血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳(編輯修改稿)
2025-02-02 09:06 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ，平放于干凈濾紙，薄膜上再放一張干凈濾紙輕輕吸去多余的緩沖液。 3. 點(diǎn)樣 :用滴管吸取待測血清一滴于玻璃片上，用點(diǎn)樣器或?qū)? X光軟片末端處蘸取少許樣品，垂直輕印（迅速均勻）到薄膜點(diǎn)樣線上，使血清完全滲透到薄膜內(nèi)，形成一定寬度、粗徐均勻的直線。（注：點(diǎn)樣量不宜過多?。? 這是關(guān)鍵步驟，印章法加樣時(shí)，動(dòng)作應(yīng)輕、穩(wěn)，用力不能太重，以免將薄膜弄破或印出凹陷而影響電泳區(qū)帶分離效果。點(diǎn)樣前可先在濾紙上反復(fù)練習(xí)，掌握點(diǎn)樣技術(shù)后再正式點(diǎn)樣。 4. 平衡 ：將膜條無光澤面向下置于電泳槽支架上，點(diǎn)樣端靠近負(fù)極，薄膜兩端要緊貼紗布或?yàn)V紙，中間平直懸空，加蓋密封，平衡 5分鐘。 5. 電泳 ：將電泳槽正負(fù)極與電源正負(fù)極接好。開啟電源，調(diào)節(jié)電流密度為 ,如有 10條寬2cm的膜條，其總寬度為 20cm,應(yīng)使用電流強(qiáng)度為20cm*。電壓 15V/cm。通電 50分鐘左右，使電泳區(qū)帶展開 3~。關(guān)閉電源。 6. 染色 ：取下薄膜直接浸于氨基黑 10B染色液中，染色 5~10min（以蛋白帶染透為止），然后在漂洗液中漂去剩余染料，直至背景無色為止。漂洗液可回收。 （光密度計(jì)掃描法） ① 透明：吸取薄膜上的漂洗液（以防止透明液被稀釋影響透明結(jié)果），將薄膜浸入透明液中 2~3分鐘（
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1