過(guò)氧化物酶ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 19:57 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ΔA470nm /min3 mL ? = ———————————— ? mL/ 181。mol cmcm ? ΔA470nm 3 ? = ————————(μmol/min) ? ? V 反應(yīng)液體積 ( mL ) ? ε 產(chǎn)物 4—鄰甲氧基苯酚的摩爾消光系數(shù) L/ mmolcm 即 mL/ 181。molcm) ? L 比色杯光徑 (1cm) 2022/2/2 實(shí)驗(yàn)三 POD蛋白濃度測(cè)定 和比活力計(jì)算 2022/2/2 一 .實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ? Folin酚法（ Lowry法）測(cè)定 POD蛋白濃度的原理和方法 ? 2022/2/2 二 .實(shí)驗(yàn)原理 1． Folin酚法原理 Folin酚試劑由兩種試劑組成： 甲試劑：雙縮脲試劑 尿素加熱至 180℃ 左右，兩分子尿素縮合放出一分子氨，而形成雙縮脲。 2022/2/2 NH2 ╱ NH2 C = O ╱ ╲ C = O NH2 180℃ ╲ NH + NH3↑ ╱ NH2 C = O ╱ ╲ C = O NH2 ╲ NH2 2022/2/2 ? 雙縮脲在堿性溶液中與銅離子（酒石酸鉀鈉 CuSO4）絡(luò)合生成復(fù)雜的紫紅色化合物。 ? 蛋白質(zhì)分子中的肽鍵（ —CO—NH—）與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似，也有雙縮脲反應(yīng)，其顏色深淺與蛋白質(zhì)的含量成正比，因此所有蛋白質(zhì)或二肽以上的多肽都有雙縮脲反應(yīng)，可用作蛋白質(zhì)定性、定量分析。 2022/2/2 甲試劑實(shí)質(zhì)是利用蛋白質(zhì)中肽鍵反應(yīng)進(jìn)行定量測(cè)定，它與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸組成無(wú)關(guān)，即受蛋白質(zhì)氨基酸的特異性影響較少。但靈敏度較低， mg級(jí)水平， 0~10 mg/mL作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2022/2/2 乙試劑：主要起作用是磷鉬酸（磷鎢酸），它由鉬酸鈉 （鎢酸鈉）在酸性（磷酸等）作用下產(chǎn)生。 鉬酸鈉（鎢酸鈉） ∣ ↓HCl 堿性 H3PO4 + 鉬酸（鎢酸） 磷鉬酸 鉬蘭（鎢蘭）
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