【正文】 為討論方便 ， 一般計算邊界的 i和 j， 即薄層下表面的透射光和上表面的反射光 。 不同 SX時 ， 吸光度與 KX間關(guān)系曲線 a． 透射法測定 lgT/T0與 KX間關(guān)系 b． 反射法測定 lgR/R0與 KX間關(guān)系 目前對 KubelkaMunk曲線處理采用兩類方法：曲線校直法和計算機(jī)回歸法。 3．熒光淬滅法 用紫外光照射熒光薄層板時，薄層板產(chǎn)生熒光 (背景 )，而在板上樣品斑點處，因樣品對紫外光有吸收，照到薄層斑點處的紫外光有所減弱，則產(chǎn)生的熒光也減弱，樣品呈暗色斑點。 內(nèi)標(biāo)一點法 C/CIS ＝ A/AIS 厚度下降 ， 展開后斑點擴(kuò)散較嚴(yán)重 。 ，方可掃描。展距要適宜，一般 Rf值在～ 。 粒度不均 ， 影響散射系數(shù) 。 (1)外標(biāo)一點法： C＝ FA (2)外標(biāo)二點法： C = F1A+F2 C1 = F1A1+F2 C2 = F1A2+ F2 解聯(lián)立方程得： F1 = （ C1 C2） /（ A1 A2） F2＝ (C1+ C2) – F1(A1+A2) 2．內(nèi)標(biāo)法 通常配 2份不同濃度的含不同量內(nèi)標(biāo)物的對照品溶液，并在一定量樣品溶液中加入已知質(zhì)量的內(nèi)標(biāo)物，將這兩種溶液分別點在薄層上，展開后，內(nèi)標(biāo)物與對照品分開，用同一波長掃描，測峰面積。本身具有熒光或經(jīng)過適當(dāng)處理后可產(chǎn)生熒光的化合物均可用本法測量。為消除影響，通常以空白板為基準(zhǔn)，測定相對透光率及相對反射率來計算薄層色譜斑點的吸光度。 KubelkaMunk指出，當(dāng)強(qiáng)度為 I0的單色光照射到厚度為 X的薄層后，光的反射和透射符合下述微分方程： di/dX = (S + K)i + Sj dj/dX = (S + K)j + Si S：單位厚度薄層固定相的散射系數(shù)； K為薄層色譜斑點或單位厚度薄層固定相的吸收系數(shù)； X為由載板表面算起的薄層厚度。 洗脫方法可采用滲濾法、多次浸出法、加熱溫浸法、索氏回流提取法等。 薄層色譜定量的方法可分為二類 ， 一類是薄層洗脫定量法 ， 將被測化合物從薄層上洗脫下來 ， 萃取后 ， 再選擇適當(dāng)方法進(jìn)行測定 。陰性樣品二階導(dǎo)數(shù)光譜呈近乎平直線條，見下左圖。 1． 牡丹皮 2． 枇杷葉 3． 蘆根 (ⅱ) 選擇測定波長 精取丹皮酚對照液 2ml，枇杷葉和蘆根蒸提液各 10ml，分別于 25ml量瓶中，加 度，混勻。 D=( dA/dλ )峰 ( dA/dλ )谷 =[( dε / dλ ) 峰 (dε / dλ ) 谷 ]CL 2）高階導(dǎo)數(shù)光譜法消除非線性干擾吸收及用于重疊峰的分離，定量 若干擾組分吸收對波長呈非線性 ， 為一近似的二次吸收曲線 ，則總吸收度為 A=ε λ CL + eλ 2 + fλ + g 對其求一階 、 二階導(dǎo)數(shù)得： dA/dλ =（ dε / dλ ） CL +eλ + f d2A/dλ 2=（ d2ε / dλ 2） CL +e 1)微分階數(shù) (n) n的選擇主要由干擾組分吸收曲線的形狀而定 。 常用的定量參數(shù)的選擇方法有： 1） 峰 谷法 測量相鄰峰 、 谷之間的距離 。 (4)導(dǎo)數(shù)光譜譜帶的極值數(shù)等于導(dǎo)數(shù)階數(shù)加 1。 （六）導(dǎo)數(shù)光譜法 1． 導(dǎo)數(shù)光譜及其特征 通常的吸收光譜 ， 其吸收度是波長的函數(shù) A=C 回歸方程 膽紅素在酸性氯仿溶液中的吸收光譜 為 Δ A= + (r=)。 （五）差示光譜法 1． 