【文章內(nèi)容簡介】 zation, EI） 2. 化學(xué)電離（ chemical ionization, CI） 3. 場電離（ field ionization, FI） 4. 場解吸（ field desorption, FD） 5. 快原子轟擊（ fast atom bombardment, FAB） 6. 基質(zhì)輔助激光解吸電離 （ matrixassisted laser desportion ionization, MALDI） 7. 電噴霧電離（ electrospray ionization, ESI） 8. 大氣壓化學(xué)電離 （ atmospheric pressure chemical ionization, APCI） MS分類 —— 離子源 三、質(zhì)譜（ MS） 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 黃酮類化合物的 MS （ 一 ） 黃酮苷元 （ ElMS） 黃酮苷元 在電子轟擊質(zhì)譜（ ElMS） 中分子離子峰 [M]+較強(qiáng)，且為基峰。 （二）黃酮苷（ FDMS 、 FABMS、 ESIMS ） 黃酮苷 極性強(qiáng)、難氣化以及對熱不穩(wěn)定， EI 測不到分子離子峰，采用 FDMS和 FABMS、 ESIMS等軟電離質(zhì)譜技術(shù)，可獲得強(qiáng)的分子離子峰 [M]+、準(zhǔn)分子離子峰 [M+H]+、 [M+Na]+峰。峰強(qiáng)度大，且給出糖基碎片（外側(cè)糖、內(nèi)側(cè)糖）。 三、質(zhì)譜（ MS） 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 途徑 I： （ RDA裂解） 途徑 II： 兩種裂解方式相互競爭、相互制約。 （一）黃酮苷元 (ElMS) 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 1）黃酮 (ElMS) 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 化合物 A1+. B1+. 黃酮 120 102 5， 7二氫黃酮 152 102 5， 7， 439。三羥基黃酮 152 118 5， 7二羥基， 439。甲氧基黃酮 152 132 黃酮類化合物的質(zhì)譜數(shù)據(jù) （ 1）黃酮 (ElMS) 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 2）黃酮醇 (ElMS) 大多數(shù)黃酮醇苷元的分子離子峰 [M+]是基峰，裂解主要按方式 Ⅱ 進(jìn)行，得到的 B2+.、及其失去 CO而形成的 [B228]+離子具有診斷價值。 根據(jù) B2+.和分子離子之間的質(zhì)荷比之差，可以推斷黃酮醇中A環(huán)和 C環(huán)的取代情況 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 具有 2’OH或 2’OCH3的黃酮醇，易失去 OH或 OCH3形成新的五元雜環(huán)。 O R[ M 3 1 ] + ( R= CH 3 )[ M 1 7 ] + ( R= H )( R = H , o r C H 3 )M+OOO HOOO RO H（ 2）黃酮醇 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （二）黃酮苷 MS（ FD、 FAB、 ESI） 黃酮苷類化合物在 FDMS、 FABMS、 ESIMS譜可給出強(qiáng)烈的 M+及 [M+H]+。還給出糖基的某些碎片，為化合物的結(jié)構(gòu)鑒定提供了重要的信息。 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY MS小結(jié)： 黃酮苷元類化合物的兩種裂解方式： 黃酮：裂解方式 I 黃酮醇：裂解方式 II 判斷 A、 B環(huán)的取代情況： 根據(jù) A1+.、 B1+.、 B2+. 碎片離子可以判斷 A、 B環(huán)上 OH的取代； B2+與 M+的 m/z差可知 A、 C環(huán)的取代。 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY NMR是由磁性核受幅射而發(fā)生躍遷所形成的吸收光譜 。 研究最多 、 應(yīng)用最廣的是 1H核和 13C核的 NMR ?氫譜 （ 1HNMR） ?