【正文】 保健食品功效成分檢測方法、五味子甲素和乙素的高效液相色譜測定保健食品功效成分檢測方法23. 保健食品中總皂甙的測定24. 保健食品中總黃酮的測定25. 殼聚糖的游離氨基測定及脫乙酰度的計(jì)算26. 蚓激酶活性的測定27. 紅曲產(chǎn)品中桔青霉素的測定（四）保健食品分析方法的建立和析方法學(xué)驗(yàn)證物理檢查法，如密度、旋光、折光率等，用以判定物質(zhì)的純度。X值依據(jù)研制產(chǎn)品的檢測資料確定216。檢驗(yàn)要求1. 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)u質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中文文本編寫格式須符合GB／－2000標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則的規(guī)定u內(nèi)容須包括資料性概述要素（封面、目次、前言）、規(guī)范性一般要素（產(chǎn)品名稱、范圍、規(guī)范性引用文件）、規(guī)范性技術(shù)要素（技術(shù)要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、儲(chǔ)存、規(guī)范性附錄）以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)編寫說明u附錄中列出檢驗(yàn)方法和原料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)要求1. 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（續(xù)）u 功效成分標(biāo)示范圍，具體標(biāo)示方法216。 無標(biāo)準(zhǔn)檢測方法的，應(yīng)用比較權(quán)威的檢測方法，并標(biāo)明方法的出處216。3. 保健食品的功效成分檢測工作應(yīng)在SFDA和衛(wèi)生部原來認(rèn)定的檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)行。CDC系統(tǒng)216。保健（功能）食品通用標(biāo)準(zhǔn)（GB16740）216。保健食品注冊管理辦法216。保健食品管理辦法（1996年衛(wèi)生部46令）216。保健食品通用衛(wèi)生要求（1996年）216。企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)要求保健食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)216。2. 檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)受理保健食品檢測時(shí)，申報(bào)單位應(yīng)提供該產(chǎn)品的配方、工藝及企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)資料。 代表產(chǎn)品特性的標(biāo)志性成分u 按標(biāo)準(zhǔn)（規(guī)范）規(guī)定的檢測方法檢測216。自主開發(fā)研究的分析方法，申報(bào)單位需向檢測機(jī)構(gòu)提供方法學(xué)研究的相關(guān)資料。x%作為限定范圍，如總蒽醌、蘆薈苷等。感官檢查在對某些保健食品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)具有重要的意義。揮發(fā)法、萃取法、沉淀法u容量分析216。分析方法建立實(shí)例分析分析方法的選擇1. 根據(jù)分析對象的性質(zhì)選擇準(zhǔn)確、可靠的方法2. 分析方法的科學(xué)性，應(yīng)根據(jù)分析方法的評(píng)價(jià)參數(shù)選擇可以滿足分析需要的分析方法3. 分析方法的實(shí)用性，方法應(yīng)簡便易行，樣品前處理少、操作不費(fèi)時(shí)、適合大批量樣品的測定、同時(shí)測定成本低、所用試劑和材料不特殊、種類少、穩(wěn)定性高、環(huán)保、毒性小等。