蛋白質(zhì)與氨基酸的測定(編輯修改稿)
2025-06-15 09:21 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 凱氏常量定氮法： 操作步驟 準(zhǔn)確稱取樣品中 → 于 500ml凱氏瓶中 → 加 10g無水 K2SO4→ 加 →加 20ml H2SO4→ 在通風(fēng)櫥中先以小火加熱，待泡沫消失后，加大火力，消化至透明無黑粒后，將瓶子搖動一下使瓶壁炭粒溶于硫酸中→ 繼續(xù)消化 30分鐘 → 至到樣液呈綠色狀態(tài)，停止消化，冷卻 → 加 200ml水 → 連接蒸餾裝置→ 用硼酸作吸收液 → 在 K氏瓶中加波動珠數(shù)粒和 80ml50% NaOH→ 立即接好定氮球 → 加熱 →至到 K氏瓶內(nèi)殘液減少到三分之一時，取出用水沖洗 → 用 HCl滴定。 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 凱氏常量定氮法： 計(jì)算： 總氮量 %= 100 pro%=總氮 % K 乳制品 K=（ N=%） 小麥粉 K=（ N=%） 動物膠 K=（ N=%） 冰蛋 K=（ N=%） 大豆制品 K=（ %） K= （ N=16%） K換稱等數(shù) 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 凱氏常量定氮法： N（ V2V1） W 各種試劑的作用 （ 1） 濃 H2SO4： A： 脫水使有機(jī)物炭化 ， 然后有機(jī)物炭化生成碳 ， 碳將 H2SO4還原為 SO2， 本身則變?yōu)?CO2 B： 氧化 C： pro與濃 H2SO4生成 NH3↑ ， CO2， SO2，H2O↑ D： NH3與 H2SO4生成硫酸銨 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 （ 2） CuSO4的作用 （ 催化劑 ） CuSO4為紅色沉淀 ， 當(dāng) C完全消化后 ， 反應(yīng)停止 ， 紅色消失 ， 變?yōu)樘m色 ， 即為消化達(dá)到完全 ， 蘭色為 CuSO4的顏色 （ 3） K2SO4的作用 （ 提高沸點(diǎn) ） 沸點(diǎn)由 330℃ 提高到 400℃ 加速了反應(yīng)過程 。 （ 4） 硒粉和過氧化氫 ， 氧化汞都為催化劑 ，但為了防止污染通常采用硫酸銅 (5)50%NaOH的作用 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 各種試劑的作用 下面我就針對幾點(diǎn)來說明為何影響氨化完全和速度快的因素 （ 1） K氏燒瓶和取樣量 如果稱 1g以上的樣品 ， 就需要 K氏燒瓶最小 500ml， 800~1000ml的更好 ， 這樣的 K氏燒瓶對于縮短氨化時間 ， 加熱的均勻性和完全氨化效果最好 。 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 （ 2） 分解劑 ① H2SO4和 K2SO4的添加量 有機(jī)無分解需要 H2SO4量 ， H2SO4應(yīng)根據(jù)有機(jī)物種類不同而加的量就不同 ， 如果試樣含脂類高 ， 則加 H2SO4多 ， 為了提高分解溫度 ，要大量添加 K2SO4， 但不能太多 ， 也不能太少 ，太少則氨化不充分 。 K2SO4和 H2SO4的添加比例是： 1g樣品 K2SO4： H2SO4=7g： 12ml 這種比例在國內(nèi)外都使用 ， 是公認(rèn)的 還有一種比例： K2SO4： H2SO4=10： 20ml 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 ② 催化劑 用作催化劑的有 Hg、 HgO、 Se， 硒化合物 ， CuSO TiO2， 對 Hg， HgO有毒但結(jié)果好 ，Se與 CuSO4得到結(jié)果是一種 ， TiO2， 的結(jié)果偏低 ， 采用不同的催化劑則消化時間不同 ， HgO消化麥子為 38， Se與 CuSO4消化麥子 55，TiO2消化麥子 70， 所以在給出測定結(jié)果時要注明催化劑的類型 。 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的測定方法 一、 凱氏定氮法 （ 2）分解劑 （ 3） 熱源的強(qiáng)度 消化時熱源的強(qiáng)度同迅速消化和完全氨化關(guān)系很大 ， 即便鹽類 K2SO4加得多 ， 如果熱源弱 ， 也是沒有意義的 ， 熱源過強(qiáng)導(dǎo)致 H2SO4損失 ，
法律信息相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1