基本原理 差示光譜法的關(guān)鍵有二 ， 其一 ， 提供一個近似理想的參比溶液 。 將 (I)、 (Ⅱ) 按處方比例混合 ， 得二陳丸總干 擾成分液 (Ⅲ) 。 將樣品溶液在 ?s1與 ?R1，處測出 ?A樣 1值 ， 用以上 ?A1式求出靛藍(lán)的濃度及樣品中靛藍(lán)的含量 。 1． 等吸收波長法 1） 基本原理 根據(jù)左圖選出兩個波長 ?1與 ?2， 其選擇原則 是干擾組分 a在 ?1與 ?2處吸收度相等 ， 即 Aa?1= Aa?2。 常用定量方法： C樣 =C標(biāo) ?A樣 /A標(biāo) ； C標(biāo) ?A樣 /（ A標(biāo) ?C?樣 ） =樣品 %， C樣和 C標(biāo) 分別為樣品濃度和標(biāo)準(zhǔn)品濃度 ， C?樣 為樣品標(biāo)示濃度 。 3） 對有效成分已知但無理想的測定方法的中藥制劑 ， 可通過測定其中某些化學(xué)成分的含量間接控制有效成分的含量 。 3） 理化鑒別 藥典中常用的方法有：熒光法 、 顯色法 、 沉淀法 、 微量升華法；紙色譜法 、 薄層色譜 、 液相色譜 、 氣相色譜等 。 2．中藥制劑樣品的預(yù)處理 液 液萃取法 : 溶劑直接萃取 、 離子對萃取 ， 操作繁 ， 易乳化 。 注射液的取樣，灌注、熔封，滅菌前后應(yīng)經(jīng)過兩次分析。 粉狀制劑 （ 散劑 、 顆粒劑 ） 一般取樣 100g， 可從包裝的上 、 中 、下三層及周圍間隔相等部位取樣若干 ， 將所得樣品混勻 ， 按 〝 四分法 〞 從中取出所需供試量 。 國內(nèi)中藥制劑分析發(fā)展趨勢 (1)中藥有效成分的篩選與確定；應(yīng)用仿生學(xué) 、 基因組學(xué)等學(xué)科的理論和進(jìn)展 ， 發(fā)現(xiàn)新的藥物靶標(biāo) ， 從分子 、 基因 、 受體 、 組織和整體水平系統(tǒng)準(zhǔn)確地確定中藥復(fù)雜體系中的藥效物質(zhì)； (2)中藥有效成分的提取與分析；中藥化學(xué)成分非常復(fù)雜 ， 而且有效成分也具有相對性 。 三 、 影響中藥制劑質(zhì)量的因素 (一 )原料藥材的品種 、 規(guī)格 、 產(chǎn)地 、 藥用部位 、 采收季節(jié) 、 加工方法的影響 (二 )炮制方法的影響 （ 三 ） 生產(chǎn)工藝的影響 (四 )中藥制劑的包裝 、 貯藏 、 保管的影響 四 、 中藥制劑質(zhì)量控制的現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢 一 ） 國外藥物分析發(fā)展趨勢 基本的方法主要為：分離分析法 、 電化學(xué)法 、 光譜法和聯(lián)用分析方法等 。 化學(xué)成分 的多樣性 、 復(fù)雜性 。 ? 第一節(jié) 概 述 ? 一 、 中藥制劑分析的對象 中藥制劑分析的對象應(yīng)該是制劑組方中起主要作用的 有效成分 、 毒性成分 、 或影響療效的化學(xué)成分 ， 對其做出 定性 、 定量等各方面的評價 。 3） 中藥制劑由多種單味藥材組成 ， 所含化學(xué)成分相互影響。 手性藥物 作為化學(xué)藥物的特殊群體， 以 HPLC和 CE為主要拆分手段的手性藥物分析 方興未艾，已成為全世界藥物分析的研究熱點。 一 、 取樣 1． 供試品要具有代表性：原則是均勻 、 合理 。 固體中成藥（丸劑、片劑）成品取樣一般為 100g，壓片后取樣200片。 其它劑型的中成藥，可根據(jù)具體情況隨意抽取一定數(shù)量，作為隨機(jī)抽樣。 色譜法 （ 液 固萃取法 ） ， 常用 凈化劑有三氧化二鋁 、 氧化鎂 、硅膠 、 活性炭 、 大孔樹脂 、 離子交換樹脂 、 硅藻土 、 鍵合相硅膠C1 C8等 。 2） 特殊雜質(zhì)型 原料藥