沈萍病毒ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 12:28 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 → 保 護(hù)、介導(dǎo)、抗原性 病毒的核酸 病毒核酸 單鏈 DNA（ ss DNA）； 雙鏈 DNA（ ds DNA）； 單鏈 RNA（ ss RNA）； 雙鏈 RNA（ ds RNA）； 單鏈病毒核酸可按照它的 極性 （ polarity） 或 意義（ sense） 進(jìn)行分類。 有某些病毒的 RNA是 雙意 （ ambisense）， 即部分為正極性、部分為負(fù)極性。 病毒的蛋白質(zhì) 病毒蛋白質(zhì) 結(jié)構(gòu)蛋白 非結(jié)構(gòu)蛋白 病毒基因組編碼，病毒復(fù)制過程中產(chǎn)生并具有一定功能，不結(jié)合于毒粒中的蛋白質(zhì)。 構(gòu)成一個形態(tài)成熟的有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì) 殼體蛋白； 包膜蛋白； 存在于毒粒中的酶； 病毒結(jié)構(gòu)蛋白的主要生理功能： 1） 構(gòu)成蛋白質(zhì)外殼，保護(hù)病毒核酸 免受核酸酶及其它理化因子的破壞； 2） 決定病毒感染的特異性 ，與易感細(xì)胞表面存在的受體具特異性親和力，促使病毒粒子的吸附和入侵； 3） 決定病毒的抗原性 ，能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體； 4） 構(gòu)成毒粒酶， 或參與病毒對宿主細(xì)胞的入侵（如 T4噬菌體的溶菌酶等），或參與病毒復(fù)制過程中所需要病毒大分子的合成（如逆轉(zhuǎn)錄酶等）； 第三節(jié) 病毒的復(fù)制 毒粒 宿主細(xì)胞 有繁殖性的 病毒基因組 具有感染性的毒粒消失 病毒基因組復(fù)制、表達(dá) 病毒核酸和蛋白質(zhì) 裝配形成具有感染性的毒粒 釋放至細(xì)胞外 原料； 能量； 生物合成場所； 病毒的復(fù)制： 病毒感染敏感宿主細(xì)胞后，病毒核酸進(jìn)入細(xì)胞，通過其復(fù)制與表達(dá) 產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由新合成的病毒組分 裝配 （ assembly） 成子代毒粒，并以一定方式釋放到細(xì)胞外。稱做 復(fù)制 （ replication）。 噬菌體并沒有個體的生長過程，而只有其基本成分的合成和裝配，即首先將各個部件合成出來，然后裝配，所以一般將噬菌體的繁殖稱做復(fù)制。 根據(jù)噬菌體與宿主的關(guān)系： 烈性噬菌體： 指感染宿主細(xì)胞后，能夠使宿主細(xì)胞裂解的噬菌體 . 溫和噬菌體（或溶源性噬菌體）： 噬菌體感染細(xì)胞后，將其核酸整合（附著）到宿主的核 DNA上，并且可以隨宿主 DNA的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制，在一般情況下，不引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。 一 步生長曲線 1. 實驗設(shè)計依據(jù)： 1個菌體被 1個噬菌體感染 ,避免二次吸附；細(xì)菌群體被噬菌體同步感染。 2. 實驗過程（自然裂解） : 敏感菌 10ml Phage 1ml 混勻， 5min,使之吸附 離心或用抗 phage血清處理 , 去除過量 phage 高倍稀釋 ,吸附 phage的菌懸液 (避免多次吸附 ) 37℃ 培養(yǎng) ,定時取樣 定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實驗曲線。 一、病毒的復(fù)制周期 取樣人為裂解處理（每 5min） 樣品中加入氯仿裂解細(xì)胞 2448h 裂解液加入敏感菌液中 適當(dāng)稀釋混合液 涂布于瓊脂培養(yǎng)基上 計數(shù)噬菌斑 噬菌斑 : 概念： 將少量噬菌體與大量敏感菌混合培養(yǎng)在營養(yǎng)瓊脂中，在平板表面布滿宿主細(xì)胞的菌苔上 ,可以用肉眼看到一個個透明的不長菌的小圓斑，稱為噬菌斑。 (每個噬菌斑一般是由一個噬菌體粒子形成的。 ) 應(yīng)用 : 噬菌斑可用于檢出、分離、純化噬菌體和進(jìn)行噬菌體的計數(shù)。 噬菌斑形成的過程和原理是：噬菌體侵染敏感細(xì)胞后，釋放子代噬菌體，通過培養(yǎng)基擴(kuò)散到四周細(xì)胞，繼續(xù)侵染，引起連鎖細(xì)胞裂解，從而形成形態(tài)和大小不同的空斑。 以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo) ,以噬菌斑數(shù)為縱坐標(biāo) ,繪制成的曲線為一步生長曲線。 可分以下階段： 潛伏期 裂解期 穩(wěn)定期 潛伏期： 從噬菌體吸附細(xì)菌到細(xì)菌細(xì)胞釋放 新的噬菌體之前的這段時期 .曲線平行于橫軸，噬菌體數(shù)無變化 .樣品中無游離的噬菌體。 (潛伏期前的噬菌斑數(shù)是噬菌體數(shù) ,也就是感染噬菌體的細(xì)菌數(shù) ). 裂解期： 曲線直線上升 ,子代噬菌體不斷釋放到培養(yǎng)基中 ,直到達(dá)到一個極限 . 穩(wěn)定期 :感染細(xì)胞后復(fù)制的子代噬菌體全部釋放，噬菌斑數(shù)穩(wěn)定，一次感染結(jié)束。 裂解量 :每一受感染細(xì)胞所釋放的新的噬菌體的 平均數(shù)。 穩(wěn)定期噬菌斑數(shù) 裂解量 = 潛伏期噬菌斑數(shù) 不同的噬菌體或同 種噬菌體感染敏感菌后所釋放的噬菌體數(shù)不同 ,與噬菌體種類、宿主細(xì)胞菌齡以及環(huán)境因數(shù)有關(guān)。 取培養(yǎng)
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