【正文】 展開用的溶劑必要時需經(jīng)過預處理。 厚度增加 ， Rf值增大 。用對照品與內(nèi)標物的峰面積比為縱坐標，用二者的濃度比為橫坐標作圖，所得曲線即為標準曲線。熒光測定法選擇性高，因激發(fā)光與熒光波長均能加以選擇，可避免一些其他組分的干擾，其靈敏度比吸收法高 100～ 1000倍，最低可測到 10～ 50pg樣品。 透射法 A= lg（ T/T0） 反射法 A= lg（ R/R0） lgT/T0或 lgR/R0為儀器檢測部分所獲得的信號，它們和 KX間的關系曲線相當于一般分光光度法中的 AC曲線，在溶液中， AC曲線為一直線，而在薄層上， lgT/T0或 lgR/R0和濃度間不呈線性關系，比較下圖可以看出彎曲度隨 SX增加而增加。 i與 j的一般解為： i = Asinh(bSx) + Bcosh(bSx) j = (aA bB)sinh(bSx) + (aB bA)cosh(bSx) A， B常數(shù) ， a=（ S+K） /S， b=（ a2 1） 1/2 ， Sinh=（ ex ex） /2； Cos= （ ex + ex） /2， A/B=a/b。對不易洗脫的化合物，也可不經(jīng)洗脫，在吸附劑中加入適當?shù)娘@色劑，使其定量反應，然后離心或過濾后再進行測定。另一類是在展開后的薄層上直接進行測定 。豬去氧膽酸的二階導數(shù)光譜將 360～ 420nm區(qū)間的吸收消除為二次無關吸收，不干擾樣品中膽酸的含量測定如下中圖。以 ，繪制吸收光譜（零階）和一階導數(shù)光譜，如下圖。 n越大 ， 分辨力愈強 ， 但信噪比將降低 。 左圖中的 h1 高斯曲線及其一至四階導數(shù)曲線 導數(shù)分光光度的優(yōu)點： a． 能檢出兩個或兩個以上的重疊吸收帶； b．能分辨在強吸收曲線“肩部”的弱吸收帶； c．能精密確定單一吸收峰位置； d．能消除基線（背景）的影響； e．能進行定量測定。E=C a． 光照前 b． 光照后 除光照反應外 ， 其余操作均需避光 。其二 ， 使待測組分發(fā)生特征光譜變化 ， 而賦形劑或其他共有組分卻不引起光譜變化 ， 因而可消除它們的干擾 。 分光光度計分別測定陳皮甙對 照品和 (Ⅲ) 的吸收光譜 。同樣 ， 在 ?s2與 ?R2處測出 ?A樣 2， 用以上 ?A2式求出靛玉紅的濃度及樣品中靛玉紅的含量 。 而待測組分 b在 ?1與 ?2處的差吸 收度 ?A應比較大 ， 再在 ?1與 ?2處測混合組分 溶液的差吸度 ?A。 ：從標準品吸光度 濃度曲線求得樣品濃度 。 4） 對有效成分不明確的中藥制劑可采用以下方法：選擇可能的有效成分或主要成分 （ 指示性成分 ） 進行含量測定；測定藥物的總固體量；選擇在原料加工炮制時或制備 、 貯存過程中易損失 、 破壞的成分進行含量或限量測定 。 中藥定性鑒別應選擇其中主藥 （ 君藥 ） 、 輔藥 （ 臣藥 ） 作為主要對象 ， 其次應鑒別毒劇藥及貴重藥材 。 沉淀法： 采用某些試劑沉淀雜質(zhì)或沉淀待測成分 。灌封前將注射液混合均勻，如 液體取樣原則取樣，再按標示量及供試量分別取部分進行檢驗；經(jīng)滅菌后的注射液須按原來的方法進行分析檢驗。 液體制劑（口服液、藥酒、糖漿、酊劑等）一般取樣 200ml。 為了高效率地提取中藥有效成分 ， 應用各種現(xiàn)代提取技術 ， 如 SFE、 SWE、 UAE等 ， 可用于中藥復雜體系中有效成分的提取 ， 利用準確的儀器分析方法和計算機技術 ， 通過因子分析方法對中藥復雜體系進行定性定量評價； (3)中藥藥效物質(zhì)與中醫(yī)藥理論相關性研究；利用現(xiàn)代分析方法研究中藥復雜體系中藥效物質(zhì)與中醫(yī)藥理論的定量關系 ， 并結合現(xiàn)代醫(yī)學理論 ， 闡明其作用機制 ， 在此基礎上對中藥及其復方進行全面質(zhì)量控制 。 