【正文】 方法提綱一．保健食品的檢驗有關要求二．保健食品理化檢驗及常用的分析方法介紹三．保健食品功效成分的檢測四．保健食品功效成分檢測其它有關問題一、保健食品的檢驗有關要求檢驗依據(jù)檢驗要求主要檢驗依據(jù)216。保健食品檢驗與評價技術規(guī)范（2003年版）216。檢驗要求1. 功效成分或指標性成分、含量及其檢驗方法u 根據(jù)產(chǎn)品及原料確定，應與申報的功能有一定的關系u 功效成分或指標性成分、含量及其檢驗方法應分別列出u 依據(jù)以下二方面確定產(chǎn)品的功效成分（或標志性成分）并說明理由216。 一般性功效成分（或標志性成分）按≥指標值標示，如總氨基酸、粗多糖、膳食纖維等216。不溶性固形物物。精密度反映了隨機誤差的大小。4. 樣品中某些組分對被測成分產(chǎn)生的干擾（正、負），有時很難靠回收率實驗發(fā)現(xiàn)。S=3NS——最小響應值（峰高或峰面積）N——噪音信號標準物質(zhì)的量S最低檢出量= ————————————標準物質(zhì)的響應值注：標準物質(zhì)的量盡量接近最低檢出量，較為準確。最佳測定范圍（optimumconcentrationrange），在限定誤差能滿足要求的前提下，特定方法的測定下限至測定上限之間的濃度范圍。試劑除非另有說明，在分析中僅使用重蒸水。 紫外檢測器：檢測波長270nm。L，以峰面積對進樣量（181。：深圳市寶和堂保健品有限公司出品。精密量取標準品溶液1mL，2mL，3mL，5mL，10mL，分別置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。標準起草說明和方法學驗證淫羊藿苷檢測限色譜圖標準起草說明和方法學驗證（濃度為），置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。，置25mL量瓶中加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為對照品溶液。標準品溶液的制備、標準曲線的制備同“中國勁酒中淫羊藿苷的含量測定”項下。3. 對特定品種、特定提取物、或特定工藝產(chǎn)品的常規(guī)例行檢測有較大的優(yōu)勢。而攝入低聚糖可促使雙岐桿菌增殖。(5)促進生成營養(yǎng)物質(zhì):由于雙岐桿菌在腸道內(nèi)能自然合成微生素BBBB1煙酸和乙酸。其中棉子糖和水蘇糖被稱為大豆低聚糖的主要功效成分。低聚果糖低聚果糖低聚果糖（Fructooligosaccharides，簡稱FOS）是指14個果糖基以β（2→1）糖苷糖連接在蔗糖的D果糖基上而形成的蔗果三糖（GF2）、蔗果四糖（GF3）、蔗果五糖（GF4）和蔗果六糖（GF5）的混合物。2色譜條件 色譜柱AgilentzorbaxNH2（mm150mm,5μm）,柱溫25℃；mL1的溶液，作為對照品溶液。以信噪比10:1時的進樣量作為定量限,測得蔗糖、蔗果三糖、棉子糖、蔗果四糖、蔗果五糖、。經(jīng)試驗研究后認為采用流動相為乙晴水（70:30），柱溫25℃，樣品處理是保健食品分析檢測過程的重要環(huán)節(jié)，約占分析檢測時間的60%?？偨Y(jié)與討論4種含低聚糖樣品中6種成分的含量情況糖成分的保健食品功效成分的含量測定方法，以制定該類產(chǎn)品的質(zhì)量標準。分別精密秤取已知含量的1號，每3份1組，按高、中、低3個水平分別精密加入一定量對照品（相當于樣品中各成分含有量的80%，100%，120%），按“”供試品溶液制備項下操作，結(jié)果6種成分的回收率分別為蔗糖%（%），%（%），棉子糖%（%），%（%），蔗果五糖%（%），%（%）。結(jié)果表明蔗糖在～、～、棉子～、～、～、～。mL研究目標1. 建立多成分同時測定低聚果糖和大豆低聚糖類成分的分析方法2. HPLCRID法3. 蔗糖、蔗果三糖、棉籽糖、蔗果四糖、蔗果五糖、水蘇糖共六種成分HPLCRID法用于6種成分的測定蔗糖蔗果三糖棉籽糖蔗果四糖蔗果五糖水蘇糖色譜條件1儀器與試劑Waters515高效液相色譜儀，2414視差折光檢測器。低聚果糖低聚果糖(fructooligosaccharides,FOS)是以蔗糖為原料經(jīng)微生物酶作用而制得的由葡萄糖和果糖組成的雜低聚糖混合物，包括蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)、蔗果六糖(GF5)等低聚糖。2. 需要補充：u 從一般膳食習慣上看,每天攝取的低聚糖往往很難達到推薦量標準。攝取功能性低聚糖來促使腸道內(nèi)雙岐桿菌自然增殖顯得更切實可行。人體腸胃道內(nèi)沒有水解這些低聚糖(除異麥芽酮糖之外)的酶系統(tǒng)，因此它們不被消化吸收而直接進入大腸內(nèi)優(yōu)先為雙歧桿菌所利用，是雙歧桿菌的增殖因子低聚糖概況1. 1999年我國公布的 “功能性低聚糖通用技術規(guī)則行業(yè)標準”對功能性低聚糖的定義為：（1）功能性低聚糖（functionaloligosaccharide）是由2～10個相同或不同的單糖，以糖苷鍵聚合而成；（2）具有糖類某些共同的特性，可直接代替糖料作為甜食品配料，但不被人體胃酸、胃酶降解，不在小腸吸收，可到達大腸部；（3）具有促進人體雙岐桿菌的增殖等生理功能。3. 