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正文內(nèi)容

silac定量蛋白質(zhì)組學技術(shù)簡介(編輯修改稿)

2025-06-15 17:10 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 濾, 4度保存?zhèn)溆?。根?jù)實驗的需要,可以配制“中”型和“重”型培養(yǎng)基。 輝駿生物: 免費服務熱線: 4006991663 :細胞標記與測試 標記: 一般細胞經(jīng)過添加同位素的培養(yǎng)基傳代培養(yǎng) 56代后,一天或 2天傳代一次,細胞中蛋白質(zhì)的 Lys和 Arg將被同位素氨基酸取代。添加了穩(wěn)定同位素(“中”或“重”型)的細胞與“輕”型細胞相比細胞生長速度可能偏慢,這是由于透析血清與中缺乏一些鹽成分,可以讓透析血清在 PBS里面透析,透析膜的孔徑一般為10KDa. 標記測試: 在進行正式實驗之前,需要對細胞進行標記測試,測試細胞中蛋白質(zhì)的 Lys和(或) Arg是否被相應的同位素氨基酸取代。收取 蛋白質(zhì)后,等量混合, SDSPAGE分離, LCMS/MS檢測。 輝駿生物: 免費服務熱線: 4006991663 :細胞標記與測試 細胞經(jīng)過傳代培養(yǎng) 7天后,同一肽段被“重”型肽段取代 輝駿生物: 免費服務熱線: 4006991663 : 實驗處理 當標記測試檢測到蛋白質(zhì)已被同位素氨基酸標記后,可以進行細胞處理,如藥物處理,病毒處理等。 輝駿生物: 免費服務熱線: 4006991663 :蛋白質(zhì)分離與質(zhì)譜分析 ? ( 1):提取“輕”型”,“中”型,“重”型細胞蛋白質(zhì),等量混合, SDSPAGE分離,染
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