【文章內(nèi)容簡介】 ,SAF), 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 44 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 45 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 46 ? SAF發(fā)現(xiàn)于自然感染和人工感染癢病的綿羊腦組織內(nèi)，也見于牛海綿狀腦病和人類克 雅氏病的腦組織內(nèi) . ? 因其具有一定的特異性 —— 作為各種海綿狀腦病的病理學(xué)診斷指標(biāo)。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 47 ? PrPsc在感染動物的各種組織中的含量不同 ， 按感染滴度大小 ， 以 腦 為最高 ， 脊髓 次之 ， 其它淋巴結(jié) 、 骨骼 、肺 、 心 、 腎 、 肌肉等的感染滴度均甚低 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 48 ? 2. 流行病學(xué) ? 不同性別 、 不同品種的羊均可發(fā)生癢病 ， 但品種間的易感性顯然有很大差異 。 ? 在品種內(nèi)某些受感染的譜系發(fā)病率高 ， 可能與垂直傳播有關(guān) 。 ? 一般發(fā)生于 2～ 4歲的羊 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 49 ? 綿羊與山羊間可以接觸傳播 。 ? 關(guān)于癢病的傳播途徑 ， 還不完全清楚 ， 但已知可垂直和水平傳播 。 ? 已證實感染母羊的胎膜和胎盤內(nèi)含有癢病病毒 ， 可從母羊垂直傳染胎羊和羔羊 。 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 50 2022/2/3 ? 取病羊血液和血清接種易感綿羊 ， 可使之發(fā)病 。 ? 病羊的腦脊髓懸浮液經(jīng)腦內(nèi)甚至皮下注射 ， 均能在易感綿羊復(fù)制本病 。 ? 將感染的腦組織非經(jīng)腸注射 (或經(jīng)口服 )于小鼠 、 大鼠 、 倉鼠 、 水貂和猴都能引起實驗性的癢病 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 51 ? 3. 發(fā)病機理 ？？？ ? 綿羊感染本病后 ， 特別是實驗接種后 ，病毒進(jìn)入血液并定位于脾和淋巴結(jié)中 ， 后來可發(fā)現(xiàn)于唾液腺 、 胸腺 、 肺 、 骨髓 、 肝 、腎 、 膀胱和腸道 。 ? 在這些器官中 ， 病毒緩慢地繁殖和繼續(xù)存留于整個病程中 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 52 ? 幾個月后 ， 病毒進(jìn)入脊髓最后達(dá)到大腦 ，病毒在靶細(xì)胞 (神經(jīng)細(xì)胞 )中增加 ， 12～ 14周后神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)空泡形成和膠質(zhì)細(xì)胞開始肥大 ， DNA酶 、 β 葡萄糖酸酶和 N乙酰 β 氨基葡萄糖酶的活性增加 ， 19周以后出現(xiàn)臨診癥狀 。 ? 可能由于神經(jīng)系統(tǒng)的機能遭受破壞而死亡 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 53 ? 癥狀及病變 ? 自然感染的潛伏期為 1～ 5a更長 ， 因此 ，1歲半以下的羊極少出現(xiàn)臨診癥狀 。 ? 經(jīng)過潛伏期后 ， 神經(jīng)癥狀逐漸發(fā)展并漸加劇 。 病初病羊表現(xiàn)沉郁和敏感 ， 易驚 ，有癲癇癥狀 。 ? 抓提病羊時 ， 這些癥狀更易發(fā)生 ， 表現(xiàn)劇烈 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 54 ? 或表現(xiàn)過度興奮 、 抬頭 、 豎耳 、 眼凝視 ，一種特征的高抬腿的姿勢跑步 (似驢跑的僵硬步態(tài) )； ? 驅(qū)趕時常反復(fù)跌倒； ? 隨著病的進(jìn)展 ， 運動時共濟(jì)失調(diào)逐漸嚴(yán)重； ? 隨意肌 ， 特別在頭頸部發(fā)生震顫 ， 在興奮時肌肉震顫加重 ， 減輕 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 55 ? 在發(fā)展期 ， 病羊靠著柵欄 、 樹干和器具不斷摩擦其背部 、 體側(cè) 、 臀部和頭部 ， 一些患羊還用其后肢搔抓胸側(cè) 、腹側(cè)和頭部 ， 并自咬其體側(cè)和臀部皮膚 。 ? 頸部 、 體側(cè) 、 背部和薦部大面積的皮膚表面出現(xiàn)禿毛區(qū) 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 56 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 57 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 58 ? 