存在較粗大的淋巴管。鼻黏膜 的毛細淋巴管 及 淋巴管常和血管伴行，且常出現(xiàn)在腺體及其導(dǎo)管 周圍 。在鼻腔黏膜的淺層存在毛細淋巴管網(wǎng)，注入其深層的淋巴管叢，淋巴管的分布于各部 位 有所不同 [61]。這些結(jié)構(gòu)有利于鼻腔對外界的病原微生物進行免疫防御以及同機體其他免疫部位相 互 聯(lián)系。 鼻黏膜 上皮細胞表面豐富的微絨毛以及上皮下有大量毛細血管和毛細淋巴管網(wǎng)等，共同構(gòu)成鼻黏膜 排泄和 吸收 特殊 物質(zhì)的解剖生理學(xué)基礎(chǔ)。 鼻腔的免疫功能 鼻黏膜中含有豐富的血管和 黏液 腺， 能夠提高 吸入氣體的溫度和濕度， 黏 液還有粘著吸入氣體中的塵埃和微生物的作用。鼻腔內(nèi)表面覆蓋著特殊的上皮，分別有清除塵埃、分泌粘液、吸收或感覺功能。鼻 黏膜 中的各類細胞執(zhí)行各自特殊功能，其中肥大細胞和嗜堿性粒細胞與 I 型變態(tài)反應(yīng)有關(guān) ； 嗜酸性粒細胞 具有 很強的 趨化性，能吞噬 病 原體復(fù)合物 ，它 的胞質(zhì)內(nèi)充滿嗜酸性顆粒，顆粒內(nèi)有特殊的芳香基 硫酸酶和過氧化物酶，具有對抗 I 型變態(tài)反應(yīng)和抗寄生蟲等作用 ； 巨噬細胞有吞噬及捕捉、加工、貯存抗原和向淋巴細胞 遞呈 抗原以引起免疫應(yīng)答的作用 ； 中性粒細胞 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 7 內(nèi)的顆粒含有溶酶體，細胞在吞噬和處理抗原抗體復(fù)合物和微生物后大量死亡 [62]。鼻黏膜有防御能力，鼻黏膜分泌物內(nèi)含溶菌酶、干擾素 （ IFN） 、分泌性 IgA、 IgG和IgE。鼻 腔 黏膜 下的免疫細胞 是鼻腔免疫 應(yīng)答 的“重要力量”。這些細胞的表達 的 α 防御素具有廣譜 抗微生物活性，對細菌 (革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、分枝桿菌 )、真菌、 放線菌、 螺旋體及一些有包 膜的 病毒均有強大的殺滅作用 。 鼻相關(guān)淋巴組織 鼻腔黏膜相關(guān)淋巴組織 (Nose associated lymphoid tissue， NALT)位于人和動物呼吸道和消化道的入口處， 出現(xiàn)在胚胎中 在出生后 迅速 發(fā)育，特別是在接觸抗原后 [63]。 也 是首先接觸吸入和咽入微生物的部位，由 BALT誘發(fā)的 機體 體液免疫應(yīng)答主要是局部分泌 lgA，同時將 BALT衍生的 B淋巴 細胞轉(zhuǎn)運到遠處 黏膜 位點。因此， BALT被認為是與腸道中 黏膜 淋巴聚集體具有 相 似的功能，成為普通黏膜免疫系統(tǒng)中的 重要 一員。是抵御外來侵略的第一道防 護 線。 NALT表面覆蓋特異 性 上 皮，由立方型纖毛上皮細胞、黏膜杯狀細胞 構(gòu)成。于 NALT上皮下固有層或黏膜下分布有數(shù)量不等的成群淋巴濾泡，這些濾泡主要由 B 淋巴細胞和濾泡樹突狀細胞 (dendriticcells， DC)組成 ， 每個濾泡 間被濾泡間區(qū)所分隔。濾泡間區(qū)主要由 T 淋巴細胞和相互交錯的樹突狀細胞組 合而成，并且通過 HEV 向 血液中 填補 淋巴細胞。 NALT 上皮內(nèi)有一種特 殊的上皮細胞為膜 細胞 (melnbranous cell， M 細胞 )， M 細胞的主要功能是通過上皮屏障轉(zhuǎn)運抗原性物質(zhì)，然后由上皮下和上皮內(nèi)的淋巴細胞激發(fā)免疫 反應(yīng) 或免疫耐受 [64]。 鼻腔免疫研究進展 鼻腔中生理環(huán)境溫和， 是機體首先接觸大量吸入抗原 (包括病毒、細胞等 )的部位。 