【正文】 程中生成的差向異構體。限度為： 三批樣品中不存在 2乙酰 2去酰胺四環(huán)素雜質，如其他樣品含有 2乙酰 2去酰胺四環(huán)素時，可將該雜質作為其他雜質控制，規(guī)定其他雜質限度為 % ， l L 1醋酸銨 l (1)采用酸性流動相：氯酸 二甲亞砜 水(8:525:467)(pH小于 )取代了 2023年版的流動相，分離效果如下。金霉素分離圖圖 4.. 金。主峰與其有關物質的峰形和分離效果受柱溫影響較大，本品檢測時控制柱溫是有必要的。圖 .L 1醋酸銨 二甲基甲酰胺 四氫呋喃 (600： 398： 2)，內含 EDTA鈉（與 2023年版）鹽酸金霉素高氯酸 二甲亞砜 水 (8:525:467)(pH小于 )l L 1醋酸銨 2023年版藥典的起草時對流動相作了較大修改，對多西環(huán)素及其制劑色譜分離的影響因素包括水相緩沖鹽的種類和濃度、 pH值、掃尾劑、有機相、柱溫等進行了系統(tǒng)的考察，確定了新的流動相 . l ≤% ，差向脫水四環(huán)素 ≤% 。2023年版藥典標準中土霉素作為特定雜質的單獨規(guī)定限度，因多批原料及片劑中均未檢出土霉素，故將土霉素作為其他雜質控制，另增加對其他單個雜質和總雜質的限度控制。Hyclate）中有 6個潛在雜質，分別命名為雜質 A、 B、 C、 D、 E、 F，其中雜質 A一般采用 TLC/HPLC、 IR和氯化物反應，部分品種增加了紫外鑒別。l 在無菌檢查去抑菌作用時可以利用該性質。在紫外光照射下具有強烈熒光。(1)酸性條件下 :l 四環(huán)類抗生素在酸性（ ～ ）溶液中， A環(huán)上 4位手性碳原子構型易發(fā)生差向異構化反應，形成差向化合物，四環(huán)素、金霉素、去甲環(huán)素等很容易差向化，形成 4差向異構體，l 性狀 表 含量測定HPLC ELSD法柱前衍生化 HPLCUV法微生物 檢 定法 ( 管碟法 )微生物 檢 定法 (濁 度法 ) 微生物 檢 定法 ( 管碟法 或 濁 度法 ) 7 4 5 2 21l 四環(huán)素類抗生素l 四環(huán)類抗生素的基本特點，l l 例如： 2023年版藥典中 。硫酸鹽 圖 柱前衍生 HPLC方法首次應用在中國藥典氨基糖苷類抗生素有關物質檢查項中，l ELSD屬于通用型檢測器 ,2023年版藥典除硫酸卡那霉素，硫酸慶大霉素 ,硫酸小諾霉素三個原料及其制劑共 9個品種的組分、特定雜質檢查方法為 HPLCELSD方法，l l 硫酸阿米卡星 阿米卡星 （ 1） TLCl 少數(shù)品種有顯色反應鑒別。l 依托紅霉素為紅霉素酯類衍生物，故在微生物法測定含量時，必須使藥物完全水解成紅霉素，有抗菌活性后，方能測定抑菌能力，l 本版藥典進行了充分研究后將水解條件由“37℃ 水浴中放置 6小時 ”修訂為 “60℃ 水浴中放置 4小時 ”，縮短實驗時間。 照品外 標 法 計 算羅紅 霉素片羅紅 霉素分散片 , 照品外 標 法 計 算 ,羅紅 霉素干混 懸劑 , , 照品外 標 法 計 算 ,羅紅 霉素膠囊 , , 照品外 標 法 計 算 , 酶 的加量以 單 位表示 ,羅紅 霉素 顆 粒（非包衣） , , 照品外 標 法 計 算 ,克拉霉素片 , , 照品外 標 法 計 算 ,克拉霉素膠囊 , , 照品外 標 法 計 算 ,表 (2) 溶出度 測 定 (溶出液 HPLC法 測 定 )l 含量測定l 除個別品種（如克拉霉素、羅紅霉素、阿奇霉素）采用 HPLC法外，其他品種均采用微生物檢定法測定效價，見表 。l l 因制劑中某些輔料與硫酸也會發(fā)生顯色反應，采用硫酸顯色法時 ,采用自身對照法，以抵消輔料的干擾；l 同時多組分品種亦采用自身對照法，以消除組分比例差異對結果的影響。表 有關物質測定 (1) 品種 方法（ HPLC）丙酸交沙霉素 對 照 波 長 231nm交沙霉素 對 照 波 長 231nm克拉霉素 克拉霉素片克拉霉素膠囊克拉霉素 顆 粒 對 照2． 