【正文】 ]?當反應速度等于最大速度一半時 ,即 V = 1/2 Vmax, Km = [S] ?上式表示 ,米氏常數(shù)是反應速度為最大值的一半時的底物濃度。 例 : 堿性磷酸酶催化磷酸苯酯水解時 [s]為 M，最適 pH為 [s]為 M，最適 pH為 pH影響反應速度的原因 ( 1 ) pH影響了酶分子、底物分子和 ES復合物的 解離狀態(tài)。 ? 酶聯(lián)法： S+E SE1 D+E2 DE2 ? F ? D：不能檢測或不容易檢測 ? F：容易檢測 ? 旋光法 ? 量熱法 ? 層析 計算題 ? 有 1克淀粉酶制劑，用水溶解成 1000毫升，從中取出 1毫升測定淀粉酶活力，測得每 5分鐘分解 。 酶活力的測定： ? 比色法：產(chǎn)物與試劑生成有色物質(zhì)，根據(jù)顏色深淺來計算。 反應時間長，最適溫度低。如有機磷毒劑二異 丙基氟磷酸酯。 ? 計算一定速度下底物濃度。 非競爭性抑制作用 + I EI+S ESI ES P+ E E+S + I 實例：重金屬離子（ Cu2+、 Hg2+、 Ag+、 Pb2+） 金屬絡合劑（ EDTA、 F、 CN、 N3） 非競爭性抑制特點 ： 1）抑制劑與底物結構不相似，抑制劑與酶活性 中心以外的基團結合。 Km值取決于底物濃度嗎 ? ? ③ 當?shù)孜餄舛葹?向每個混合物加入相同量的酶后便開始反應。 [S] v V/2 km km ′ 無 I 有 I 3） 可以通過增大底物濃度，即提高底物的競爭能力來消除。 Km值小表示親和程度大 ,酶的催化活性高。抑制劑并非變性劑，抑制劑具有不同程度的選擇性。 ? 因此大多數(shù)酶都有一個最適溫度。 ? V=[S]/t和 V=[P]/t ? U（酶活力）單位：表示酶量的多少，酶活力單位與所采用的測定方法，反應條件等因素有關。 影響酶作用的因素 1)、酶濃度對酶反應速度的影響 在有足夠底物和其他條件不變的情況下，反應速度與酶濃度成正比 。如：Cl是唾液淀粉酶的激活劑。 [S] V Vmax 當?shù)孜餄舛雀哌_一定程度 反應速度不再增加，達最大速度；反應為零級反應 [S] V Vmax 米氏常數(shù) Km的意義 ? 不同的酶具有不同 Km值，它是酶的一個重要的特征物理常數(shù)。 + I EI E