u平行性（replicability）相同分析方法、樣品、實(shí)驗(yàn)室、分析人員、分析設(shè)備、分析時(shí)間u重復(fù)性（repeatability）相同分析方法、樣品、實(shí)驗(yàn)室，但分析人員、分析設(shè)備、分析時(shí)間中至少有一項(xiàng)不同u再現(xiàn)性（reproducibility）相同分析方法、樣品，但實(shí)驗(yàn)室，分析人員、分析設(shè)備、分析時(shí)間均不同精密度平行性重復(fù)性再現(xiàn)性備注方法√√√樣品√√√地點(diǎn)√√人員√√時(shí)間√√分散設(shè)備√√濃度水平333樣品（n）999室內(nèi)室間準(zhǔn)確度（accuracy）析結(jié)果與假定的或公認(rèn)的真實(shí)值之間符合程度的度量。形態(tài)不同、與其它組分的關(guān)系不同。靈敏度（sensitivity）濃度或單位量的待測物質(zhì)的變化所引起的響應(yīng)量變化的程度。分光光度法檢測限的確定應(yīng)的濃度值為檢測限。當(dāng)樣品中待測物質(zhì)的濃度值超過檢測上限時(shí)，無法定量。u對于消除了系統(tǒng)誤差的特定方法來說，精密度要求越高，則定量上限低于檢測上限越多。，對測量結(jié)果的精密度要求越高，則相應(yīng)的最佳測定范圍越小。本方法適用于以淫羊藿或淫羊藿提取物為主要原料生產(chǎn)的保健食品中淫羊藿苷的測定。儀器高效液相色譜儀：附紫外檢測器（UV）。液相色譜參考條件 色譜柱：C18柱，5μm，250mm。 流速：。L試樣溶液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以試樣峰面積通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量。分析結(jié)果的表述由y=a+bx得[（yxa）/b]V1103100X=MV2式中：X ——試樣中淫羊藿苷的含量，g/100g；yx ——試樣峰面積；V1 ——試樣稀釋倍數(shù)，mL；M ——試樣質(zhì)量，g；V2——樣品進(jìn)樣量，μg。標(biāo)準(zhǔn)起草說明和方法學(xué)驗(yàn)證1儀器及試藥：附紫外檢測器（UV）。純凈水為MilliQ純水系統(tǒng)二次制備。：澳美制藥生產(chǎn)。標(biāo)準(zhǔn)起草說明和方法學(xué)驗(yàn)證2樣品及處理：取10粒膠囊內(nèi)容物，混勻，精密稱定；或取10g丸劑，研細(xì)，混勻，精密稱定。標(biāo)準(zhǔn)起草說明和方法學(xué)驗(yàn)證3對照品，置25mL量瓶中加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，以淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量（181。此濃度標(biāo)準(zhǔn)品的峰高為相應(yīng)噪音的峰高的3倍。103μg。（k=2）標(biāo)準(zhǔn)起草說明和方法學(xué)驗(yàn)證12其他有關(guān)說明采用已建立的方法，測定了不同配方、不同劑型的保健食品中淫羊藿苷的含量。精密量取對照品溶液1mL，2mL，3mL，5mL，10mL，分別置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。測定法精密吸取供試品溶液10μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積積分值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算供試品溶液中淫羊藿苷的含量。標(biāo)準(zhǔn)起草說明和方法學(xué)驗(yàn)證樣品測定結(jié)果試樣名稱含量RSD%中國勁酒410 g /100mL%海狗丸210 g/100g%標(biāo)準(zhǔn)起草說明和方法學(xué)驗(yàn)證其他保健食品色譜圖（1中國勁酒；2海狗丸；3淫羊藿苷對照品）保健食品功效成分檢測實(shí)例分析實(shí)例2HPLCDADMS法同時(shí)測定保健食品中六種大豆異黃酮類成分的含量天然藥物及保健食品概況一．天然藥物的特點(diǎn)u 來源廣泛u 成分復(fù)雜多樣u 功效成分不唯一u 質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)難度大天然藥物及保健食品概況二、保健食品的特點(diǎn)u 概念u 來源u 食品、藥食同源、維生素、礦物質(zhì)u 質(zhì)量和安全性問題u 標(biāo)準(zhǔn)u 功效成分不明確u 違法添加嚴(yán)重u 外源性有害殘留物控制u 穩(wěn)定性、可控性檢測u 一致性u(píng) 均一性天然藥物及保健食品概況三、天然藥物及保健食品分析檢測的發(fā)展趨勢u功效性檢測u多組分、多成分、多指標(biāo)、常量、微量、代謝產(chǎn)物u安全性檢測u外源性有害殘留物檢測u內(nèi)源性有毒物質(zhì)的檢測u穩(wěn)定性、可控性檢測u一致性u(píng)均一性色譜質(zhì)譜技術(shù)在天然藥物和保健食品分析中的應(yīng)用一．