抗原抗體反應(yīng)的應(yīng)用(編輯修改稿)
2025-06-18 02:15 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 或抗體 ， 而結(jié)合的抗原或抗體上被標(biāo)記的酶仍保持活性 ， 催化底物形成有色產(chǎn)物 。 (2) 測(cè)試方法：可目測(cè)或用分光光度計(jì)比色進(jìn)行定性或定量檢測(cè) 。 (3) 測(cè)試過程 ? 使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性 （固相抗原／抗體的形成） ? 在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng) （抗原抗體反應(yīng)） ? 用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。 （酶標(biāo)抗原抗體復(fù)合物的分離） ? 加入底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。 （顯色反應(yīng)） 酶 來(lái)源 底物 檢測(cè)波長(zhǎng) /nm 堿性磷酸酶 牛小腸黏膜 對(duì)硝基酚磷酸鹽 405 過氧化物酶 辣根 鄰苯二胺 /過氧化氫 492 β 半乳糖酶 大腸桿菌 對(duì)硝基酚 β 半乳糖 405 常用標(biāo)記的酶及其底物 (4) ELISA技術(shù)類型 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體，在這種測(cè)定方法中有 3種必要的試劑： ? 固相的抗原或抗體， ? 酶標(biāo)記的抗原或抗體， ? 酶作用的底物。 ① 雙抗體夾心法 (直接夾心法） 特點(diǎn)： ? 非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng) ? 常用于抗原的檢測(cè) ? 適用于分子中具有至少兩個(gè)抗原決定簇的多價(jià)抗原，而不能用于小分子半抗原的檢測(cè) ? 所用兩種抗體分別針對(duì)同一個(gè)抗原分子的不同抗原決定簇 ② 間接法 ③ 捕獲法（反向間接法） ? 主要用于血清中某種抗體亞型成分（如IgM）的測(cè)定。 ④ 直接法 用酶標(biāo)記的抗原或抗體直接檢測(cè)包被在酶標(biāo)板上的抗體或抗原，其量與產(chǎn)物顏色成正比。 均相酶免疫吸附測(cè)定 基本原理：利用酶標(biāo)抗體結(jié)合抗原形成復(fù)合物后，標(biāo)記酶的活性發(fā)生改變的原理，在不將復(fù)合物與游離酶標(biāo)抗體分離的情況下，直接測(cè)定系統(tǒng)中總的標(biāo)記酶活性的改變，進(jìn)而推算出待檢樣品中的抗原量。 主要用于 小分子抗原 或 半抗原 的檢測(cè) . 酶放大免疫測(cè)定技術(shù) : （ enzymemult
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