【正文】 2 1 制 劑 2 2 1表 青霉素類與酶 抑制劑 有關(guān)物 質(zhì)檢查l 采用梯度洗脫時，由于不同色譜柱的行為略有差異，故在系統(tǒng)適用性試驗中，應(yīng)規(guī)定主峰的出峰時間，主峰與已知雜質(zhì)的分離度等要求。l 如：頭孢拉定中已知雜質(zhì)：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l 雙氫苯苷氨酸（ 220nm）l 頭孢氨芐l 頭孢氨芐中已知雜質(zhì)：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l α 苯苷氨酸l 頭孢羥氨芐中已知雜質(zhì)：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l α 對羥基苯苷氨酸l 頭孢哌酮鈉中已知雜質(zhì)：l 雜質(zhì) A（原稱為頭孢哌酮降介物 β ）l 如：頭孢羥氨芐 : l 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，含 α 對羥基苯甘氨酸和 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸按外標(biāo)法以峰面積計算， 均不得過 %；其他單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面（ %），其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的 3倍（ %） ,供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積 .l 如：頭孢哌酮鈉l 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，含 雜質(zhì) A按外標(biāo)法以峰面積計算， 不得過 %，其他單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的 2倍（ 2％），其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的 3倍（ %） ,供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積 可忽略不計。 （ 2023年版新增 19個品種） 原料 制 劑 頭孢唑肟鈉 注射用頭孢唑肟鈉 頭孢替唑鈉 注射用頭孢替唑鈉 頭孢尼西鈉 注射用頭孢尼西鈉 頭孢噻吩鈉 注射用頭孢噻吩 磺芐西林鈉 注射用磺芐西林鈉 阿洛西林鈉 注射用阿洛西林鈉 美洛西林鈉 注射用美洛西林鈉 氯唑西林鈉 注射用氯唑西林鈉 苯唑西林鈉 注射用苯唑西林鈉 普魯卡因青霉素 表 HPLC測 定高分子聚合物 （ 2023年版新增 2個品種） 原料 制 劑 頭孢 地 嗪鈉 注射用 頭孢 地 嗪鈉l 國內(nèi)關(guān)于 β 內(nèi)酰胺類抗生素高分子雜質(zhì)的研究工作是于 70年代開始，經(jīng)歷了近 40年的研究，于 2023年版藥典在 4個品種 8個藥品標(biāo)準(zhǔn)中正式收載了高分子雜質(zhì)檢查。在上述二個基本條件不變的前提下進(jìn)行方法學(xué)的改進(jìn) ,完善。（見圖 ，圖 ）圖 % 頭孢 他 啶 均 值 :F= 10 3 (n=5)　　　均 值 ： F=10 3(n=5)　177。 ％l 應(yīng)用 HPCE測定鹽酸頭孢吡肟中 N甲基吡咯烷的含量，是本版藥典正文收載應(yīng)用HPCE的 2個品種之一。l 系統(tǒng)適用性溶液的制備 取丁酮和乙酸乙酯各適量，用內(nèi)標(biāo)溶液定量稀釋成每 1ml中約含丁酮和乙酸乙酯各 1mg的溶液，精密量取 ，置頂空瓶中，密封瓶口，作為系統(tǒng)適用性溶液。l 水分 l 本類藥物原料藥均采用水分測定法第一法 A測定水分，l 制劑中輔料對水分測定法有干擾時，則改為干燥失重。m以上的微粒不得過 6000粒，含 25181。l 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 甲醇（ 19:1）為流動相；檢測波長為 254nm。