【正文】 ]?當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一半時(shí) ,即 V = 1/2 Vmax, Km = [S] ?上式表示 ,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時(shí)的底物濃度。 例 : 堿性磷酸酶催化磷酸苯酯水解時(shí) [s]為 M，最適 pH為 [s]為 M，最適 pH為 pH影響反應(yīng)速度的原因 ( 1 ) pH影響了酶分子、底物分子和 ES復(fù)合物的 解離狀態(tài)。 ? 酶聯(lián)法： S+E SE1 D+E2 DE2 ? F ? D：不能檢測(cè)或不容易檢測(cè) ? F：容易檢測(cè) ? 旋光法 ? 量熱法 ? 層析 計(jì)算題 ? 有 1克淀粉酶制劑，用水溶解成 1000毫升，從中取出 1毫升測(cè)定淀粉酶活力，測(cè)得每 5分鐘分解 。 酶活力的測(cè)定： ? 比色法：產(chǎn)物與試劑生成有色物質(zhì)，根據(jù)顏色深淺來(lái)計(jì)算。 反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，最適溫度低。如有機(jī)磷毒劑二異 丙基氟磷酸酯。 ? 計(jì)算一定速度下底物濃度。 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 + I EI+S ESI ES P+ E E+S + I 實(shí)例：重金屬離子（ Cu2+、 Hg2+、 Ag+、 Pb2+） 金屬絡(luò)合劑（ EDTA、 F、 CN、 N3） 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制特點(diǎn) ： 1）抑制劑與底物結(jié)構(gòu)不相似，抑制劑與酶活性 中心以外的基團(tuán)結(jié)合。 Km值取決于底物濃度嗎 ? ? ③ 當(dāng)?shù)孜餄舛葹?向每個(gè)混合物加入相同量的酶后便開(kāi)始反應(yīng)。 [S] v V/2 km km ′ 無(wú) I 有 I 3） 可以通過(guò)增大底物濃度，即提高底物的競(jìng)爭(zhēng)能力來(lái)消除。 Km值小表示親和程度大 ,酶的催化活性高。抑制劑并非變性劑，抑制劑具有不同程度的選擇性。 ? 因此大多數(shù)酶都有一個(gè)最適溫度。 ? V=[S]/t和 V=[P]/t ? U（酶活力）單位：表示酶量的多少，酶活力單位與所采用的測(cè)定方法，反應(yīng)條件等因素有關(guān)。 影響酶作用的因素 1)、酶濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響 在有足夠底物和其他條件不變的情況下，反應(yīng)速度與酶濃度成正比 。如：Cl是唾液淀粉酶的激活劑。 [S] V Vmax 當(dāng)?shù)孜餄舛雀哌_(dá)一定程度 反應(yīng)速度不再增加，達(dá)最大速度；反應(yīng)為零級(jí)反應(yīng) [S] V Vmax 米氏常數(shù) Km的意義 ? 不同的酶具有不同 Km值，它是酶的一個(gè)重要的特征物理常數(shù)。 + I EI E