【正文】 ，上層， BAW ）、 tBuOHHOAcH2O（ 3： 1： 1， TBA ） 、水飽和正丁醇 等 正相，極性小的化合物 Rf值大。 適合黃酮苷 。 第二向：水性展開(kāi)劑 2％乙酸 黃酮苷元 黃酮苷 一、紙色譜（ PC） 169。 展開(kāi)劑：極性強(qiáng)，大多含醇、酸或水。 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 一、紫外光譜（ UV） 類(lèi)型： ζζ* 150nm n ζ* 150 ～ 250nm (N,O) ππ* 160 ～ 200nm (非共軛 ) n π* 280 ～ 300nm 常見(jiàn)化合物 共軛烯烴 ： ππ*， 210 ～ 270nm， K帶， ε≥104 α,β不飽和醛酮 ： nπ*， 290 ～ 310nm， R帶， ε=10100 169。 增色效應(yīng) ：溶劑或助色團(tuán)影響，吸收強(qiáng)度增大的效應(yīng)。 肩峰 ：吸收曲線在下降或上升處有停頓或增加或降低。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY OO苯 甲 酰 基 I I2 4 0 2 8 0 n m桂 皮 酰 基 I3 0 0 4 0 0 n mABCOO－ABC＋OO－ABC＋? 判斷黃酮類(lèi)型 (峰位、吸收強(qiáng)度 ) 黃酮（醇）：帶 Ⅰ 、帶 Ⅱ 二氫黃酮、異黃酮： 帶 Ⅰ 弱， 帶 Ⅱ 強(qiáng) 查耳酮、橙酮 ：帶 Ⅰ 強(qiáng)， 帶 Ⅱ 弱 一、紫外光譜（ UV） OOH OO HH OOOH OO HH OOOH OO HH OOOO HH OO HH OO HOO HH OH OO HOC HOH OOH OH OO － r h a+O H169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 帶 Ⅱ （ nm） 帶 Ⅰ （ nm） 黃 酮 類(lèi) 型 250～ 280 304～ 350 黃 酮 250～ 280 328～ 357 黃酮醇（ 3O苷） 250～ 280 358～ 385 黃酮醇（ 3OH游離） （一） 黃酮、黃酮醇類(lèi) UV光譜 ? 黃酮（醇） 在甲醇中的 UV光譜特征 OOO HH OO HOOO HH OO HO H169。 A環(huán) ： 7OH、 OCH3， Ⅱ 紅移 5OH， Ⅰ 、 Ⅱ 均紅移 B環(huán) ： 4’OH或 OCH 3OH， Ⅰ 紅移 若有鄰二酚 OH，會(huì)使帶 Ⅱ 歧分，出現(xiàn)肩峰。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY ? 利用診斷試劑對(duì)黃酮（醇） UV光譜的影響檢出羥基位置 1. 甲醇鈉（ NaOMe） 2. 乙酸鈉（ NaOAc ） /硼酸（ NaOAc/H3BO3 ） 4. 三氯化鋁及三氯化鋁 /鹽酸（ AlCl3 與 AlCl3/HCl ） （一） 黃酮、黃酮醇類(lèi) 169。 （ 確定 4’OH ） OOH OO HO HO HO H169。 （ 3）存在堿敏感結(jié)構(gòu)時(shí)，如含 3,4’、 3,3’,4’、 5,6, 5,7,8 OH的黃酮類(lèi)，吸收帶隨測(cè)定時(shí)間延長(zhǎng)而衰退。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 4. 三氯化鋁及三氯化鋁 /鹽酸（ AlCl3 與 AlCl3/HCl ） 鋁鹽可與 5OH,4C=O、 3OH,4C=O、鄰二酚 OH絡(luò)合，紅移；若絡(luò)合物不穩(wěn)定，加酸分解。 （一） 黃酮、黃酮醇類(lèi) （確定 3OH、 5OH 、 鄰二酚 OH ） 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 帶 Ⅱ （ nm） 帶 Ⅰ （ nm） 類(lèi) 型 245～ 270 310～ 330（肩峰） 異 黃 酮 270～ 295 300～ 330（肩峰） 二氫黃酮（醇） （二）異 黃酮、二氫黃酮（醇）類(lèi) UV 加入診斷試劑 ： 同黃酮，但診斷試劑僅影響帶 Ⅱ ，即 A環(huán)。 解析 ： 由（ 1）知，存在堿敏感基團(tuán)，如 3,4’OH、 3,3’,4’OH、5,6,7OH、 5,7,8OH、 5,3’,4’OH，但 3’OCH3，故可能是3,4’OH、 5,6,7OH、 5,7,8OH。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 已知含 1個(gè)葡萄糖的黃酮苷，苷元是槲皮素，確定 glc的連接位置。 