l 如： 氨曲南 l 【含量測定】 照高效液相色譜法（附錄 Ⅴ D）測定。l 十四元環(huán)有紅霉素及其衍生物，具有結(jié)構(gòu)相近 ,無紫外吸收 ,特征性反應(yīng)不明顯的特點，以紅霉素、琥乙紅霉素、克拉霉素、羅紅霉素為代表 .l 十五元環(huán)有阿奇霉素；l 十六元環(huán)有乙酰螺旋霉素、吉他霉素等， 收 載 情況 原料 制劑 總計2023年版藥典收載品種 13 35 48其中 新增品種 2 4 6 品種收 載 情況 見 表 表 2023年版 藥 典大 環(huán) 內(nèi) 酯類 品種收 載 情況l 新增品種：l 原料： 制劑：l 交沙霉素、 交沙霉素片、l 丙酸交沙霉素、 丙酸交沙霉素顆粒、l 麥白霉素膠囊。表 組 分 測 定 品種 組 分 測 定 方法 系 統(tǒng) 適用性要求 乙 酰 螺旋霉素乙 酰 螺旋霉素片乙 酰 螺旋霉素膠囊單 乙 酰 螺旋霉素 II與III雙乙 酰 螺旋霉素 II與III同 2023年 版 修 訂為 ：系 統(tǒng) 適用性 對 照品溶液色譜圖應(yīng) 與 標(biāo) 準(zhǔn) 圖譜 一致吉他霉素吉他霉素片吉他霉素 A A AA13以及 總組 分同 2023年 版 修 訂為 ：系 統(tǒng) 適用性 對 照品溶液色譜圖應(yīng) 與 標(biāo) 準(zhǔn) 圖譜 一致麥白霉素麥白霉素片麥白霉素膠囊修 訂為 ：麥迪霉素 A A2和吉他霉素 A A A8同 2023年 版 修 訂為 ：系 統(tǒng) 適用性 對 照品溶液色譜圖應(yīng) 與 標(biāo) 準(zhǔn) 圖譜 一致，并 規(guī) 定 組 分出峰 順 序。見表 。溶出度項下溶出液的測定，l 6個品種采用直接紫外 — 可見分光光度法（231～ 235nm波長處）、l 9個品種采用硫酸顯色反應(yīng)后紫外 — 可見分光光度法（ 482nm波長處）、l 10個品種則采用 HPLC法（阿奇霉素、克拉霉素和羅紅霉素由硫酸顯色法修訂成 HPLC法）。l 【鑒別】 （ 3） IRl 例 1.（供注射用）l （供注射用）l 無菌 l 硫酸新霉素滴眼液（滲透壓摩爾濃度比為）。l 例 1.柱前衍生 HPLC法可以在同一色譜條件下同時檢出卡那霉素、雜質(zhì) B、雜質(zhì) A以及其它雜質(zhì)，并可參考 BP2023阿米卡星項下系統(tǒng)適用性色譜圖定位，且藥廠出口采用此法，對本法的可行性已有數(shù)據(jù)可證明。本版藥典建立的 HPLCELSD方法測定硫酸鹽含量，采用硫酸滴定液作為對照品，解決了對照品的問題，該方法方便、準(zhǔn)確。硫酸核糖霉素及其制劑共 5個標(biāo)準(zhǔn)的含量測定采用微生物檢定法管碟法 .l （ 4）鹽酸大觀霉素及其制劑共 2個標(biāo)準(zhǔn)的含量測定采用微生物檢定法濁度法l （ 5）其他 21個標(biāo)準(zhǔn)的含量測定均采用微生物檢定法管碟法和微生物檢定法濁度法兩法并列，可任選一方法。l l 四環(huán)類抗生素在堿性溶液中放置一段時間，C環(huán)打開，生成無活性的具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的異四環(huán)類抗生素。性狀 基本未修訂。檢查l 雜質(zhì)含量計算方法l 鹽酸多西環(huán)素（ Doxycycline三批樣品中 2乙酰 2去酰胺土霉素的含量約為 % ，有文獻(xiàn)報道 2乙酰 2去酰胺土霉素的抗菌活性很低 [2]，但未見其毒性的相關(guān)報道，故本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定其限度為 % ，l 如：鹽酸四環(huán)素《歐洲藥典》 ： 4差向四環(huán)素 ≤% ， 2乙酰 2去酰胺四環(huán)素≤% （該雜質(zhì)在四環(huán)素的峰尾流出），脫水四環(huán)素 該色譜條件下首次檢出了土霉素，含量很少，三批樣品均在 % 以下，l l 表 流動相配比見下表 : 表 含量測定流動相 （ 2023年版）鹽酸土霉素醋酸鹽緩沖液 [L 1EDTA鈉鹽 三乙胺（ 100： 10： 1）用冰醋酸調(diào)節(jié) pH值至 ]－乙腈 (85： 15) 鹽酸米諾環(huán)素l 試驗過堿性流動相，效果不理想。