【正文】 3. 改善目前部分對照品嚴重缺乏的局面4. 新的質量控制和評價思路尤其適合于天然藥物和保健食品等多功效成分的復雜體系擴展應用——膽酸類成分測定（HPLCELSD）1 236 74 58 Minutes牛黃熊去氧膽酸 牛黃膽酸鈉 牛黃鵝去氧膽酸熊去氧膽酸 豬去氧膽酸 膽酸鵝去氧膽酸 去氧膽酸mV擴展應用——低聚糖類成分測定（HPLCRID）1234 56 分鐘蔗糖（Sucrose）蔗果三糖（kestose）棉籽糖（Raffinose）蔗果四糖（Nystose）蔗果五糖（Fructofranosylnystose）水蘇糖（Stachyose）MV擴展應用——PUFAs（ω3）類成分測定（HPLCELSD）123 分鐘二十碳五烯酸(EPA) 二十二碳六烯酸(DHA)二十二碳五烯酸(DPA)mV擴展應用——馬兜鈴酸類成分測定（HPLCDADMS）T o ta l 4 : D io d e A r r a y100112 6 .2 3225 3 .3 65565 7 .5 02549 .6 5 e 53 2 .0 3444 7 .5 8%333 3 .1 62 .1 13T im e0 .0 0 5 .0 0 1 0 .0 0 1 5 .0 0 2 0 .0 0 2 5 .0 0 3 0 .0 0 3 5 .0 0 4 0 .0 0 4 5 .0 0 5 0 .0 0 5 5 .0 0 6 0 .0 0馬兜鈴酸C 7羥基馬兜鈴酸A 馬兜鈴酸D馬兜鈴酸B 馬兜鈴酸A 去硝基馬兜鈴酸A實例3RPHPLCRID法同時測定保健食品中6種常見低聚糖的含量提綱一．低聚糖的概況二．測定方法研究三．總結與討論一、低聚糖概況1. 低聚糖(Oligosaccharide)或稱寡糖，是由2～10個單糖通過糖苷鍵連接形成直鏈或支鏈的低度聚合糖，分功能性低聚糖和普通低聚糖兩大類。2. 保健食品中常見的功能性低聚糖有大豆低聚糖、低聚果糖、低聚異麥芽糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低聚乳果糖、乳酮糖、黑曲霉低聚糖等低聚糖的功能和保健作用(1)促進雙岐桿菌增殖，調整腸道功能。有研究表明:每天攝入10克低聚糖,連續(xù)服用10～15天,腸道內的雙岐桿菌活菌數(shù)可增加40倍。低聚糖的功能和保健作用(2)低能量低聚糖很難或不被人體消化吸收,所提供的能量值很低或根本沒有,可最大限度地滿足那些喜愛甜食及擔心發(fā)胖者的要求,還可供糖尿病人、肥胖病人和低血糖病人食用。而低聚糖能活化雙岐桿菌,使其合成營養(yǎng)素的能力增強。因此,對于嬰幼兒、老人和工作壓力大的人,從膳食以外適當補充一些低聚糖,對于人體健康尤其是消化系統(tǒng)的健康是非常有益的2003年日本低聚糖保健食品市場分布概況（共54億美元）2%%%%改善腸道功能%控制體重調節(jié)血糖防齲齒%64%骨健康調節(jié)血壓調節(jié)膽固醇我國常見的對低聚糖1. 我國對低聚糖的研究始于上世紀80年代，但形成工業(yè)規(guī)模和商品化則在80年代默契。2. 大豆低聚糖的生理作用主要是促進雙歧桿菌的增殖，從而起到調節(jié)腸道菌群平衡的作用。低聚果糖漿類似水溶纖維，能促進小腸蠕動，加快糞便排泄，清除腸內有害物，預防和減輕便秘。產品中低聚果糖總含量是指蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖和蔗果六糖占干物質的百分含量，其中，蔗果六糖含量不得超過FOS總含量的5％，超過部分不計。蔗糖、蔗果三糖、棉籽糖、蔗果四糖、蔗果五糖、水蘇糖對照品均購自北京禾境科技發(fā)展中心。min1；流動相由流動相水乙腈（30：70）等度進行洗脫，視差折光檢測器內部溫度設為35℃；理論塔板數(shù)按蔗糖計算不低于2000。mL（市售大豆低聚糖類保健食品，多為粘稠液體），用流動相溶液定容，充分搖勻，作為供試品溶液。