過氧化物酶ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 19:57 本頁面
【文章內容簡介】 ΔA470nm /min3 mL ? = ———————————— ? mL/ 181。mol cmcm ? ΔA470nm 3 ? = ————————(μmol/min) ? ? V 反應液體積 ( mL ) ? ε 產物 4—鄰甲氧基苯酚的摩爾消光系數(shù) L/ mmolcm 即 mL/ 181。molcm) ? L 比色杯光徑 (1cm) 2022/2/2 實驗三 POD蛋白濃度測定 和比活力計算 2022/2/2 一 .實驗目的 ? Folin酚法（ Lowry法）測定 POD蛋白濃度的原理和方法 ? 2022/2/2 二 .實驗原理 1． Folin酚法原理 Folin酚試劑由兩種試劑組成： 甲試劑：雙縮脲試劑 尿素加熱至 180℃ 左右，兩分子尿素縮合放出一分子氨，而形成雙縮脲。 2022/2/2 NH2 ╱ NH2 C = O ╱ ╲ C = O NH2 180℃ ╲ NH + NH3↑ ╱ NH2 C = O ╱ ╲ C = O NH2 ╲ NH2 2022/2/2 ? 雙縮脲在堿性溶液中與銅離子（酒石酸鉀鈉 CuSO4）絡合生成復雜的紫紅色化合物。 ? 蛋白質分子中的肽鍵（ —CO—NH—）與雙縮脲結構相似，也有雙縮脲反應，其顏色深淺與蛋白質的含量成正比，因此所有蛋白質或二肽以上的多肽都有雙縮脲反應，可用作蛋白質定性、定量分析。 2022/2/2 甲試劑實質是利用蛋白質中肽鍵反應進行定量測定，它與蛋白質分子量及氨基酸組成無關，即受蛋白質氨基酸的特異性影響較少。但靈敏度較低， mg級水平， 0~10 mg/mL作標準曲線。 2022/2/2 乙試劑：主要起作用是磷鉬酸（磷鎢酸），它由鉬酸鈉 （鎢酸鈉）在酸性（磷酸等）作用下產生。 鉬酸鈉（鎢酸鈉） ∣ ↓HCl 堿性 H3PO4 + 鉬酸（鎢酸） 磷鉬酸 鉬蘭（鎢蘭）
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1