觸摸發(fā)癢的皮膚 ， 可能反射地刺激病羊伸頸 、 擺頭 、 咬唇和舔舌 。 ? 當(dāng)視力喪失時：撞擊柵欄和器具 。 ? 后期 ， 機體衰弱 ， 出現(xiàn)昏睡或昏迷 ， 臥地不起 。 ? 整個患病期間 ， 體溫并不升高 ， 食欲雖仍保持 ， 但體重下降 。 ? 病程從幾周到幾個月 ， 甚至一年以上 ， 所有病羊終歸死亡 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 59 ? 剖檢變化 ? 除摩擦和啃咬引起的羊毛脫落及皮膚創(chuàng)傷和消瘦外 ， 內(nèi)臟常無肉眼可見的病變 。 ? 病理組織學(xué)變化： ? 特征 —— 腦干和脊髓的神經(jīng)元發(fā)生空泡變性與皺縮 ， 灰質(zhì)的海綿狀疏松 ， 星形膠質(zhì)細(xì)胞增生等 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 60 ? 神經(jīng)元的空泡形成表現(xiàn)為單個或多個的空泡出現(xiàn)在胞質(zhì)內(nèi) 。 ? 典型的空泡呈圓形或卵圓形 ， 界限明顯 ，它代表液化的胞質(zhì)團(tuán)塊 。 ? 海綿狀疏松是神經(jīng)基質(zhì)的空泡化 ， 使基質(zhì)纖維分解而形成許多小孔 。 ? 沒有發(fā)現(xiàn)病毒性腦炎的病變 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 61 ． 神經(jīng)原細(xì)胞出現(xiàn)空泡 ↖ ↖ ↖ ↗ 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 62 丘腦神經(jīng)細(xì)胞出現(xiàn)空泡 ↖ ↖ ↖ ↗ 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 63 ? 診 斷 ? 根據(jù)典型的癥狀和組織病理學(xué)變化 ，診斷并不困難 。 ? 潛伏期很長 ? 雙親中有癢病的病史 ? 不斷擦癢 ? 反射性咬唇舔舌和運動性共濟(jì)失調(diào) 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 64 ? 組織病理學(xué)檢查 ? 在丘腦和延腦可發(fā)現(xiàn)特征性病變 。 ? 但在新疫區(qū)或新發(fā)病群 ， 為確診還必須進(jìn)行有關(guān)的實驗室診斷 ， 如動物感染試驗 、PrP(上 )sc的免疫學(xué)檢測和癢病相關(guān)纖維(SAF)檢查等 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 65 ? （ 1） 病毒的生物學(xué)測定法 ? 至今尚無可供檢測朊病毒的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng) ， 只能使用動物作生物學(xué)測定 ， 小鼠和倉鼠是最常用的實驗動物 。 ? 將被檢標(biāo)本 (腦 、 脊髓 、 脾等 )勻漿作 10倍稀釋 (8～ 10)個稀釋度 (， 每稀釋度通常腦 內(nèi) 接 種 6 只 小 鼠 ( 各 30μ l) 或 倉 鼠(50μ l)。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 66 ? 接種動物每 3d檢查一次 ， 瀕死撲殺取腦作組織病理學(xué)檢查 。 ? 原代分離觀察期小鼠為一年或更久 ， 倉鼠 7～ 8個月 。 ? 最后根據(jù)動物發(fā)病和死亡數(shù)計算終點滴度(ID(下 )50和 LD(下 )50)。 ? 腦勻漿的終點滴度一般為每克腦組織 105～1011LD50。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 67 ? （ 2） PrPsc的免疫學(xué)檢測 ? PrPsc只見于人和動物的傳染性海綿狀腦病 。 健康和患其它疾病的人和動物細(xì)胞中的 PrPsc可被蛋白酶消化消除 ， 不會干擾PrPsc的檢測 。 ? 因此 ， PrPsc是 TSEs的特異診斷方法 ， 最近已被 WHO TSEs專家會議所確認(rèn) 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 68 ? 它不僅可用于死后的組織病理學(xué)檢查 ， 還可用于活檢 (腦 、 扁桃體 )作生前診斷 。 ? PrPsc雖不能使感染宿主產(chǎn)生特異抗體 ， 但作為非易感動物的兔卻可產(chǎn)生他種動物 PrPsc的抗體 ， 以此抗體對被檢材料 (腦組織 )作Southern blotting（ 固相膜斑點試驗 ） ，可檢測其中的 PrPsc 。 2022/2/3 聊城大學(xué) 農(nóng)學(xué)院 劉文強 69 ? （ 3） 癢病相關(guān)纖維 (SAF)檢查 ? SAF檢查也是 TSEs的特異診斷方法 ，在被檢材不適合作組織病理學(xué)檢查時尤為重要 。 ? 通常以冰凍保存的腦和脊