檢測 波 長 210nm阿奇霉素阿奇霉素干混 懸劑阿奇霉素片阿奇霉素分散片阿奇霉素膠囊阿奇霉素 顆 粒 TLC法修 訂為 HPLC法，無 該項檢查 的已增 訂（阿奇霉素 Gx為 紅 霉素 A偕 亞 胺 醚為 ）與不加校正因子（阿奇霉素 B和其他 單 個 雜質 ）的自身 對 照 波 長 210nm 劑 用，不同限度 劑 扣除相 對 保留 時間 輔 料峰紅 霉素 （ 紅 霉素 烯 醇 醚為 雜質 1為 ）與不加校正因子的自身 對 照 波 長 215nm乳糖酸 紅 霉素注射用乳糖酸 紅 霉素（ 紅 霉素 烯 醇 醚為 雜質 1為 ）與不加校正因子的自身 對 照 波 長 215nm表 有關物質測定 (2) 品種 方法（ HPLC）硬脂酸 紅 霉素硬脂酸 紅 霉素片硬脂酸 紅 霉素膠囊（ 紅 霉素 烯 醇 醚為 雜質 1為 ）與不加校正因子的自身 對 照 波 長 215nm依托 紅 霉素 紅 霉素 標 法 計 算 檢測 波 長 190nm麥白霉素 A1為 基準 ,外 標 法 計 算各有關物 質總 量（不得 過 25%）檢測 波 長 232nm麥白霉素片 A1為 基準 ,外 標 法 計 算各有關物 質總 量（不得 過 30%） 波 長 232nm麥白霉素膠囊 A1為 基準 ,外 標 法 計 算各有關物 質總 量（不得 過 30%） 波 長 232nm羅紅 霉素羅紅 霉素片羅紅 霉素分散片羅紅 霉素膠囊 對 照 酰 胺峰外，并 對該 峰定位。紅 霉素紅 霉素 腸 溶片紅 霉素 腸 溶膠囊紅 霉素 A紅 霉素 B紅 霉素 C修 訂 HPLC法紅 霉素 A： 對 照品外 標法 計 算；紅 霉素 B：加校正因子自身 對 照 計 算；紅 霉素 C：自身 對 照法計 算。l 紅霉素腸溶膠囊 訂項 目概況 見 表 表 2023年版 藥 典大 環(huán) 內 酯類 品種增修 訂項 目 項目 修訂 增訂 刪去結 構式 1含量限度 5性狀 3鑒別 3（ HPLC 1項 和 IR 2 項 ）23(HPLC 11項 ， 顏 色反應 和 TLC各 6項 ) 3（IR）釋 放度 /溶出度 13 1組分與有關物質 26 3殘留溶 劑 1干燥失重 2可 見 異物和不溶性微粒 1含量 37 其中 濁 度法增 訂 21項 l 本類抗生素質量標準要點l 鑒別 l 標準中凡用 HPLC法測定組分含量以及有關物質的品種均采用 HPLC法作為鑒別，并增加部分品種的 TLC法鑒別，大部分品種 HPLC法和 TLC法并列，可任選一項；l 原料藥也有用 IR作為鑒別，如羅紅霉素；l 有紫外吸收特性的品種也可用 UV法作為鑒別，如麥白霉素、交沙霉素；l 部分品種采用顯色反應。l 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 液（用 1mol/L磷酸溶液調節(jié) pH值至 177。取拉氧頭孢對照品適量，加水溶解并稀釋制成每 1ml中約含 ， 取上述溶液適量，在 80℃ 水浴中加熱 30分鐘，冷卻，取 10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，拉氧頭孢 R異構體、拉氧頭孢 S異構體依次流出；拉氧頭孢 R異構體和拉氧頭孢 S異構體的分離度應不小于，兩主峰與相鄰雜質峰的分離度均應符合要求 。m以上的微粒不得過 600粒。l 如 :注射用頭孢他啶，因含有 10%的碳酸鈉對水分測定有干擾，改為 60℃ 真空減壓干燥，l 頭孢地尼膠囊也改為 60℃ 真空減壓干燥。l 供試品溶液的制備 取本品約 ，精密稱定，置頂空瓶中，精密加入內標溶液 ，密封瓶口，作為供試品溶液。l 標準中增加有機溶媒檢查的品種較多l(xiāng) 本檢查法大多采用涂層毛細管柱為色譜柱，等溫，程序升溫，頂空進樣，l 內標法，外標法計算結果。%* F值為對照品溶液濃度 (μg/ml) 與峰面積的比值表 F值 的比 較表 l 擬采用直徑較細，內徑為 1cm,長為 30cm的玻璃柱作為色譜柱。