【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 確的結(jié)果；體溫常用普通溫度計(jì)檢測(cè)肛溫或用數(shù)字溫度計(jì)檢測(cè)；血壓的測(cè)定較為困難，對(duì)于大鼠，通常用鼠尾血壓計(jì)來檢測(cè)。 ? 一 、 大鼠血壓的檢測(cè) ? 1． RBP1型大鼠血壓計(jì)的結(jié)構(gòu)和原理 ? RBP1 型大鼠血壓 計(jì) （ blood pressure meter for rat model， RBP1） 是一種無(wú)創(chuàng)性大鼠尾壓心率測(cè)量?jī)x ， 由滑動(dòng)式大鼠固定器 、 網(wǎng)套及卡板 、 鼠尾袖帶 、 光電容積脈搏波傳感器 、心率數(shù)字顯示器等部件組成 。 ? 采用鼠尾袖帶加壓阻斷法測(cè)量大鼠的血壓 ，以鼠尾光電容積脈搏波隨袖帶壓力下降而重新出現(xiàn)作為收縮壓的檢測(cè)信號(hào) ， 配以高增益低噪音放大器 ， 以聲 、 光顯示容積脈搏波 ， 使血壓檢測(cè)信號(hào)的識(shí)別靈敏度提高 ， 保證了儀器的測(cè)量準(zhǔn)確性 。測(cè)壓時(shí)光電容積脈搏波傳感器處于封閉狀態(tài) ， 抗干擾能力強(qiáng) 。 ? 2． 操作方法 ? （ 1） 保持室內(nèi)相對(duì)恒溫 ， 預(yù)熱和恒溫加熱被測(cè)動(dòng)物 ， 配合鼠尾局部保溫 ， 保持測(cè)量條件的一致 ， 以提高測(cè)量速度和結(jié)果的重復(fù)性 。 ? （ 2） 將大鼠固定于滑動(dòng)式大鼠固定器 ， 根據(jù)不同體重的大鼠 ， 配合大 、 中 、 小三種尺寸的網(wǎng)套及卡板 ， 將動(dòng)物牢固固定 ， 以便于實(shí)施測(cè)量 。大鼠的血壓以 mmHg表示 。 ? （ 3） 本儀器配有心率數(shù)字顯示器 ， 可同時(shí)顯示大鼠的心率 ， 以次 /分表示 。 ? （ 4） 為了保證測(cè)量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性 ， 可重復(fù)測(cè)量 2~3次 ， 取其均值作為測(cè)量數(shù)據(jù) 。 ? 二 、 大鼠體溫的檢測(cè) ? 1． 普通溫度計(jì)測(cè)量 牢固保定或麻醉后固定大鼠 ， 將肛管內(nèi)糞便擠出 ， 用普通溫度計(jì) （ 甩至35℃ 以下 ） 經(jīng)肛門輕輕插入肛管約 ~2cm， 以溫度計(jì)尖端的水銀部分全部插入為宜 。 測(cè)量2~3min至溫度計(jì)水銀柱不再上升為止 ， 即為大鼠肛溫 。 ? 2． 數(shù)字溫度計(jì)測(cè)量 觀察溫度對(duì)動(dòng)物功能的影響時(shí) ， 需要精確 、 連續(xù)測(cè)量動(dòng)物的體溫 ， 一般采用數(shù)字溫度計(jì)進(jìn)行測(cè)量 。 數(shù)字溫度計(jì)由熱敏傳感探頭 （ 或探針 ） 和液晶顯示屏組成 ， 可以精確測(cè)量動(dòng)物的皮溫 、 肛溫 、 皮下及腹腔內(nèi)溫度等 。 使用時(shí)首先校正溫度計(jì) 0點(diǎn) 。 然后將熱敏探頭置于待測(cè)部位 ， 注意保持平穩(wěn) ， 待顯示屏數(shù)字穩(wěn)定不變時(shí)即為所測(cè)溫度 。 ? 使用注意事項(xiàng)：測(cè)量皮溫時(shí)應(yīng)獎(jiǎng)熱敏探頭貼近皮膚 ， 不能留有空隙 。 測(cè)肛溫時(shí)要將肛管內(nèi)的糞便擠出 ， 切勿將探頭（ 探針 ） 插入糞便內(nèi)而造成誤差；插入時(shí)要?jiǎng)幼饕p柔 ， 深度適中 ， 以免刺破肛管或直腸 。 測(cè)量皮下 、 肌肉或腹腔內(nèi)溫度時(shí) ， 注意嚴(yán)格消毒 ， 無(wú)菌操作 ， 皮膚切口以能插入熱敏探頭為宜 。 第六節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的行為測(cè)試 ? 各種動(dòng)物都有自己的行為活動(dòng)習(xí)性 ，當(dāng)發(fā)生疾病或人為造成病理模型后 ， 其原有的習(xí)性將發(fā)生改變或發(fā)生一定程度的功能缺陷 。 