與主峰相對保留時間為 2乙酰 2去酰胺四環(huán)類雜質(zhì)。按上述流動相對多西環(huán)素、四環(huán)素、土霉素進(jìn)行分離研究，可以使主成分與雜質(zhì)達(dá)到良好分離，分離的雜質(zhì)數(shù)基本與 致。L 1EDTA鈉鹽 三乙胺（ 100： 10： 1）用醋酸調(diào)節(jié) pH值至 ]－乙腈 (83： 17) 鹽酸多西環(huán)素醋酸鹽緩沖液 [用醋酸銨和乙腈替代草酸胺及 N,N－二甲基甲酰胺，l 鹽酸多西環(huán)素 ,l 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰， 限度的確定 四環(huán)素已知雜質(zhì)含量用加校正因子的自身對照法計算，l l 堿性條件下 :l 分子中存在酚羥基和烯醇型羥基，顯弱酸性；同時含有二甲胺基，顯弱堿性，故遇酸及堿，均能生成相應(yīng)的鹽，臨床上大多采用鹽酸鹽。含量測定 阿米卡星混合溶液的分離色譜圖圖 阿米卡星和硫酸阿米卡星 :l l l 2023年 版藥典有 7個原料及其制劑共 23品種采用HPLCELSD方法檢查有關(guān)物質(zhì)、組分、特定雜質(zhì)。HPLC（限度： l l 2023年版藥典首先在抗生素類滴眼液 硫酸卡那霉素滴眼液標(biāo)準(zhǔn)中列入滲透壓檢查，l （供注射用）。（ 1） TLCl 品種收載情況： 表 品種收載情況原料 制劑注射液 注射用 滴眼液 口服液 片 緩釋片 顆粒妥布霉素 √ √*硫酸小諾霉素 √ √ √硫酸巴龍霉素 √硫酸卡那霉素 √ √ √硫酸西索霉素 √硫酸慶大霉素 √ √ √ √ √硫酸阿米卡星 √ √*為新增品種原料 制 劑注射液 注射用 滴眼液 口服液片 緩釋片顆 粒阿米卡星硫酸奈替米星 √硫酸依替米星 √ √硫酸核糖霉素 √硫酸 鏈 霉素 √硫酸新霉素 √ √鹽 酸大 觀 霉素 √總計 14 8 6 4 1 4 1 1 關(guān)鍵檢測項目方法一覽：表 檢測項目方法原料 有關(guān)物 質(zhì) （包括特定 雜質(zhì) ）組 分 硫酸 鹽 含量 測 定TLC HPLCELSDHPLCUV HPLCELSDHPLCUVHPLCELSD滴定妥布霉素 √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸小 諾 霉素 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸巴 龍 霉素 √ 無 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸卡那霉素 卡 B √ ELSD硫酸西索霉素 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸 慶 大霉素 √ √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸阿米卡星 √ √ HPLCUV阿米卡星 √ HPLCUV原料 有關(guān)物 質(zhì) （包括特定 雜質(zhì) ）組 分 硫酸 鹽 含量 測 定TLC HPLCELSDHPLCUVHPLCELSDHPLCUVHPLCELSD滴定硫酸奈替米星 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸依替米星 √ √ HPLCELSD硫酸核糖霉素 √ 微 1硫酸 鏈 霉素 √ √ 微生物（ Ⅰ、 Ⅱ ）硫酸新霉素 新霉胺√ 微生物（ Ⅰ）鹽 酸大 觀 霉素 √ 微生物（ Ⅱ）l 品種 方法乙 酰 螺旋霉素片乙 酰 螺旋霉素膠囊 , 檢測 波 長 231nm , 對 照法吉他霉素片 , .檢測 波 長 231nm , 身 對 照法交沙霉素片 . .檢測 波 長 231nm , 身 對 照法麥白霉素片 , .檢測 波 長 232nm , 對 照法麥白霉素膠囊 , 檢測 波 長 235nm , 對 照法 酸 胃蛋白 酶 為 介 質(zhì)表 (1)溶出度測定 （ 溶出液 uv法測定）表 (1)溶出度測定 （ 溶出液 硫酸溶液 顯 色 ,uv法測定） 品種 方法紅 霉素 腸 溶片紅 霉素 腸 溶膠囊 放度 ,