【文章內(nèi)容簡介】 茶 皂甙 可以引起血清蛋白的大幅度降低，但并不影響血細(xì)胞。因此，以油茶 皂甙 為主要原料研制的植物殺蟲劑對(duì)人畜無害，對(duì)植物安全，具有推廣前景 [16]。 油茶 皂甙 在 醫(yī)藥上的應(yīng)用 油茶 皂甙 具有較好的抗真菌、抗炎和擴(kuò)張血管的作用，通過體外抗真菌試驗(yàn)表明，油茶 皂甙 對(duì)皮膚常見致病真菌都有明顯的抑制作用，其中對(duì)白色念球菌抑制作用最強(qiáng)，可用其配制天然癬藥 [17]。同時(shí)，油茶 皂甙 具有消炎、祛痰、健胃和抗炎等藥理作 用，能刺激人體氣管粘膜，增加分泌，不但具有止咳祛痰之功效，還可以作為利尿劑 [18]。最近研究還表明，油茶 皂甙 具有抗突變、抗放射輻射和抗癌作用 [1920]，還可以影響釘螺生殖腺及肝臟 [21]，可以殺滅血吸蟲卵，體外有殺精子等作用 [22]。 皂甙 用作生物試劑 北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 6 精制的油茶 皂甙 各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到生物實(shí)驗(yàn) (BR)標(biāo)準(zhǔn)，可應(yīng)用于生物研究 [23]。 油茶皂素 在食品工業(yè)中的應(yīng)用 茶皂素在食品工業(yè)上，因其具有較強(qiáng)的吸收二氧化碳的特性，可用在清涼飲料上如汽水和啤酒中作助泡劑。 由上可知，油茶 皂甙 是一種非離 子型的表面活性劑，其來源于天然，刺激性小，去污能力強(qiáng)，本身又具有抑菌的作用，因此，作為人體的洗滌用品和高級(jí)衣料的洗滌用品很合適，這與人們生活水平的提高，在吃、穿、用諸方面返樸歸真，回歸大自然的消費(fèi)心理和消費(fèi)要求又是十分吻合的。而這類產(chǎn)品開發(fā)的關(guān)鍵是必須有高質(zhì)量的 皂甙 產(chǎn)品，即所得 皂甙 純度要高，色澤要淺，無不良?xì)馕兜取? 油茶 皂甙 的提取 目前 ， 從油茶餅中提取茶 皂甙 的方法主要有兩種 :一種是水提法，即用熱水多次浸泡脫脂后的餅渣，然后過濾、濃縮、 干 燥，得到深揭色的 皂甙 。該方法雖然提取劑易得，價(jià)廉且安全，但產(chǎn)品 色澤、質(zhì)量性能較差，這主要是因?yàn)椴栾炂芍泻休^高量的淀粉和糖分，熱水浸泡時(shí)，淀粉、糖分等被浸出，造成淀粉糊化，形成一種膠狀粘稠物，使得過濾十分困難，從而影響了茶 皂甙 提取物的純度和色澤，使其用途受到了一定的限制 :另一種是有機(jī)溶劑法，用此方法，產(chǎn)品純度雖有提高，但提取劑消耗多，成本較高，工藝也較復(fù)雜。實(shí)驗(yàn)證明，用 70%左右的乙醇 (甲醇 )回流，提取效率較高，雜質(zhì)含量較少，是較好的溶劑提取條件 [24]。 本試驗(yàn)是應(yīng)用超聲波的破碎原理，提高了 皂甙 的提取率，而且這種方法具有提取成本低、提取時(shí)間短、操作簡便等特點(diǎn)。 油茶 皂甙 的純化 油茶 皂甙 色澤深、氣味刺鼻、含量低，是限制其開發(fā)利用的主要質(zhì)量原因，有報(bào)道顯示：氣味并不是 皂甙 所固有的，完全可以除去。顯然，采用合適的純化方法用于生產(chǎn)意義重大。經(jīng)典的純化方法往往需要多次工序“對(duì)癥下藥”，例如針對(duì) 皂甙 的脫色大多采用 H2O2 氧化破壞色素、離子交換樹脂或二者相結(jié)合的方法等。 皂甙 的純化，常見的有醇一醚沉淀法、正丁醇萃取法、硅膠或聚酰胺柱層析法、明礬、殼聚糖等絮凝劑法和離子交換樹脂法等。 正丁醇萃取法： 將粗皂甙用少量水溶解， 水 溶液用正丁醇萃取，即可得到正丁醇層，濃縮至干 ，得到棕紅北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 7 色粘稠固體。