【正文】 材摻假 、 有毒成分的限量檢查 。 6） 貴重藥材在制劑中投料量應加以測定 。 可分別在?1max、 ?2max處用單一物質的定量方法從混合物中測定 a、 b的濃度 。 從左圖可知靛藍在 540nm、 的等吸收波長；靛玉紅卻是在 514． 2nm和 566nm處有等吸收波長 ， 而空白樣品液在上述 波長處的吸收曲線幾乎成一條直線 、 不干擾測 圖 213 靛藍 、 靛玉紅的吸收曲線 (1)靛藍 (2)靛玉紅 (3)無青黛樣品 定 ， 選取靛藍的測定波長 ?s1＝ 566 nm、 參比 波長 ?R1= nm。 1． 基本原理 左圖中 ? ? ?3為在任一吸收曲線上 ， 任意 選擇的三個波長 。 其他成分對 陳皮甙的測定有干擾 ， 用 6批不同來源的原料按上法制備 (Ⅲ) ， 并測其吸收光譜 ， 結果譜形相似 。根據吸收度加和性原理 ， 則 Δ A=A樣 A參 =(Ax +Az)(Ay + Az)= Ax Ay =(ε x ε y)CL 差示光譜中的振幅 ， 即最大吸收與最小吸收之差值 ， 也可進行定量測定 ， 這可提高本法的專屬性 。實驗表明三種成藥Δ A值為零或幾乎為零。 對波長求導 ， 將其微分系 數 （ dnA/dλ n～ λ ） 對波長掃描可得導數光 譜圖 。C 2） 基線法 取相鄰二同向峰 (正或倒 )的 公切線為基線 ， 以中間的反向峰峰尖至基線 的距離為測量值 。 3)中間波長 (λ m) 通常需選兩個 λ m， 即 λ m λ m2 。 蒸提液在 ／ L氫氧化鈉溶液中的光譜圖 一階導數光譜圖 1． 肺露 2． 丹皮酚 3． 枇杷葉 4． 蘆根 1． 丹皮酚 2． 枇杷葉 3． 蘆根 (ⅲ) 標準曲線 精密量取丹皮酚對照液 ()、 、 ?? ，分別于 25ml量瓶中，加 ，混勻，以 ，在測定波長處測吸收度，計算一系列 Δ A值。 樣品 ， 膽酸對照品溶 膽酸 、 豬去氧膽酸二 對照品溶液 液二階導數光譜 階導數光譜 二階導數光譜 A． 樣品 B. 膽酸對照品 1． 膽酸 2． 豬去氧膽酸 (ⅱ) 測定條件 零階光譜掃描波長： 190~550nm；二階導數光譜掃描波長， 360～ 420nm； Δλ =5nm。 在板的兩邊 ， 點上對照品作為定位劑 ， 如圖 A， 然后 ， 在選好的溶劑中層開 ， 斑點要集中 ， 不應有拖尾現象 。 ，目前 ， 用薄層掃描儀掃描測定斑點中化合物含量的方法已成為薄層定量的主要方法 ， 此法也可用于紙色譜 、 電泳凝膠及其他介質的色譜 。 X=0時 ， j= 0， i =I0T X=X時 ， i =I0， j=I0R 則 T =b/[asinh（ bSX） + bcosh（ bSX） ] R = sinh（ bSX） /[asinh（ bSX） + bcosh（ bSX） ] SX稱作散射參數 ， 它與薄層厚度 、 散射系數有關 。島津 CS系列采用前者， CAMAG儀器采用后者。測定時，由熒光減弱的程度測出樣品中被測物含量。F F＝ C/CIS 透射法測定時 ， 厚度增加 ， 峰面積值增加； 反射法測定時 ， 厚度增加 ， 峰面積值減少 。 顯色后應注意斑點的穩(wěn)定性，測量時必須在穩(wěn)定的時間中進行。 展開時溫度變化應盡量小。[A1/（ AIS） 1 + A2/（ AIS） 2] (四 )影響薄層掃描定量的因素 1． 