《酶活力及酶》ppt課件-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax A. 取米氏方程式的倒數(shù)形式 ： 4 2 0 2 4 6 8 101/[S ](1/m m ol .L1)1/v1/Vmax 斜率 =Km/Vmax 1/Km ? 米氏常數(shù) Km的 測(cè)定： B、 EH法 ? 兩邊分別乘以 Km+[S]／ [S]，得 v=Kmv/［ S］ +Vmax 酶的 Km在實(shí)際應(yīng)用中的意義 ? 鑒定酶：通過(guò)測(cè)定 Km，可鑒別不同來(lái)源或相同來(lái)源但在不同發(fā)育階段，不同生理狀態(tài)下催化相同反應(yīng)的酶是否是屬于同一種酶。 ? 判斷反應(yīng)方向或趨勢(shì)。根椐抑制劑與酶結(jié)合的情況，又可以分為三類(lèi)。 例 : 丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的抑制作用 C O O C O O C O C O O C H 2 C O O C H 2 C O O C H 2C H 2 C O O 草 酸 草 酰 乙 酸 戊 二 酸此酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑還有： 競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用動(dòng)力學(xué) [E] = [Ef] + [ES] + [EI] Vmax = k3 [E] v = k3[ES] Vmax v = [Ef] + [ES] + [EI] [ES] Km = [Ef][S] [ES] [Ef]=[ES] Km [S] Ki = [Ef][I] [EI] [EI]=[Ef] [I] Ki 競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用動(dòng)力學(xué) 競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用特點(diǎn) ： 1）競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的結(jié)構(gòu)與底物結(jié)構(gòu)十分相似，二者競(jìng)爭(zhēng)酶的結(jié)合部位。抑制劑與活性中心以外的基團(tuán)結(jié)合，不與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，所以稱(chēng)為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。 [S] v 無(wú) I V/2 km 有 I (′) 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用動(dòng)力學(xué) 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 ESI ES P+ E E+S + I 酶只有在與底物結(jié)合后，才能與抑制劑結(jié)合，引起酶活性下降。 ? A、有序順序，Ｓ １ 為底物Ａ，Ｓ ２ 為底物Ｂ。 （ 2） 乒乓機(jī)制 的底物動(dòng)力學(xué)方程及動(dòng)力學(xué)圖 —— 在 B的濃度達(dá)到飽和時(shí) A的米氏常數(shù) —— 在 A的濃度達(dá)到飽和時(shí) B的米氏常數(shù) —— 底物 A、 B都達(dá)到飽和時(shí)最大反應(yīng)速率 隨第二個(gè)底物濃度的增加， Km和 Vm均提高 三）、非米氏酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)， Rs協(xié)同指數(shù)或飽和比值。 底物濃度(mol/L) 1 10－ 6 5 10－ 6 1 10－ 5 1 10－ 4 1 10－ 3 1 10－ 2 初速度 (μmol/min) ? ① 把表中的數(shù)據(jù)繪制成圖，在給出的酶量下的 Vmax是多少 ? ? ② 根據(jù)米氏方程，用 Vmax、 υ 和 〔 S〕 推演出 Km的代數(shù)表達(dá)式。L－ 1時(shí)，計(jì)算它們的初速度。在 2分鐘后底物總量的百分之幾被轉(zhuǎn)換 ?
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