酶活力及酶ppt課件-在線瀏覽
2025-02-22 20:18本頁(yè)面
【正文】 金屬螯合劑： EDTA 激活酶原的酶 6)、抑制劑對(duì)酶活性的影響 ? 使酶的活性降低或喪失的現(xiàn)象，稱為酶的抑制作用。抑制劑并非變性劑，抑制劑具有不同程度的選擇性。 的復(fù)合體或結(jié)合物。如有機(jī)磷毒劑二異 丙基氟磷酸酯。 有機(jī)磷化合物：抑制蛋白酶或酯酶活性 敵敵畏 敵百蟲 薩林 有機(jī)砷化合物：與酶的巰基結(jié)合而抑制活性 路易斯毒氣 （二）可逆抑制作用 (reversible inhibition) E+I EI 抑制劑與酶蛋白以 非共價(jià)方式結(jié)合 ，引起酶活性暫時(shí)性喪失。 二、酶動(dòng)力學(xué) ? 單底物酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 1913年，德國(guó)化學(xué)家 Michaelis和 Menten根據(jù) 中間產(chǎn)物學(xué)說 對(duì)酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究，推導(dǎo)出了表示整個(gè)反應(yīng)中底物濃度和反應(yīng)速度關(guān)系的著名公式，稱為 米氏方程 。 ?因此 ,米氏常數(shù)的單位為mol/L。 [S] V Vmax 隨著底物濃度的增高 反應(yīng)速度不再成正比例加速；反應(yīng)為混合級(jí)反應(yīng)。 ? Km值只是在固定的底物，一定的溫度和 pH條件下，一定的緩沖體系中測(cè)定的，不同條件下具有不同的 Km值。 Km值小表示親和程度大 ,酶的催化活性高。 1 Km 1 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax A. 取米氏方程式的倒數(shù)形式 ： 4 2 0 2 4 6 8 101/[S ](1/m m ol .L1)1/v1/Vmax 斜率 =Km/Vmax 1/Km ? 米氏常數(shù) Km的 測(cè)定： B、 EH法 ? 兩邊分別乘以 Km+[S]／ [S]，得 v=Kmv/［ S］ +Vmax 酶的 Km在實(shí)際應(yīng)用中的意義 ? 鑒定酶：通過測(cè)定 Km，可鑒別不同來源或相同來源但在不同發(fā)育階段，不同生理狀態(tài)下催化相同反應(yīng)的酶是否是屬于同一種酶。 ? 計(jì)算一定速度下底物濃度。 ? 判斷反應(yīng)方向或趨勢(shì)。 可逆抑制 (reversible inhibition) 及其動(dòng)力學(xué) E+I EI 可逆抑制劑與酶蛋白以 非共價(jià)方式結(jié)合 ，引起酶活性暫時(shí)性喪失。根椐抑制劑與酶結(jié)合的情況，又可以分為三類。當(dāng)抑制劑與活性中心結(jié)合后，底物被排斥在反應(yīng)中心之外，其結(jié)果是酶促反應(yīng)被抑制了。 例 : 丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的抑制作用 C O O C O O C O C O O C H 2 C O O C H 2 C O O C H 2C H 2 C O O 草 酸 草 酰 乙 酸 戊 二 酸此酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑還有： 競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用動(dòng)力學(xué) [E] = [Ef
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