各種色譜及其聯(lián)用技術 已成為占主導地位的常規(guī)分析方法 ， 如HPTLC、 HPLC、 GC、 HPCE、 LCMS聯(lián)用等 。 1 1） 由多味中藥組成的復方制劑 ， 其化學成分極為復雜多樣。中藥制劑分析 ? 第一章 緒 論 ? 中藥制劑分析是以中醫(yī)藥理論為指導，運用現(xiàn)代分析理論和方法研究中藥制劑質(zhì)量的一門應用學科。 2) 各種化學成分在中藥中的含量相差懸殊 。 體內(nèi)藥物分析研究 ， 趨向于采用 在線的聯(lián)用微透析分析技術 ，如 online MDCE、 online MD— LC等 。 第二節(jié) 中藥制劑分析工作的基本程序 中藥制劑分析程序一般可分取樣 、 測試樣品溶液的制備和測定（ 包括定性鑒別 、 雜質(zhì)檢查 、 含量測定 ） 等 。同時須注意均勻取樣。已封好的安瓿，取樣量一般為 200支。 蒸餾法： 利用待測成分或其分解產(chǎn)物具有揮發(fā)性的特點 ， 采用蒸餾法 、 收集餾液進行含量測定 ， 必須明確測定成分的結構才可用此法 。 2．檢查 按我國藥典要求 ， 中藥制劑需要檢查的項目大致可分為三類： 1） 污染型 中成藥一般雜質(zhì)檢查項目有：異物 、 灰分 、 酸不溶性灰分 、 重金屬 、 砷鹽等；衛(wèi)生學檢查：微生物細菌檢查；以及有的產(chǎn)品要求農(nóng)藥殘留量的檢測 。 5） 中藥制劑中含有劇毒性成分則要測定其含量 。 二、 混合物的含量測定 一 ） 混合物中有 a， b兩種組分 ， 若兩者的最大吸收峰不重合 ，且在 a的 ?1max處 ， b無吸收；在 b的 ?2max處 ， a無吸收 。 設 ?1為參比波長 ， ?2為測量波長 ， 則 等吸收波長法原理示意圖 ?A=Aa+b?2 Aa+b?1 =（ Aa?2 + Ab?2） （ Aa?1 + Ab?1） =Ab?2 Ab?1 =（ ?b?2 ?b?1） CbL 2）應用舉例 喉痛消炎丸中靛藍 、 靛玉紅的測定 ⅰ ） 選擇等吸收波長：用 2～ 8?g/ml的靛藍及靛 玉紅的氯仿溶液在分光光度計上掃描 ， 并用同 法掃描出空白樣品溶液的吸收曲線 。 2 ．聯(lián)立方程法 A a+b?1=Aa ?1+Ab ?1=?a ?1 CaL+ ?b ?1 CbL A a+b?2=Aa ?2+Ab ?2=?a ?2 CaL+ ?b ?2 CbL （ 四）三波長測定法 此法要求在任一吸收曲線上 ， 能找出滿足下述條件的三個波長：即在干擾組分的吸收曲線上 ， 與三個波長相應的點 ， 能在一條直線上 。 見左圖 。 設 Ax、 Ay分別代表兩種不同介質(zhì)中待測組分在測定波長處的吸收度 ， Az代表背景和干擾組分的吸收度 ， 其不受測定介質(zhì)改變的影響 。 4）分別制得六應丸、六神丸、牛黃消炎丸的空白樣品對照液，在 453nm處測得各自光照前后的 A值，計算 Δ A。? （ λ ） 。 2． 基本原理 吸收光譜服從 Beer定律： A＝ ε h 2(振幅 ， 用 D表示 )。 2)波長間隔 (Δλ ) Δλ 愈大 ， 測量靈敏度增大 ， 但分辨率降低 ， 通常 Δλ 選 1~2nm為好 。按中間波長選擇原則，選 330和 370nm 為中間波長，則測定波長為 328nm和 332nm， 368nm和 372nm。下右圖表明，膽酸二階導數(shù)光譜，其峰谷振幅值 D與濃度具有良好的線性關系，因此，可用 397nm， 386nm兩波長的振幅 D為定量參數(shù)，用峰 谷法進行測定。 一 、 薄層洗脫定量 1． 點樣 在薄層板的起始線上 ， 將定量的樣品液點成一條狀 ，點樣時應避免任何損失 。 二、薄層上直接定量 薄層上直接定量的方法有目測法 、 測面積法 、 儀器測量法 。