【正文】
借助各種副鍵的作用而構(gòu)成的一定空 間結(jié)構(gòu)稱(chēng)為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu) 也就是指整個(gè)蛋白質(zhì)分子在空間的構(gòu) 象。 39。在一定介質(zhì) 時(shí),主要以?xún)尚噪x子存在: O HR C H C O O HN H 3R C H C O ON H 3 + R C H C O ON H 2( Ⅱ )( Ⅰ )+正 離 子 兩 性 離 子 負(fù) 離 子H+O HH+③ 等電點(diǎn) 當(dāng)溶液調(diào)節(jié)至一定的 pH值時(shí),氨基酸可以?xún)尚噪x 子的形式存在,將此溶液置于電場(chǎng)中,氨基酸不向 電場(chǎng)的任何一極移動(dòng),即處于電中性狀態(tài),這時(shí)溶 液的 pH值稱(chēng)為氨基酸的等電點(diǎn),通常以 pl表示。CNOOC HRC O O R 39。如蛋清蛋白、酪蛋白等。 ② 重金屬法:在蛋白質(zhì)溶液中加入 Hg2+、 Pb2+ 等能與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白質(zhì)的重金屬離子(鹽)。例如麥芽糖酶只能使 α 葡萄糖苷鍵斷裂,而不能使 β葡萄糖苷鍵 斷裂。是蛋白質(zhì)合成的模板。 ( 2)酶的命名 ? 習(xí)慣命名: 按所作用的底物命名,如起催化水解 淀粉的酶叫淀粉酶,催化水解蛋白質(zhì)的酶叫蛋白 酶等。 蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)水溶性最小,在電場(chǎng)中 既不向陽(yáng)極移動(dòng),也不向陰極。牛 胰島素結(jié)晶如右圖 N H 2 C HC H 3CON H CON H C HC H 2 C 6 H 5C O O HC HC H 2 O H丙 氨 酰 絲 氨 酰 苯 丙 氨 酸 ( 丙 絲 苯 丙 )二、多肽結(jié)構(gòu)的測(cè)定 1.測(cè)定分子量 2.氨基酸的定量分析 ——現(xiàn)代用氨基酸分析 儀進(jìn)行分離和測(cè)定 H C lH 2 O多 肽 氨 基 酸層 析 法 分 離 各 種 氨 基 酸 各 種 氨 基 酸 的 含 量3.端基分析(測(cè)定 N端和 C端) ( 1)測(cè)定 N端 2,4 = 硝基氟苯 (DNFB)法 ——為標(biāo)記 N—端試劑 H 2 N C H CHNOC H CR RHN C H C O O HOO 2 NO 2 NR1 2 3F +O 2 NO 2 NNHC H CHNOC H CR RHN C H C O O HO R1 2 3水 解O 2 NO 2 NNHC H C O O HR1H 2 N C H C O O HR 2H 2 N C H C O O HR 3+ +黃色的 N—( 2, 4—二硝基苯基)氨基酸 ( 2)測(cè)定 C端 ——羧肽酶水解法 在羧肽酶催化下,多肽鏈中只有 C端的氨基酸能 逐個(gè)斷裂下來(lái) 三、多肽的合成 兩種氨基酸可生成四種二肽 例如 甘 +丙 甘 —丙 +丙 —甘 +甘 —甘 +丙 —丙 1.保護(hù)反應(yīng)基團(tuán)(保護(hù) NH2) 2.活化反應(yīng)基團(tuán)(活化 COOH) H 2 N C H C O O HR 1C 6 H 5 C H 2 O C O C l + C 6 H 5 C H 2 O C O N H C H C O O HR 1氯 甲 酸 芐 酯C 6 H 5 C H 2 O C O N H C H C O O HR 1S O C l 2C 6 H 5 C H 2 O C O N H C H C O C lR 1 合成 還原 H 2 N C H C O O HR 2C 6 H 5 C H 2 O C O N H C H C O C lR 1C 6 H 5 C H 2 O C O N H C H C C OR 1H N C H C O O HR 2N 端 帶 有 保 護(hù) 基 的 二 肽C 6 H 5 C H 2 O C N H R H 2 / P t C O 2+C 6 H 5 C H 3 + H 2 N R四、重要的多肽 催產(chǎn)素:腦垂體后葉分泌的一種激素 , 1958年由北大合成 異亮 — 酪 — 半胱 —S S 谷 — 門(mén)冬 ——— 半胱 ——脯 —亮 — 甘 胰島素 由 16種 51個(gè)氨基酸組成的激素蛋白,分子量約 為 6000,正六面無(wú)色晶體。 ? 堿性氨基酸: 需加堿調(diào)到等電點(diǎn),故其等電點(diǎn)大 于 7,一般在 ~ 。 ? 氨基酸在等電點(diǎn)時(shí),溶解度最小, 可用調(diào)節(jié)等電 點(diǎn)的方法分離氨基酸的混合物。 167。 據(jù)此可在等電點(diǎn)分離、提純蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)分子在不同介質(zhì)中的存在形式 PN H3C O O H+H+O HPN H3C O O+PN H2C O O H +O H陽(yáng) 離 子p H < p I