練習(xí) 3： UV 苷 II I MeOH 268 333 NaOMe 269 386 NaOAc 267 387 NaOAc/H3BO3 267 340 UV苷元 II I MeOH 267 336 NaOMe 275 392 NaOAc 274 376 NaOAc/H3BO3 268 338 黃酮或黃酮醇苷 帶 I紅移 53nm，有 4’OH 帶 II 無(wú)紅移，無(wú) 7OH A、 B環(huán)上無(wú)鄰二酚 OH 黃酮 帶 I紅移 56nm，有 4’OH 帶 II紅移 7nm ，有 7OH A、 B環(huán)上無(wú)鄰二酚 OH 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 4000 400 1500 － O－ H － N－ H ① 3600～ 3200 ③ 3000～ 2700 － C－ H(飽和 ) O＝ C－ H ⑤ 1850～ 1550 C＝ O ＞ 1700(孤立 ) ＜ 1700(共軛 ) ② 3300～ 3000 ＝ C－ H ≡C－ H ④ ≈2200 C≡N C≡C ⑥ 1600～ 1450(多峰 ) 苯環(huán) 主要官能團(tuán) IR特征吸收 169。 質(zhì)荷比 ：離子的質(zhì)量與所帶電荷之比，用 m/z表示。 準(zhǔn)分子離子 ：比分子量多（或少） 1質(zhì)量單位的離子。 （二）黃酮苷（ FDMS 、 FABMS、 ESIMS ） 黃酮苷 極性強(qiáng)、難氣化以及對(duì)熱不穩(wěn)定， EI 測(cè)不到分子離子峰，采用 FDMS和 FABMS、 ESIMS等軟電離質(zhì)譜技術(shù)，可獲得強(qiáng)的分子離子峰 [M]+、準(zhǔn)分子離子峰 [M+H]+、 [M+Na]+峰。 （一）黃酮苷元 (ElMS) 169。甲氧基黃酮 152 132 黃酮類(lèi)化合物的質(zhì)譜數(shù)據(jù) （ 1）黃酮 (ElMS) 169。 O R[ M 3 1 ] + ( R= CH 3 )[ M 1 7 ] + ( R= H )( R = H , o r C H 3 )M+OOO HOOO RO H（ 2）黃酮醇 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY MS小結(jié)： 黃酮苷元類(lèi)化合物的兩種裂解方式： 黃酮：裂解方式 I 黃酮醇：裂解方式 II 判斷 A、 B環(huán)的取代情況： 根據(jù) A1+.、 B1+.、 B2+. 碎片離子可以判斷 A、 B環(huán)上 OH的取代； B2+與 M+的 m/z差可知 A、 C環(huán)的取代。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 四、核磁共振 — 氫譜（ 1HNMR） ① 化學(xué)位移 δ （ Chemical shift,）： 用于判斷 H的化學(xué)環(huán)境和磁環(huán)境 可提供的結(jié)構(gòu)信息 ② 1H核 自旋裂分及偶合常數(shù) J (Hz) (Coupling constant)： 用于判斷 H與 H的關(guān)系 ③ 積分面積： 用于確定 H個(gè)數(shù) 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 1. A環(huán)質(zhì)子 （ 1） 5,7二羥基黃酮 δH6 （ d， J6,8=） δH8 （ d， J8,6=） ?δH6 δH8， H6較 H8高場(chǎng) ?7羥基苷化后 H6和 H8信號(hào)均向低場(chǎng)移動(dòng) A （一）黃酮類(lèi)化合物的 1H NMR 169。 A （一）黃酮類(lèi)化合物的 1H NMR 169。3 39。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (2) 3’,4’二氧化黃酮： δH6’ （ dd， J6’,5’=； J6’,2’=） δH2’ （ d， J2’,6’=） δH5’ （ d， J5’,6’=） 5 39。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類(lèi)化合物的 1H NMR OOH OO HO H槲 皮 素O HO H H2’ H5’ H6’ 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （一）黃酮類(lèi)化合物的 1H NMR 169。 C δH2 （ s） （一）黃酮類(lèi)化合物的 1H NMR 169。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 4） 二氫黃酮醇 H2與 H3為反式雙直立鍵， J=11Hz，雙重峰 H2 δ H3 δ 3OR苷化，供電子能力下降，兩個(gè)氫的向低場(chǎng)位移。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 6） 橙酮： （一）黃酮類(lèi)化合物的 1H NMR 169。H aC 2 39。aeJ a a = 6 9 H zC 3 39。3 39。1 39。2022 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 1） 雙糖苷： 末端糖