吸附劑性能及薄層質量 薄層厚薄要均勻 ， 吸附劑粒度要均勻 。 其二看標準曲線是否通過原點 ， 若通過原點 ， 分析樣品時用外標一點法定量 ，若不通過原點 ， 分析樣品時用外標二點法定量 。熒光測定法與吸收測定法不同，其測量值與斑點形狀無關。 薄層色譜斑點的吸光度： 理想的空白薄層板的 K=0，但一般 K?0。 X為固定相厚度 。 洗脫溶劑，一般應選極性較大，對待測化合物溶解度亦較大的溶劑，如乙醚、氯仿、丙酮、乙醇、甲醇等，在單一溶劑洗脫效果欠佳時，可采用混合溶劑。 第二節(jié) 薄層色譜法 薄層色譜法 (TLC)是一種微量的分離分析技術 ， 具有設備簡單 ，檢出靈敏 ， 測定快速 ， 應用廣泛等特點 。 2）清宮沖劑中膽酸的二階導數光譜測定法 （ ⅰ ）干擾情況的考察 膽酸對照液與樣品的二階導數光譜顯示，在 397nm， 386nm波長處有相應的吸收峰和吸收谷。 2nm。 3． 共存組分干擾吸收的消除 1） 一階導數光譜法消除線性干擾吸收 A=ε λ CL + aλ + b dA/dλ = （ dε / dλ ） CL + a 說明線性干擾在一階導數光譜中對定量參數 D(振幅 )沒有影響 ，D只與待測組分濃度成正比 。CL ； 式中 L為定值 ， 給定物質在特定波長處的 dε /dλ 、d2ε /dλ 2?? dnε /dλ n也是定值 ， 因此 ， dA/dλ ∝C ，d2A/dλ 2∝C ?? dnA/dλ n∝C 。 (3)偶階導數光譜的形狀與零階光譜類似 ， 零階光譜的峰值對應于偶階導數光譜的極值 ， 零階光譜的拐點在偶階導數光譜中通過零點 。 本法加樣回收率：六應丸為 ％， RSD=％；六神丸為 ％， RSD=％；牛黃消炎丸為 ％， RSD＝ ％。 準確 吸取 0， 0． 1， 、 于 10ml量瓶中 ， 加冷酸性氯仿至刻度 ， 測其 光照前后在 453nm處的吸收度 。 本法平均回收率： ％ ， RSD： ％ 。 ⅱ) 二陳丸空白粉提取液的制備：按處方比例 配制除陳皮以外的二陳丸空白粉 ， 用上述溶 劑提取 ， 得二陳丸空白粉提取液 (Ⅱ) 。C 2 + (r2＝ ) ⅲ )含量測定：精稱喉痛消炎丸細粉約 ， 用氯仿提取至無藍色 ， 用氯仿定容于 50ml量瓶中 ， 再精密吸取 5ml置10ml量瓶中 ， 加氯仿至刻度即為樣品溶液 。 （ 三）雙波長測定法 中藥制劑分析中常用的方法為等吸收波長法和系數率法 。 一般不選擇光譜最左邊的末端吸收峰作定量測定的波長 。 2） 大致明確有效成分 ， 要求測定這些成分的總量 。 可以通過這些特征 ， 對中成藥進行定性鑒別 。 適宜遇熱不穩(wěn)定的有效成分； 連續(xù)回流法 ， 樣品置索氏提取器中 ， 利用溶劑反復提取 ， 提取效率高 ， 溶劑少 ， 遇熱不穩(wěn)定的有效成分不宜用此法； 超聲波提取法 ， 樣品置容器中 ， 溶劑提取 ， 效率高 ， 一般樣品30min內即可完成 。一般取樣量為 100g。 貴重藥品可酌情取樣 。 2。 在進行質量分析時首先以中醫(yī)理論和用藥原則為指導 ， 進行組方分析 ， 按功能主治分出主 、 輔 、 從 、 次藥味和藥群 ， 選擇某合適的化學成分為指標來說明其與質量的關系 。 有的中藥更由于形態(tài)相似 ， 容易 誤用 。 二 、 中藥制劑分析的特點 一 ） 中藥制劑分析的對象是復雜的混合物 。 劑型繁多 ， 所用之輔料多