功效成分檢測（常量、微量）二．安全性檢測（有害殘留、有毒成分）三．穩(wěn)定性和可控性（指紋圖譜技術(shù)）HPLCDADMS在天然藥物和保健食品分析中的應(yīng)用介紹大豆異黃酮類成分概況1. 功效和用途：大豆異黃酮作為天然的植物雌激素，具有明顯的緩解更年期綜合癥和抗骨質(zhì)疏松癥的功效，同時(shí)又有延緩衰老以及預(yù)防心血管疾病，降低乳腺癌、前列腺癌等疾病的發(fā)病率等多種功效，近年來引起國內(nèi)外廣泛的關(guān)注和研究。去溶劑氣（N2）流速：300L/：100700 m/z；選定m/z 255, 271, 285, 417，433和447進(jìn)行選擇性離子掃描（SIM）HPLCDADMS法用于多成分同時(shí)測定SAMPLE7201sample17201 5: Diode Array+1+1Range: +2+1+1 sample17201 2: SIR of 6 Channels ES+TIC1Time AU% 常規(guī)方法HPLCDAD計(jì)算因子HPLCDADMS對照品替代法應(yīng)用范圍1. 該法要求被測的每種成分均在其分析測定的線性范圍內(nèi)。2. 普通低聚糖：蔗糖、乳糖、麥芽糖、麥芽三糖和麥芽四糖等屬于普通低聚糖，它們可被機(jī)體消化吸收，不是腸道有益細(xì)菌雙歧桿菌的增殖因子。健康人的腸內(nèi)棲息著大量的雙岐桿菌,由于雙岐桿菌可制造出乙酸和乳酸,所以腸內(nèi)的酸堿度(PH值)偏向強(qiáng)酸性,這樣可以抑制病原菌的繁殖,防止人體受到感染。目前廣譜和強(qiáng)力的抗菌素廣泛用于各種疾病的治療,但它們在殺死病菌的同時(shí),也使人體腸道內(nèi)正常的菌群受到不同程度的破壞。(3)膳食纖維功能低聚糖屬于水溶性膳食纖維,具有膳食纖維的部分生理功能,比如有降低血清膽固醇的作用,還能促進(jìn)腸道廢物的排泄,有預(yù)防結(jié)腸癌的作用。（6）其他功能：降血脂、降血壓、預(yù)防骨質(zhì)疏松等。2. 主要品種有低聚果糖、大豆低聚糖、低聚木糖、低聚異麥芽糖、低聚甘露糖3. 我國衛(wèi)生部批準(zhǔn)的具有改善腸道潤腸通便功能的保健食品中使用的低聚糖有低聚果糖、大豆低聚糖、低聚異麥芽糖、低聚甘露糖等。3. 同時(shí)大豆低聚糖還具有抑制病原菌、防止便秘、腹瀉、保護(hù)肝臟功能、降低血清膽固醇、降低血壓、增強(qiáng)免疫功能、抗癌作用等多種生理功能，4. 另外，大豆低聚糖對糖尿病人可作為糖的替代品。目前，低聚果糖已被許多批準(zhǔn)為食物配料。FOS總含量大于等于50％的產(chǎn)品稱為普通型低聚果糖（G型），總含量大于等于90％的產(chǎn)品稱為高純度低聚果糖（P型）。實(shí)驗(yàn)所用乙腈為色譜純，其他溶劑為分析純，水為純凈水，過Millipore。方法3溶液的制備、蔗果三糖、棉籽糖、蔗果四糖、蔗果五糖、水蘇糖對照品適量，加流動(dòng)相溶液mL蔗果五糖方法4方法與結(jié)果，注入液相色譜儀，測定峰面積。，注入液相色譜儀，測定峰面積，結(jié)果蔗糖、蔗果三糖、棉子糖、蔗果四糖、蔗果五糖、水蘇糖的RSD分別為（n＝5）%，%，%，%，%，%，表明儀器精密度良好。結(jié)果蔗糖、蔗果三糖、棉子糖、蔗果四糖、蔗果五糖、%，%，%，%，%,%,表明本法重復(fù)性良好?！啊表?xiàng)下方法制備樣品溶液并測定，4個(gè)品種低聚糖類保健食品（樣品均為市售含低聚糖類產(chǎn)品不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品，分別編號(hào)1，2，3，4）樣品的測定結(jié)果見表2?？偨Y(jié)與討論視差折光檢測器(RID)u考慮到寡糖的特性和分析檢測的靈敏度及準(zhǔn)確度，本實(shí)驗(yàn)使用視差折光檢測器，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，檢測器內(nèi)部溫度設(shè)為35℃較適宜。另外，含量測定方法學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本法操作簡單，測定結(jié)果準(zhǔn)確，具有良好的重復(fù)性，可用于含低聚糖類成分保健食品的質(zhì)量控