瑞舒伐他汀對(duì)乳鼠心臟成纖維細(xì)胞增殖和凋亡的影響(編輯修改稿)
2025-02-02 16:52 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ，B 溶液滴加于 A 液上面，以洗耳球輕吹液面，使兩液充分混合，染色 10 min，吸棄各孔染液，無(wú)菌 PBS 洗 3 遍，倒置顯微鏡觀察，拍照。 Hochest 33258 染色，熒光顯微鏡觀察 將無(wú)菌的蓋玻片置于 24 孔板內(nèi)，以 1 108/L 細(xì)胞接種，37℃、 5% CO2 及飽和濕度下培養(yǎng) 24 h 后，吸棄各孔培養(yǎng)基，分別加不同濃度的藥物，繼續(xù)培養(yǎng) 24 h。吸棄各孔培養(yǎng)基，無(wú)菌 PBS 洗 3遍，甲醇 /冰醋酸 (3∶ 1)于 4 ℃固定 10 min，無(wú)菌 PBS 洗 3 遍，每孔加 Hochest 33258 染液 (10 mg/L)500 Μ l，避光染色 30 min，熒光顯微鏡觀察，拍照 (激發(fā)波長(zhǎng) 340 nm，發(fā)射波長(zhǎng) 420 nm)。 流式細(xì)胞儀檢測(cè)斷裂 DNA 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 CFs，分別加不同濃度的藥物，繼續(xù)培養(yǎng) 24 h。KKME專(zhuān)業(yè)醫(yī)學(xué)搜索引擎 收集培養(yǎng)的細(xì)胞，懸浮于 4℃預(yù)冷的 70%乙醇中。檢測(cè)前用生理鹽水洗滌細(xì)胞 2 次，調(diào)整細(xì)胞濃度為 1 109/L ，取 200 Μ l 細(xì)胞懸液，加 100 Μ l 核糖核酸酶 (RNase) 37 ℃中孵育 15 min，加 200 Μ l 碘化丙啶，室溫下避光 5 min， 300 目尼龍網(wǎng)過(guò)濾后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)亞二倍體率。 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用 軟件，計(jì)量數(shù)據(jù)用 x177。 s 表示。隨機(jī)單因素方差分析 LSD 法進(jìn)行組間的兩兩比較。 2 結(jié) 果 CFs 增殖測(cè)定 對(duì) MTT 測(cè)定結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析， 105～ 107 mol/L的 Ros 與空白對(duì)照組相比，差異顯著，即 105～ 107 mol/L 的 Ros 可抑制新生大鼠 CFs 增殖。 108 mol/L 的 Ros 與空白對(duì)照組相比差異不顯著，即此濃度不能抑制新生大鼠 CFs 增殖。 105 mol/L FPP 可明顯減輕各濃度 Ros 對(duì) CFs 的抑制作用。見(jiàn)表 1。 CFs DNA 合成測(cè)定 對(duì) BrdU 測(cè)定結(jié)果進(jìn)行隨機(jī)單因素方差分析， 105～ 107 mol/L的 Ros與空白對(duì)照組相比差異顯著，即 105～ 107 mol/L的 Ros可抑制新生大鼠 CFs DNA 合成。 108 mol/L 的 Ros 與空白對(duì)照組相比，差異不顯著，即此濃度不能抑制新生大鼠 CFs DNA 合成。 105 mol/L FPP 可明顯降低各濃度 Ros 對(duì) CFs DNA 合成的抑制作用。見(jiàn)表1。表 1 Ros 對(duì) CFs 增殖和 DNA 合成的影響 (略 ) KKME專(zhuān)業(yè)醫(yī)學(xué)搜索引擎 察細(xì)胞 105 mol/L Ros 處理組的 CFs，死亡細(xì)胞數(shù)目較對(duì)照組明顯增加。 105mol/L Ros+105 mol/L FPP 組死亡細(xì)胞數(shù)目明顯減少，但仍多于對(duì)照組，即 105mol/L FPP 可部分逆轉(zhuǎn) 105mol/L Ros 作用。見(jiàn)圖 1。 Hochest 33258 染色
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