抗原誘導(dǎo)免疫 應(yīng)答 閾值 低 [65～ 66]，加上鼻腔含有豐富的 NALT， NALT 位于整個呼吸道免疫系統(tǒng)起始部分 ，在呼吸道局部免疫以及全身免疫防御中發(fā)揮著重要的作用。因此鼻黏膜是一個理想的鼻腔免疫的誘導(dǎo)位點 [67]。哺乳動物抗上呼吸道、胃腸道寄生蟲感染的能力與局部黏膜免疫應(yīng)答有關(guān) [68]。在誘導(dǎo)位點，幼稚 B 淋巴細胞和 T 淋巴細胞進行克隆選擇并與吸入的抗原接觸后增殖。 B 淋巴細胞和 T 淋巴細胞在經(jīng)過誘導(dǎo)位點抗原預(yù)處理后活化，重 新分布在效應(yīng)位點發(fā)揮免疫功能。黏膜部位致敏的免疫細胞途經(jīng)胸導(dǎo)管通過血液循環(huán)逐步分化成熟，在 B 淋巴 細胞和 T 淋巴 細胞表達的特異性歸巢受體的介導(dǎo)下，多數(shù)免疫細胞 (大約 80% )歸巢到抗原致敏部位 (即上皮內(nèi)或誘導(dǎo)部位的黏膜固有層 )發(fā)揮效應(yīng)功能，由此使黏膜免疫相對獨立于系統(tǒng)免疫，表現(xiàn)為局部性。另外，約 20%的免疫細胞進入其它的黏膜部位，發(fā)揮效應(yīng)功能，使不同黏 膜部位的 黏膜 免疫反應(yīng)相聯(lián)系 [69]。 NALT是鼻黏膜受到外界抗原刺激后誘導(dǎo)產(chǎn)生抗原特異性免疫反應(yīng)的的一個效應(yīng)8 羊鼻蠅蛆病病理學(xué)及鼻黏膜免疫學(xué)研究 位點 [70]。在 NALT表面的淋巴上皮中，纖毛細胞和 杯狀細胞的數(shù)量減少，而有大量的上皮間 T 淋巴、 B 淋巴細胞和 抗原遞成細胞（ APC） 。有報道說，其 淋巴上皮中的非絨毛細胞有可改變的超微結(jié)構(gòu)并可將辣根過氧化物酶 金復(fù)合物顆粒轉(zhuǎn)運過上皮，但還需進一步 試驗 證明這些細胞為 M細胞 [71]。 鼻黏膜 的淋巴引流方向是先至鎖骨淺表淋巴結(jié)，而后至鎖骨后淋巴結(jié)，而 NALT 的淋巴則引流至鎖骨后淋巴結(jié) [72]。 NALT 是上呼吸道中唯一結(jié)構(gòu)完善的黏膜相關(guān)淋巴組織， NALT固有層中漿細胞在黏膜免疫系統(tǒng)應(yīng)答中，無論是通過黏膜抗原刺激后形成的 抗體分泌細胞（ ASC） 數(shù)量還是免疫球蛋白分泌的水平都 明顯高于全身體液免疫應(yīng)答 [73]。 NALT 的作用機制與腸 黏膜 相關(guān)淋巴組織（ GALT）相似 ,它可有效激發(fā)黏膜和系統(tǒng)的免疫應(yīng)答。 但與其它黏膜相關(guān)淋巴組織（ MALT）的不同在于 NALT介導(dǎo)的免疫應(yīng)答不僅對鼻內(nèi)進入的抗原產(chǎn)生局部免疫應(yīng)答，還能在其它黏膜處誘導(dǎo)產(chǎn)生針對同一種抗原的強烈的黏膜免疫反應(yīng)。原因被認為是：首先，鼻咽腔有著豐富的血管及淋巴組織，且不像胃腸 道 含有大量的 、可降解抗原 的酶類物質(zhì) ,因此抗原可較完整的吸收；其次，在 NALT 中可能存在類似胃腸道的 M細胞，這些細胞攝取的抗原經(jīng)抗 APC 處理后，遞呈給 T淋巴細 胞和（或）B淋巴細胞。 T淋巴細胞被激活，促使未成熟的 B淋巴細胞被致敏，隨后， B淋巴細胞、 Th1或 Th2型細胞及 CD8+ T細胞離開鼻咽腔上的淋巴結(jié)，流經(jīng)淋巴管進入體循環(huán)，最后大部分淋巴細胞歸巢至 鼻黏膜 固有層和其它黏膜效應(yīng)部位，不僅在上呼吸道有明顯的免疫反應(yīng)，在下呼吸道、胃腸道、泌尿生殖道等黏膜部位產(chǎn)生廣泛的黏膜