應(yīng)用有關(guān)藥物或相關(guān)治療措施 ，可能使動(dòng)物的習(xí)性恢復(fù)正?；蚬δ苋毕莸靡愿纳?。 經(jīng)過對(duì)治療前后的行為進(jìn)行量化評(píng)分和統(tǒng)計(jì)分析 ， 即可判斷所用藥物或治療措施的療效 。 本節(jié)以大鼠為例介紹幾種動(dòng)物行為測(cè)試方法 。 ? 一 、 神經(jīng)行為功能測(cè)試 ? 1． 神經(jīng)功能等級(jí)評(píng)分 大鼠腦梗死后出現(xiàn)肢體功能缺陷 ， 通過 Bedersons定量分級(jí) （ 0~3分 ） 可以評(píng)價(jià)神經(jīng)功能缺陷的程度 ， 但該法過于簡(jiǎn)單 ， 難以全面 、 準(zhǔn)確地反映動(dòng)物的功能狀態(tài) 。 所以 ， 目前多應(yīng)用更為實(shí)用的神經(jīng)功能等級(jí)評(píng)分方法 ， 總分18分 ， 其中 1分代表完成實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目不穩(wěn)定或進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)反射缺陷 ， 2~6分表示輕度損傷 ， 7~12分表示中度損傷 ， 13~18分表示嚴(yán)重?fù)p傷 （ 表 11） 。 ? 2． 前肢放置試驗(yàn) （ forelimb placing test） 總分 10分 。 ? （ 1） 視覺反應(yīng)亞試驗(yàn) （ visual placing subtest） ： 分為前方刺激反應(yīng)和側(cè)方刺激反應(yīng) ，得分 0~4分 。 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：正常得 0分 ， 前方和側(cè)方刺激反應(yīng)延遲但小于 2s者各得 1分 ， 延遲大于2s者各得 2分 。 ? （ 2） 觸覺反應(yīng)亞試驗(yàn) （ tactile placing subtest） ： 也分前方刺激反應(yīng)和側(cè)方刺激反應(yīng) ，得分 0~4分 。 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同視覺反應(yīng)亞試驗(yàn) 。 ? （ 3）本體覺反應(yīng)亞試驗(yàn)（ proprioceptive placing subtest）： 只有前方刺激反應(yīng)，得分0~2分。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同前。 ? 3． 后肢放置試驗(yàn) （ hindlimb placing test） 分兩個(gè)亞試驗(yàn) ， 總分 6分 。 ? （ 1 ） 觸 覺 反 應(yīng) 亞 試 驗(yàn) （ tactile placing subtest） ： 也分前方刺激反應(yīng)和側(cè)方刺激反應(yīng) ， 得分 0~4分 。 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同前 。 ? （ 2 ） 本 體 覺 反 應(yīng) 亞 試 驗(yàn)（ proprioceptive placing subtest） ：只有前方刺激反應(yīng) ， 得分 0~2分 。 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同前 。 ? 4．平衡木試驗(yàn)（ beam blance test） 將動(dòng)物放置于 30 保持平衡，得分 1~7分。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：能保持平衡，且四爪均置于木條表面者得 1分；動(dòng)物有一側(cè)爪子握住木條或動(dòng)物在木條上搖晃者得 2分；有一或兩個(gè)肢體滑下木條者得 3分；三個(gè)肢體滑下木條者得 4分；動(dòng)物在平衡木上試圖保持平衡但滑下者得 5分；動(dòng)物試圖保持平衡失敗懸吊在木條上然后跌落者得 6分；動(dòng)物直接從木條上跌落而無(wú)試圖保持平衡的過程者得 7分。 ? 二 、 學(xué)習(xí)和記憶功能測(cè)試 ? 