l 2023年版藥典擴大到 11個品種的 21個藥品標準中均有高分子雜質檢查。l 在檢測中根據(jù)雜質最大吸收波長的不同，采用雙波長測定，l 如：頭孢拉定有關物質測定時，用不同波長 測定不同雜質，l 用 220nm波長檢測雙氫苯苷氨酸，l 用 254nm波長檢測其他雜質。l 如：頭孢地尼規(guī)定 :l 主成分頭孢地尼峰保留時間約為 22分鐘 ， E異構體峰保留時間約為頭孢地尼峰保留時間的 ，理論板數(shù)按頭孢地尼峰計算不低于 7000， 頭孢地尼峰與其相對保留時間 。少數(shù)有用 UV法作為鑒別。 l 14. 大容量注射液與眼用制劑增加滲透壓摩爾濃度檢查。l 11. 為保證臨床使用的安全有效，供注射用 β內酰胺抗生素，除檢查有關物質外，增加高分子聚合物的檢查。l 7. 氨基糖苷類用 HPLCELSD替代 TLC檢查有關物質與組分，提高檢測靈敏度；l l 同時可用該方法測定硫酸鹽（ SO4）的含量。l 有很多品種采用 HPLC梯度洗脫法測定有關物質，如：頭孢地尼，頭孢唑林鈉，拉氧頭孢鈉 , 阿莫西林及其復方制劑，氨芐西林等。l 對雜質數(shù)多或多組分的、分離難度大的品種，中檢所提供混合雜質對照品，多組分對照品及標準圖譜 .l 如阿莫西林、阿莫西林克拉維酸、氨芐西林、吉他霉素、乙酰螺旋霉素等。 硫酸卡那霉素及制劑的有關物質卡 B以及含量測定， 硫酸慶大霉素及制劑的慶大霉素 C組分及有關物質測定， 硫酸小諾霉素及其制劑的組分測定。 中國藥典 2023年版抗生素品種 增修訂概況 一 、概況 : 2023年版藥典抗生素品種收載情況，見表： 品種 原料 新增 制 劑 新增 總 數(shù) 新增β 內酰 胺類頭孢 菌素 類 27 11 48 19 75 30青霉素 類 與 酶 抑制 劑 20 3 28 6 48 9碳青 酶 烯類 及 單環(huán) β內 酰 胺 類2 1 2 1 4 2大 環(huán) 內 酯類 13 2 35 4 48 6氨基糖苷 類 14 25 1 39 1四 環(huán) 素 類 6 12 18利福霉素 類 1 7 8林可霉素 類 2 4 6酰 胺醇 類 4 11 15多 肽類 與 肽類 4 2 4 2 8 4抗真菌 類 3 3 6抗 腫 瘤抗生素 類 6 2 6 1 12 3磷霉素 類 3 5 8其他抗生素 3 4 7喹諾酮類 12 3 34 5 46 8總計 120 24 228 39 348 63l二、 2023年版藥典抗生素類藥標準增修訂要點 :l 鑒別項下盡可能應用專屬性強的鑒別反應 , 如：光譜法： IR 色譜法： HPLC TLC等，與鈉、鉀、鹽酸鹽、硫酸鹽的鑒別反應 . 標準中鑒別反應 HPLC與 TLC二法并列。 如 : 硫酸依替米星及制劑的有關物質 ,硫酸鹽及含量測定。l 在系統(tǒng)適用性試驗中均規(guī)定了主峰與指定雜質峰的分離度，l 梯度洗脫時標明主峰的保留時間，使方法的可操作性強，保證了結果的準確性。l 4. β 內酰胺類抗生素的有關物質檢查方法與國外藥典基本一致，在分離度試驗中根據(jù)實際情況進行修改，更有利方法的可操作性。并根據(jù)國內產品實際情況，制定合理的限度。l 另由于生產工藝的不同，各生產廠使用的有機溶媒也不同，同一品種中可能有幾十種的溶媒，為方便操作、經試驗在標準中規(guī)定各溶劑的相對調整保留時間（ RART），檢查時可先做供試品，從供試品中檢出的溶媒的 RART與規(guī)定的 RART比較，確定為何種溶媒時，再進行對照品測定，可減少工作量，大大降低檢驗 成本 ， 提高工作效率。l 13. 更多的品種用細菌內毒素的檢查替代熱原檢查 。原料： l l l 固體口服制劑一般用 HPLC或 HPLC與 TLC作為鑒別，二法并列。 總 數(shù) 有關物 質 HPLC梯度洗脫 原料 20 20 11 制 劑 28 23 15 表 碳青霉烯類與單環(huán) β 內 酰 胺 類 有關物 質檢查 總 數(shù) 有關物 質 HPLC梯度洗脫 原料 2