標準概況：目前只控制12種成分大豆異黃酮類成分概況R 1R 2ROOH中文名稱3英文名稱R1R2R3大豆苷元DaidzeinOHHH大豆苷DaidzinOGluHH染料木素GenisteinOHHOH染料木苷GenistinOGluHOH黃豆黃素GlyciteinOHOCH3H黃豆黃苷GlycitinOGluOCH3H大豆異黃酮類成分概況1. 目前大豆異黃酮類成分常見的分析方法：u 紫外分光光度法u 薄層掃描法u 高效液相色譜法2. 這些方法在準確性、合理性、可操作性等方面均有欠缺，大多數(shù)方法只報道了測定其中1～2個成分的含量，不能較為全面地反應產(chǎn)品的真實質(zhì)量。以峰面積積分值為縱坐標，以淫羊藿苷標準品進樣量（181。濃度：）、置100mL錐形瓶中，揮干溶劑，取本品(批號:QLS050107)，共9份，按樣品溶液制備方法制備供試液，按給定色譜條件測定，計算回收率測得量樣品中含量回收率%=100%對照品加入量回收率試驗結(jié)果樣品中含量(mg)對照品加入量(mg)測得量 (mg)回收率%平均值總平均%RSD%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%標準起草說明和方法學驗證9專屬性，按樣品溶液制備方法制備。（見附圖1）標準起草說明和方法學驗證1200000010000000800000060000004000000200000000 1 2 3 4 5 6淫羊藿苷進樣量（μg）淫羊藿苷標準曲線進樣量（μg）峰面積積分值216452428011850451120729921414143235671538747911020132峰面積標準起草說明和方法學驗證5檢測限和定量限（濃度為），置100mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。濾過，取續(xù)濾液。技術參數(shù)%～%之間。L。高效液相色譜法測定保健食品中的淫羊藿苷HPLCdeterminationofIcariineinhealthfood分析步驟試樣處理：固體試樣：取20粒以上膠囊、10g以上丸劑試樣進行粉碎，混勻，根據(jù)樣品含量，～（），精密加入50mL稀乙醇，稱重，超聲提取60分鐘，取出，放冷至室溫，用稀乙醇補重，過濾，取續(xù)濾液。耐用性在測定條件有小的變動是，測定結(jié)果不受影響的承受程度。通常取SN=10Nu對于消除了系統(tǒng)誤差的特定方法來說，精密度要求越高，則定量下限高出檢測限越多。A=kc+a檢測限（limitofdetection,LOD）信水平內(nèi)可以從樣品中檢測到待測物質(zhì)的最小濃度或最小量。準確度的評價方法回收率X1X0P（%）= ————100MP ——加入的標準物質(zhì)的回收率M——加入標準物質(zhì)的量X1——加入標準樣品的測定值X0——未知樣品的測定值用回收率評價準確度需注意事項1. 不同濃度水平，加入量與樣品濃度相近（80%、100%、120%），不能超過方法的線性范圍，加標量不得超過待測物含量的3倍。 分析方法的選擇 對于每日攝入量需嚴格控制的化合物，如褪黑素等，其指標范圍上限折算成每日攝入量不得大于允許攝入量216。 無相關檢測方法的，申請人應提供詳細的檢測方法和方法學研究及驗證結(jié)果。藥檢系統(tǒng)檢驗要求報的保健功能相適應的功效成分或特征成分，申報時須檢測配方中主要原料所含的功效成分或特征成分。衛(wèi)生部健康相關產(chǎn)品檢驗機構(gòu)認定與管理辦法（衛(wèi)法監(jiān)發(fā)［1999］第76號）216。衛(wèi)生部發(fā)布的與保健食品相關的文件216。檢驗要求1. 保健食品評審專家委員會可根據(jù)產(chǎn)品的具體配方、工藝等相關資料，要求申報單位檢測指定的項目。研究及驗證結(jié)果包括檢驗方法、線性范圍、精密度、準確度和至少5批加樣回收率等內(nèi)容及驗證報告檢驗要求功效成分、特征成分、營養(yǎng)成分及衛(wèi)生學指標的檢測方法應根據(jù)其產(chǎn)品適用的方法學范圍選擇以下進行測定：國家標準衛(wèi)生部部頒標準行業(yè)標準國際上權(quán)威分析方法檢驗要求，企業(yè)應建立自己的企業(yè)標準。 ，礦物質(zhì)u 質(zhì)量標準編制說明中應詳細提供功效成分（或標志性成分）指標值的確定依據(jù)及理由二、保健食品理化檢驗及常用的分析方法介紹保健食品常見的檢驗項目保健食品檢驗常用的分析方法保健食品常見的檢驗項目1. 感官指標（性狀）2. 水分3. 灰分4. 凈含量與負偏差5. 崩解時限6. 微生物限度7. 重金屬（Pb、As、Hg）8. 農(nóng)藥殘留量（六六六、滴滴涕）9. 功效成分10. 其它保健食品檢驗常用的分析方法1. 感官檢查法2. 物理檢查法3. 化學分析法4. 物理化學分析法感官檢查法，即視覺、嗅覺、味覺等來鑒定被檢物質(zhì)的外觀、顏色、氣味和滋味等。 分析方法學驗證的內(nèi)容2. 用回收率評價準確度并非完全可靠。即分析方法所能識別的極限。2. 定量上限：u在限定誤差能滿足要求的前提下，用特定分析方法能準確地定量測定待測物質(zhì)的最大濃度或量。u樣品溶液的穩(wěn)定性u提取次數(shù)、時間uHPLC流動相比例、PH、……（五）、分析方法建立實例分析實例1高效液相色譜法測定保健食品中的淫羊藿苷高效液相色譜法測定保健食品中的淫羊藿苷HPLCdeterminationofI