此法得到的皂甙顏色太深，且雜質(zhì)較多 ： 將粗皂甙加入熱乙醇中，溶后過濾，重復(fù)操作 2— 3次，合并濾液后加入鹽酸，放置冷卻使其結(jié)晶析出，如果顏色不合要求，再用乙醇重結(jié)晶，即可得到高純度的茶皂甙。但此法油荼皂甙得率較低，且不適用于工業(yè)生產(chǎn)。 ： 在粗皂甙的水溶液中，加入新煅制的氧化鎂粉，然后向蒸發(fā)至干的粉末中加入乙醇，使吸附在氧化鎂上的皂甙溶解出來，放冷后，皂甙析出，得到純品，得率大約為粗皂甙的 50%，且純度不高。 ： 將粗皂甙進(jìn)行聚 酰胺柱層析，分別用水，不同濃度的乙醇水溶液依次洗脫，在某一合適濃度即可得到皂甙組分。此法得到的皂甙純度不高，且聚酰胺柱回收不易，不適合工業(yè)生產(chǎn) 。 ： 硅膠柱采用干法上柱，干法上樣 。 用 飽和的正丁醇洗脫，收集皂甙部分，直至洗脫液在薄層上無皂甙點(diǎn)出現(xiàn)，減壓濃縮至干，得純化皂甙。干法裝柱既可以省時(shí)，也可以節(jié)約溶劑．而且干柱在分離條件上更接近薄層層析，這樣就更容易找到合適的分離條件，此方法得到的皂甙較好，但不適用于工業(yè)生產(chǎn)。 ： 將粗皂甙利用離子交換樹脂可去除濾液中的可溶性 鹽類。陰、陽離子交換樹脂的型號(hào)，可選用磺酸型陽離子交換樹脂 (732型 )和季銨鹽型陰離子交換樹脂 (717型 )。此方法純化效果不佳，可與其它方法配合使用。 ： 本法是采用絮凝劑對(duì)水提取液的雜質(zhì)進(jìn)行沉淀，沉淀劑主要有兩類：一類為沉淀雜質(zhì)，另一類為沉淀油茶皂甙。第一類沉淀劑主要有：乙醇，硫酸鋁鉀，聚丙烯乙酰胺 (PAM)，聚三氯化鐵 (PAC)以及硫酸鋁鉀 (活性三氯化鐵 )+可溶性甲殼素等；第二類沉淀劑主要有鉛鹽，丙酮，明礬，乙醚等。據(jù)報(bào)道，用硫酸鋁鉀 (活性三氯化鐵 )+可溶 性 甲殼素的方法，沉淀速度快，對(duì)北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 8 皂甙無影響，價(jià)格便宜，和用乙醇處理過的濾液效果相當(dāng)，且比乙醇更安全，效果更好。如能找到合適的絮凝劑，則此法適合于工業(yè)生產(chǎn)。 ： 此技術(shù)是在水提技術(shù)的基礎(chǔ)上，使用超濾膜分離技術(shù)，通過水溶液中物質(zhì)分子量的差別而使糖類、鹽類、色素等雜質(zhì)被分離除去，從而達(dá)到濃縮、精制及脫色的目的 。 其基本工藝路線如下：粗皂甙 → 一級(jí)分離 → 二級(jí)分離 → 脫色 → 干 燥 → 精制皂甙 據(jù)報(bào)道，此法提取的皂甙的得率高，一般在 90%左右，且工藝路線由于不使用有機(jī)溶劑，大大降低了生產(chǎn)投資和運(yùn)行成本，并提高了生產(chǎn)的安全性。精制皂甙具有理想 的色澤，有利于產(chǎn)品的進(jìn)一步開發(fā)，故此技術(shù)適用于工業(yè)生產(chǎn) 。 本試驗(yàn) 是用水進(jìn)行提取皂素的，而且乙醇沉淀法比較安全，所以 采用的是乙醇沉淀法和陽離子型聚丙烯酰胺絮凝劑法相結(jié)合來進(jìn)行純化的。 2 材料和方法 試驗(yàn) 材料及儀器 未脫殼的油茶籽 儀器 ：秤、天平、烘箱、液壓榨油 機(jī)、水浴鍋、分液漏斗（ 400ml）、量筒（ 10ml、 100ml）、燒杯 （ 200ml、 400ml） 、 pH試紙 、離心機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、紅外燈烘箱、超聲波儀 試劑 ：氨水、 95%乙醇 、陽離子型聚丙烯酰胺絮凝劑 、 活性炭 、乙醚 試驗(yàn) 方法 （ 1） 取 100g未脫殼的油茶籽放入紅外燈烘箱中 ， 105℃下 進(jìn)行脫水處理， 待油茶恒重，稱其重量測(cè) 含水量 。 （ 2） 將剩余的油茶籽進(jìn)行烘干， 烘干后的油茶籽進(jìn)行脫殼，稱其重量 G1。 北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 9 （ 3） 將脫殼的油茶籽放入液壓榨油機(jī)中， 60MPa 壓榨至恒重。 另 取 1kg 單獨(dú)壓榨，測(cè)油茶的出油率 。 皂甙 的提取 （ 1） 將油茶粕用粉碎機(jī)粉碎，然后放入乙醚中浸泡 24h，去除 剩余 油脂。 （ 2） 取 9 份 浸提過的油茶餅，每份 50g，然后按溫度、時(shí)間、超聲波功率、料液比四個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn) 。正交表 L9（ 34） 如下： 表 影響因素 與水平設(shè)計(jì)表 1 2 3 （℃） 60 70 80 （ h） （ w/v） 1： 6 1： 8 1： 10 （ w） 40 60 80 表 L9（ 34） 正交 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 表 列 號(hào) 影 響 因 素 A B C D 試 驗(yàn) 號(hào) 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 2 6 2 3 1 1 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 （ 3） 超聲波處理以后，用氨水調(diào) pH 值為 10，使 浸提液的蛋白質(zhì)、樹脂、有機(jī)酸、色素等雜質(zhì)形成沉淀，離心分離沉淀。 上清液按 1: 95%的乙醇，攪拌均勻，靜置 2h，離心取上清液。 （ 4） 利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將上清液濃縮 ，回收乙醇 。 （ 5） 濃縮液冷卻后加入陽離子型聚丙烯酰胺絮凝劑，攪拌均勻，靜置 2h，得粘稠液體。 （ 6）用紗布過濾后，烘箱烘干，稱 產(chǎn)品重量，計(jì)算 提取量 。 北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 10 3 結(jié)果與討論 試驗(yàn) 結(jié)果 與 分析 未烘烤油茶籽重 =100g， 2h 后油茶籽恒重 油茶籽的含水量 =（ ） /100*100%=%。 仁 率的測(cè)定 未脫殼的油茶籽 G=4152g，脫殼后的油茶籽重 G1=2930g 油茶籽的出 仁 率 = G1/G=2930/4152*100%=%。 未 壓榨的油茶籽重 =1000g，壓榨后的油茶重 = 油茶籽的含油量 =（ ） /1000*100%=%。 皂甙 9份油茶粕，每份 50g，分別按照 表 L9（ 34） 正交表進(jìn)行試驗(yàn)，得數(shù)據(jù)填入下表。 表 皂素的提取量 （ g） 試驗(yàn)號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 皂素產(chǎn)量 輔助 提取油茶 皂甙的正交試驗(yàn)結(jié)果分析見表 表 正交試驗(yàn)結(jié)果的直觀分析 列 號(hào) 影 響 因 素 皂素產(chǎn)量（ g） A B C D 試 驗(yàn) 號(hào) 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 2 6 2 3 1 1 北京林業(yè)大學(xué)本科畢業(yè)論文 11 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 T1 T= T2 T3 ?X1 ?X2 ?X3 R