【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 H O O C CO O H L L L L L L L L + + + + + + + + + + + + N H 2 N H 2 + + N H 2 N H 2 亮氨酸拉鏈 螺旋環(huán)螺旋 (H L H ) 5． 同源異形結(jié)構(gòu)域 （ Homeodomains， HD） 是一種編碼 60aa的序列 ， 長(zhǎng) 180bp， 它存在于很多控制果蠅早期發(fā)育基因中 ， 在高等生物中也發(fā)現(xiàn)了相關(guān)基序 。 HD的 C端區(qū)域和原核阻遏蛋白的 HTH同源 ， 但也有幾點(diǎn)不同 : （ 1） HD的 C端由 3個(gè) α螺旋構(gòu)成 ， 螺旋 3結(jié)合于大溝 ， 長(zhǎng) 17aa；而阻遏蛋白由 5個(gè) α螺旋構(gòu)成 ， 螺旋3長(zhǎng)僅 9個(gè) aa； （ 2） 原核的 HTH的以二聚體形式與 DNA結(jié)合 ， 靶序列是回文結(jié)構(gòu) ， 而 HD是以單體形式與 DNA結(jié)合 ， 靶序列不是回文結(jié)構(gòu)； （ 3） HD N端的臂位于小溝 ， 而 HTH螺旋 1的末端與 DNA的背面接觸 。 （ 二 ） 蛋白質(zhì)和配基的結(jié)合 甾類受體蛋白一般都具有 3個(gè)不同的功能區(qū)： （ 1） N端區(qū)是激活轉(zhuǎn)錄所需的區(qū)域 ， 不 同受體之間此區(qū)的同一性僅小于 15%； （ 2） DNA結(jié)合及轉(zhuǎn)錄活化區(qū) ， 同一性較高為 9442%； （ 3） C端的激素結(jié)合和二聚體形成區(qū) ， 同一性為 5715%。 N 端區(qū) D N A 結(jié)合 甾類結(jié)合和 激活轉(zhuǎn)錄所需 和轉(zhuǎn)錄激活 二聚體形成區(qū) 1 1 7 7 2 6 2 4 2 8 4 9 0 5 3 2 6 9 7 圖 1 8 5 2 糖皮質(zhì)激素受體三個(gè)功能區(qū)的分布 甾類激素 細(xì)胞質(zhì) 受體 核 GE R / 增強(qiáng)子 啟動(dòng)子 轉(zhuǎn)錄 激活 圖 1 8 5 1 糖皮質(zhì)激素與受體結(jié)合后進(jìn)入核內(nèi)和增強(qiáng)子結(jié)合 激活糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)基因的啟動(dòng)子，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄 (二 ) 蛋白質(zhì)之間的相互作用 酵母半乳糖代謝中 GAL80和 GAL4的相互作用： 酵母半乳糖代謝調(diào)控和 gal操縱中的調(diào)控形式是 完全不同的： （ 1） 被調(diào)節(jié)的基因多位于不同的染色體上； （ 2） 負(fù)調(diào)節(jié)蛋白 GAL80不直接和 DNA結(jié)合 ， 而是和 GAL4結(jié)合 ， 占據(jù)其功能域來(lái)阻遏轉(zhuǎn)錄的； （ 3） 作為正調(diào)節(jié)因子不僅需要半乳糖作為誘導(dǎo)物 ，還需要 GAL4蛋白作為轉(zhuǎn)錄因子 ， 它不是像原核中的正調(diào)節(jié)蛋白僅和操縱子中的操縱基因結(jié)合 ， 使整個(gè)基因簇得以轉(zhuǎn)錄 ， 而是分別和各個(gè)被調(diào)節(jié)基因上游元件 UAS結(jié)合 ， 促進(jìn)轉(zhuǎn)錄 。 D G al ga l 80 細(xì)胞核 細(xì)胞質(zhì) GAL 80 基因 5 g a l 4 抑 誘導(dǎo)物 D － G al 蜜二糖 c 半乳糖苷酶 G A L 4 制 A T P 基因 1 A D P 半乳糖 苷酶 g a l 7 1 0 1 D － G － 1 － P 激 U D P － G l u 基因 7 G l u 1 P 半乳糖轉(zhuǎn)移 酶 g a l 2 活 U D PD G al g a l 5 基因 10 表面異構(gòu)酶 g a l 3 UDP － D － G 圖 1 8 5 3 酵母半如糖代謝途徑及其調(diào)控 圖例： ：激活； ：抑制 G A L 8 0 結(jié)合區(qū) D N A 二聚體 結(jié)合區(qū) 形成區(qū) 激活區(qū) 激活區(qū) 1 6 5 9 4 1 4 8 1 9 6 7 6 8 8 5 1 8 8 1 圖 1 8 5 4 G A L 4 結(jié)合功能區(qū)的分布 半乳糖缺乏 半乳糖存在 Ga l G A L 8 0 G A L 4 轉(zhuǎn)錄激活區(qū) DN A 結(jié)合區(qū) UA SG UA SG GA L 4 ：二聚體結(jié)合于 UA SG 上 GA L 4 ：二聚體結(jié)合于 UA SG 上 GA L 8 0 結(jié)合于 GA L 4 上 GA L 8 0 和 G a l 結(jié)合而解離 Ga l 基因不轉(zhuǎn)錄 G A L 4 激活 Ga l 基因轉(zhuǎn)錄 圖 1 8 2 5 酵母 g a l 基因激活模型 激活區(qū) D N A 結(jié)合區(qū) 轉(zhuǎn)錄因子 5 ’ 調(diào)控位點(diǎn) 啟動(dòng)子 結(jié)構(gòu)基因 待測(cè)蛋白 ？ 報(bào)告基因第六節(jié) 轉(zhuǎn)錄起始和加工的調(diào)節(jié) ? 一 . 轉(zhuǎn)錄起始的選擇 ? 酵母蔗糖酶基因 ， 有 6個(gè)基因 （ Suc1~5,7）位于不同的染色體上 。 每一個(gè)基因都可以轉(zhuǎn)錄合成蔗糖