血清學(xué)反應(yīng)試驗ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 17:00 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 流產(chǎn)沙門氏菌；也可用抗原致敏炭粉，用以檢測抗體，如腺病毒感染、沙門氏菌病、大腸桿菌病、囊蟲病等的診斷。 抗原抗體反應(yīng)類型 間接凝集反應(yīng) 抗原抗體反應(yīng)類型 沉淀反應(yīng)（ precipitation reaction) 可溶性抗原（如細(xì)菌的外毒素、內(nèi)毒素、菌體裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、組織浸出液等）與相應(yīng)的抗體結(jié)合，在適量電介質(zhì)存在下，形成肉眼可見的細(xì)微的白色沉淀。 抗原抗體反應(yīng)類型 沉淀反應(yīng)（ precipitation reaction) 可溶性抗原 +相應(yīng)抗體 肉眼可見的沉淀 沉淀反應(yīng) 環(huán)狀沉淀反應(yīng) 絮狀沉淀反應(yīng) 抗原 沉淀環(huán) 抗血清 抗原抗血清混合 抗原抗體反應(yīng)類型 沉淀反應(yīng) 常用于毒素、類毒素和抗毒素的定量測定 主要用于抗原的定性試驗，如炭疽病的診斷（ Ascoli氏試驗）、鏈球菌的血清型鑒定和血跡鑒定等 沉淀反應(yīng) 沉淀反應(yīng) 凝膠擴(kuò)散試驗 ： 1%瓊脂凝膠的孔徑約 85毫微米，可允許各種抗原抗體自由擴(kuò)散。由近及遠(yuǎn)形成濃度梯度。 單向單擴(kuò)散 單向雙擴(kuò)散 抗原 抗血清 +瓊脂 抗原 瓊脂 抗血清 +瓊脂 沉淀反應(yīng) 沉淀反應(yīng) 瓊脂擴(kuò)散試驗 ： 雙向單擴(kuò)散 雙向雙擴(kuò)散 抗血清 +瓊脂 抗原 沉淀線 孔徑 3mm 抗原 待檢血清 標(biāo)準(zhǔn)陽性抗血清 單向免疫擴(kuò)散 A： Ag、 Ab濃度及擴(kuò)散率近似； B ： Ag、 Ab濃度近似，擴(kuò)散率 Ag＞ Ab ； C： Ag、 Ab濃度近似，擴(kuò)散率 Ag＜ Ab ； D： 擴(kuò)散率近似，濃度 Ag ＞ Ab ； E：濃度 Ag ＞ Ab，擴(kuò)散率 Ag ＞ Ab ； F：濃度 Ag ＜ Ab，擴(kuò)散率 Ag ＜ Ab 沉淀線形狀、位置與抗原抗體擴(kuò)散率及濃度的關(guān)系 雙向瓊脂擴(kuò)散 (1) 沉淀線吻合：待檢抗原與標(biāo)準(zhǔn)抗原完全相同 。 (2) 沉淀線相切：待檢抗原中含有與標(biāo)準(zhǔn)抗原相同的抗原 ，還含有另外的抗原與抗血清相對應(yīng) 。 (3) 沉淀線相交：待檢抗原有與抗血清對應(yīng)的抗原 ， 但和標(biāo)準(zhǔn)抗原不同 。 (4) 沉淀線部分吻合：待測抗原和標(biāo)準(zhǔn)抗原性質(zhì)相同 ， 但含量較低 。 A1：待檢抗原； A2：標(biāo)準(zhǔn)抗原 雙響瓊脂擴(kuò)散 抗體效價滴定 用梅花型孔，中間放抗原， 周圍孔放下不同稀釋度的 相應(yīng)抗體，以出現(xiàn)沉淀線 的最高稀釋倍數(shù)為該抗體 的效價。 對流免疫電泳 在 pH為 ，兩孔為一組，孔徑 3mm，抗原、抗體孔間距為 4～ 5mm。將抗原加入負(fù)極端孔內(nèi)，抗體加入正極端孔內(nèi)，用 2～ 4mA/cm電流電泳 1h左右，觀察結(jié)果，在兩孔之間出現(xiàn)沉淀帶的為陽性反應(yīng) 。 在 ，抗體球蛋白因等電點高，只帶有微弱的負(fù)電荷，而且分子又較大，因此電泳力小，小于電滲力，泳向負(fù)極；而一般抗原蛋白質(zhì)常帶較強的負(fù)電荷，分子較小，電泳力大，大于電滲力，泳向正極，電泳時抗原放負(fù)極側(cè)，抗體放正極側(cè)，抗原抗體相對泳動，一定時間后抗原和抗體將在兩孔之間相遇，在比例適當(dāng)處形成肉眼可見的沉淀線。 對流免疫電泳原理 對流免疫電泳結(jié)果判定 1為陽性 2為弱陽性 3/4為強陽性 對流電泳方法評價 簡便、快速、敏感度較雙向瓊脂擴(kuò)散試驗高8~10倍，但分辨力低于雙向瓊脂擴(kuò)散試驗。 火箭免疫電泳 (rocket immunoelectrophoresis, RIE) 火箭免疫電泳 火箭免疫電泳是單向單擴(kuò)散和電泳技術(shù)相結(jié)合的一種血清學(xué)試驗。是讓抗原在電場的作用下，在含有抗體的瓊脂中定向泳動，二者比例合適時形成類似火箭樣的沉淀峰。沉淀峰的高度與抗原的濃度成正比 。 火箭免疫操作步驟 1. 制備抗體瓊脂糖凝膠板 將已融化的 %巴比妥緩沖瓊脂糖
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