碳譜 （ 13CNMR） 四、核磁共振譜 (NMR) 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 四、核磁共振 — 氫譜（ 1HNMR） ① 化學(xué)位移 δ （ Chemical shift,）： 用于判斷 H的化學(xué)環(huán)境和磁環(huán)境 可提供的結(jié)構(gòu)信息 ② 1H核 自旋裂分及偶合常數(shù) J (Hz) (Coupling constant)： 用于判斷 H與 H的關(guān)系 ③ 積分面積： 用于確定 H個數(shù) 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 常見質(zhì)子的化學(xué)位移 (ppm)： 烷氫： RCH3， R2CH2， R3CH， 烯氫： C=CH， 芳?xì)洌?ArH， 醇： HOCH， ； HOCH， 酸： HOOCCH， ； HOOCCH， 羰基： O=CCH， 醛基： RCHO， 910 酚： ArOH， 四、核磁共振譜 (1H NMR) 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 偶合常數(shù)： 偕偶 （ Jgem） :sp3 J=10~16Hz sp2 C=CH2 J=0~3Hz N=CH2 J=~17Hz 鄰偶 （ Jvic） :烯型： Jcis=6~12Hz Jtrans=12~18Hz 芳環(huán)： J=6~9Hz Jae=2~6Hz Jaa=8~13Hz Jee=2~8Hz 遠(yuǎn)程偶合： 苯環(huán) Jm=1~3Hz Jp=0~1Hz 四、核磁共振譜 (1H NMR) C CH HHH6 1 2 H z0 3 H z1 2 1 8 H zHHHHHH169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類化合物的 1H NMR 黃酮中的主要氫質(zhì)子： 1. A環(huán)質(zhì)子 2. B環(huán)質(zhì)子 3. C環(huán)質(zhì)子 4. 糖基上的質(zhì)子 5. 取代基上的質(zhì)子 OOOOH OO HH OH OO HO HO C H 3A CB169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 1. A環(huán)質(zhì)子 （ 1） 5,7二羥基黃酮 δH6 （ d， J6,8=） δH8 （ d， J8,6=） ?δH6 δH8， H6較 H8高場 ?7羥基苷化后 H6和 H8信號均向低場移動 A （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類化合物的 1H NMR OOH OO HO H槲 皮 素O HO H H6 H8 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (2) 7羥基黃酮 δH5 （ d， J5,6=9) δH6 （ dd,J6,5=9,J6,8=） δH8 （ d,J8,6=） H5較 H H8低場，是由于羰基的去屏蔽效應(yīng)的影響。 H H8較 5, 7二 OH黃酮低場，且相互位置可能顛倒。 A （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 5 39。6 39。3 39。2 39。O RB （一）黃酮類化合物的 1H NMR (1) 4’氧化黃酮 δH2’,6’ （ d, J=） δH3’,5’ （ d, J=） δH3’, 5’δH2’, 6’ 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類化合物的 1H NMR OO HH OO HO HH2’, 6’ H3’, 5’ 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (2) 3’,4’二氧化黃酮： δH6’ （ dd， J6’,5’=； J6’,2’=） δH2’ （ d， J2’,6’=） δH5’ （ d， J5’,6’=） 5 39。6 39。2 39。O RO RB （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類化合物的 1H NMR OOH OO HO H槲 皮 素O HO H H2’ H5’ H6’ 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (3) 3’,4’,5’三氧化黃酮： 若 R1=R2=R3=H，則 H2’,6’為單峰， ? 若上述條件不成立，則 H2’,6’分別為二重峰（ J=2Hz） 6 39。2 39。O R 2O R 1O R 3B （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 3. C環(huán)質(zhì)子 (1) 黃酮 δH3 （ s） （ 易與 H H8混 ， 但峰形不同 ， 單峰 ） H 3 , ? ? 6 . 33OHOC （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (2) 異黃酮 32OOH? H2位于羰基 ?位 ， 受羰基去屏蔽作用 ， 且通過碳與氧相連 ， 故較一般芳香質(zhì)子低場 ， 。 C δH2 （ s） （一）黃酮類化合物的 1H N