人類和動(dòng)物的心理過程不可能直接觀察到 ， 只能根據(jù)可觀察到的刺激反應(yīng)來推測(cè) 。 對(duì)腦內(nèi)記憶過程的研究 ， 可以從人類或動(dòng)物學(xué)習(xí)或執(zhí)行某項(xiàng)任務(wù)后間隔一定時(shí)間 ， 測(cè)量其操作成績(jī)或反應(yīng)時(shí)間來衡量這些過程的編碼形式 、 儲(chǔ)存量 、 保持時(shí)間和它們所依賴的條件等 。 學(xué)習(xí)和記憶試驗(yàn)方法的基礎(chǔ)是條件發(fā)射 ， 各種各樣的方法均由此衍化而來 ，常用的有跳臺(tái)法 （ step down test） 、 避暗法 （ step through test） 、 穿 梭 箱 （ shuttle box） 和 迷 津（ maze） 等 。 ? 迷津的種類和裝置繁多 ， 有三個(gè)基本部分組成：起步區(qū) —— 放置動(dòng)物；目標(biāo)區(qū) —— 放置食物或稱安全區(qū)；跑道 —— 有長(zhǎng)有短 ， 或直或彎 ， 有一個(gè)或幾個(gè)交叉口供動(dòng)物選擇到達(dá)目標(biāo)區(qū)的方向或徑路 。 以下介紹兩種常用的迷津裝置 。 ? 1． “ Y”型迷宮 （ Ymaze） ? 該裝置是根據(jù)大鼠趨暗避明的習(xí)性而設(shè)計(jì)的相互連通的迷宮 ， 一般分為三等分 ， 分別稱為 Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ 臂 。 迷宮的底壁和側(cè)壁由銅柵制成 ， 并連接于電擊刺激控制器 ，頂蓋為有機(jī)塑料板 ， 每個(gè)臂的末端安裝一個(gè)帶有可控開關(guān)的燈泡 。 ? （ 1） 簡(jiǎn)單 、 一次性訓(xùn)練的空間辨別反應(yīng)試驗(yàn)：如以Ⅰ 臂為起步區(qū) ， 則 Ⅱ 臂為電擊區(qū) ， Ⅲ 臂為安全區(qū) （ 圖 11A） 。 實(shí)驗(yàn)在暗室內(nèi)進(jìn)行 ， 將動(dòng)物放入起步區(qū) ， 操縱電擊刺激控制器 ， 訓(xùn)練動(dòng)物獲得遭遇電擊時(shí)直接逃避至安全區(qū)為正確反應(yīng) ， 反之為錯(cuò)誤反應(yīng) 。 訓(xùn)練方法有以下幾種： ① 固定訓(xùn)練次數(shù) ， 10~15次 ， 記錄正確和錯(cuò)誤反應(yīng)的次數(shù)； ② 動(dòng)物連續(xù)獲得兩次正確反應(yīng)前所需要的電擊次數(shù)； ③ 動(dòng)物學(xué)習(xí)成績(jī)以達(dá)到 9/10次正確反應(yīng)前所需要的電擊次數(shù)表示 。 24h后測(cè)試記憶成績(jī) 。 ? （ 2） 復(fù)雜訓(xùn)練：系按上述方法訓(xùn)練完成后 ， 改用 Ⅱ 臂為起步區(qū) ， 動(dòng)物在遭遇電擊后直接逃至 Ⅰ 臂為正確反應(yīng) ， 逃至 Ⅲ 臂為錯(cuò)誤反應(yīng) 。 訓(xùn)練達(dá)到要求后 ，再以 Ⅲ 臂為起步區(qū) ， 動(dòng)物受電擊后逃至Ⅱ 臂為正確反應(yīng) ， 逃至 Ⅰ 臂為錯(cuò)誤反應(yīng)（ 圖 11B） 。 以動(dòng)物在三臂訓(xùn)練均達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)所需要的電擊次數(shù)的總和作為學(xué)習(xí)成績(jī) 。 24h或 48h后測(cè)定記憶成績(jī) 。 ? （ 3） 更復(fù)雜訓(xùn)練：先以 Ⅰ 臂為起步區(qū) ， 動(dòng)物受電擊后逃至 Ⅲ 臂安全區(qū) ， 立即以 Ⅲ 臂為起步區(qū) ， 電擊動(dòng)物 ， 則動(dòng)物從 Ⅲ 臂逃入 Ⅱ 臂 ， 然后以 Ⅱ 臂為起步區(qū)進(jìn)行電擊 ， 則動(dòng)物逃至 Ⅰ 臂 ，為正確反應(yīng) （ 圖 11C） 。 要達(dá)到這一訓(xùn)練要求 ，需每天訓(xùn)練一次 ， 至少訓(xùn)練一周 。 連續(xù)進(jìn)行試驗(yàn) 20次 ， 記錄動(dòng)物正確反應(yīng)率 ， 達(dá)到 16次（ 16/20） 正確者可視為動(dòng)物已有良好的記憶能力 。 將