6種低聚糖的線性關系成分回歸方程r蔗糖52Y=10X－10蔗果三糖52Y=10X－10棉子糖52Y=10X－10蔗果四糖52Y=10X－10蔗果五糖52Y=10X－10水蘇糖52Y=10X－10123A45 6對照品 分鐘B樣品 分鐘蔗糖（Sucrose） 蔗果三糖（kestose）棉籽糖（Raffinose） 蔗果四糖（Nystose）蔗果五糖（Fructofranosylnystose） 水蘇糖（Stachyose）MVMV方法 穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液10μL，共6次，測定峰面積，結果蔗糖、蔗果三糖、棉子糖、蔗果四糖、蔗果五糖、%，%，%，%，%，%，表明12h內測定結果穩(wěn)定。方法，按樣品處理方法平行提取并同法測定6種成分的含量。結果表明，以本法同時測定低聚糖中6種成分，其回收率結果良好。min1既可使低聚糖成分與其他可溶性糖進行有效分離,又可使保留時間縮短,一般一個樣品可在20min內完成。從測定結果可以看出不同企業(yè)生產353025的同類產品6種低聚糖成分的含量差別很大，因此反映出目前市場上該類產品的質量良莠不齊的現(xiàn)狀。要開發(fā)一個新的檢測方法，主要的工作在樣品。20151050成分樣品4樣品3樣品2樣品1%四、保健食品功效成分檢測其它有關問題樣品的前處理標準物質、標準溶液、基準物質檢驗結果和結論的表達樣品的前處理1. 樣品的制備和對樣品中待測測組分進行提取、凈化、濃縮的過程。u但RID對溫度、壓力、流量等物理性變化較敏感，另外，使用RID時不宜梯度洗脫。不同樣品中6種低聚糖成分的含量（%）樣品編號蔗糖蔗果三糖棉子糖蔗果四糖蔗果五糖水蘇糖1234總結與討論低聚糖屬于寡糖，其極性很強，用一般的反相色譜柱很難實現(xiàn)6種分子量相近成分的分離，因此選用氨基柱，達到了很好的分離效果。:1為標準測得蔗糖、蔗果三糖、棉子糖、蔗果四糖、蔗果五糖、。以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，計算其回歸方程，見表1。mLmL含大豆低聚糖保健食品樣品共4個品種均為市售。低聚果糖和大豆低聚糖的主要成分中文名稱英文名稱結構特點蔗果三糖kestoseGF2蔗果四糖nystose,GF3蔗果五糖fructofranosylnystoseGF4蔗糖sucroseGF1棉籽糖kestoseGFGa1水蘇糖raffinoseGFGa2二、測定方法研究1. 目前低聚果糖和大豆低聚糖類成分常見的分析方法：u 紫外分光光度法u 高效液相色譜法2. 這些方法在準確性、合理性、可操作性等方面均有欠缺，大多數(shù)方法只報道了測定其中1～2個成分的含量，不能較為全面地反應產品的真實質量。我國衛(wèi)生部已經批準低聚果糖為具有改善腸道和潤腸通便功能的保健食品原料。所以，大豆低聚糖類成分在近20年來逐漸引起國內外廣泛的關注和研究，并迅速發(fā)展成為一種新型的保健食品。大豆低聚糖1. 大豆低聚糖是大豆中所含的寡糖類物質的總稱，主要包括蔗糖、棉子糖、水蘇糖等。低聚糖的功能和保健作用1. 自然界含量少：u自然界中僅有少數(shù)幾種植物含有天然的功能性低聚糖,例如洋蔥、大蒜、天門冬、菊苣根等含有低聚果糖,大豆中含有大豆低聚糖。低聚糖的功能和保健作用(4)預防齲齒低聚糖不會引起牙齒齲變,因齲齒是由于口腔微生物特別是突變鏈球菌侵蝕而引起的,然而低聚糖并不是這些口腔微生物的合適作用的營養(yǎng)底物,因此不會引起牙齒齲變,有利于保持口腔衛(wèi)生。因此有目的增加腸道中有益菌的數(shù)量顯得十分必要。故雙岐桿菌是典型的有益菌群(俗稱長壽菌),但其菌落數(shù)會隨年齡增大而逐漸減少。3. 功能性低聚糖：包括水蘇糖、棉子糖、異麥芽酮糖、乳酮糖、低聚果糖、低聚木糖、低聚半乳糖、低聚乳果糖、低聚異麥芽糖、低聚異麥芽酮糖和低聚龍膽糖等。2. 該法尤其適用于化學和物理性質相似成分的分析（如黃酮類、皂苷類等）。2. 市場概況：我國市場上有關大豆異黃酮類成分的中藥、天然藥物、植物提取物、保健食品（進口、國產）名目繁多，質量參差不齊。標準起草說明和方法學驗證供試品溶液的制備取本品適量，研細，混勻，精，精密加入稀乙醇50mL，搖勻，稱重，超聲處理60分鐘，放冷至室溫，用稀乙醇補足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，濾膜濾