【正文】 2） 拓?fù)鋵W(xué)問(wèn)題 Φ RNA合成過(guò)程中，轉(zhuǎn)錄泡兩端要發(fā)生拓?fù)滢D(zhuǎn)變； Φ 由 DNA旋轉(zhuǎn)酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶 I完成； Φ RNADNA雜交鏈也作旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)。 基因內(nèi)啟動(dòng)子 起始位點(diǎn) b o x A b o x C 基因內(nèi)啟動(dòng)子 b o x A b o x B 基因外啟動(dòng)子 O CT PS E T A T A 圖 1 2 2 3 真核 RN A Po l Ⅲ 的 基因內(nèi)啟動(dòng)子和基因外啟動(dòng)子 I 型： II 型 III型 RNA pol Ⅲ 啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)和功能 因子 結(jié)構(gòu) 功能 TFⅢ A 38Kda, 有 9個(gè)鋅指 結(jié)合 1型內(nèi)部 啟動(dòng)子 (5SrRNA基因 )的 C框 ， 使 TFⅢ C結(jié)合 C框下游，輔助 TFⅢ B定位結(jié)合 TFⅢ B 含 TBP和另外二種蛋白 定位因子 ，使 PolⅢ 結(jié)合在起始位點(diǎn)上 TFⅢ C 5個(gè)亞基 結(jié)合 I 、 II啟動(dòng)子的 保守框，輔助 TFⅢ B定位 TFⅡ D 含 TBP亞基 結(jié)合 III啟動(dòng)子的 TATA框，確定選擇 PolⅢ PBP 次近端結(jié)合蛋白 結(jié)合 III啟動(dòng)子的 次近端序列元件 PSE， 和 TFⅡ D 共同輔助 TFⅢ B定位結(jié)合 3型啟動(dòng)子 OCT1 結(jié)合 八聚體 OCT元件 ，增加轉(zhuǎn)錄效率 1 型內(nèi)部啟動(dòng)子 2 型內(nèi)部啟動(dòng)子 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) boxA boxC boxA boxB TFIIIA TFIII C TFIII C TFIII B TBP TFIII C TFIII B pol III pol III 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) OCT PSE TATA OCT1 PBP TFⅡ D TFⅢ B RNA pol Ⅲ 3型基因外部啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng) TBP RNA pol II TFIID TAFs TBP Pol III 啟 動(dòng) 子 TFIIIB TFIIIC TBP RNA pol III Pol I 啟 動(dòng) 子 RNA pol I SL1 UBF1 TBP Pol II 啟 動(dòng) 子 轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) TATA ? TBP 的作用 ★ TBP是 Ⅲ B,Ⅱ D,SL1的亞基，和特異 DNA序列及 RNA Pol結(jié)合，使 Pol 結(jié)合在正確的位點(diǎn)上 ? TBP ，又稱(chēng)定位因子， 類(lèi)似于原核的 ζ因子 。 3 終止： 轉(zhuǎn)錄終止受 DNA模板上的信號(hào)順序決定。 第三節(jié) 終止子 ? 1 原核生物的終止子 ? 2 真核生物的終止子 2 真核生物的終止子 （ Terminator) ? 真核 mRNA的 3’端不是轉(zhuǎn)錄終止而是轉(zhuǎn)錄后切割加工產(chǎn)生的。 ? 作用： ? 在 DNA模板的特異位點(diǎn)處終止 RNA的合成。 大腸桿菌 RNA聚合酶全酶所識(shí)別的啟動(dòng)子區(qū) T82T84G78A65C54A45 T80A95T45A60T96 保守序列 1 原核生物的啟動(dòng)子 2 真核生物的啟動(dòng)子 第二節(jié) 啟動(dòng)子 2 真核生物的啟動(dòng)子 三種 RNApol → 三種轉(zhuǎn)錄方式 三種啟動(dòng)子 → 三類(lèi)基因， Ⅰ 類(lèi) Ⅱ 類(lèi) Ⅲ 類(lèi) RNApolⅡ 的啟動(dòng)子 RNApol I的啟動(dòng)子 RNApol III的啟動(dòng)子 RNApolⅡ 的啟動(dòng)子 ? 通用型啟動(dòng)子（無(wú)組織特異性） ? 結(jié)構(gòu)最復(fù)雜 ? 位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的上游 ? 有多個(gè)短序列元件組成 （ 1） 帽子位點(diǎn)（ cap site）： 轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn) 與 ， 多為 A （ 2） TATA框 （ Hogness 框或 GoldbergHogness 框） 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： ? 位于－ 30處 ? 一致序列為 T82A97T93A85A63（ T37） A83A50（ T37） 功能： ? 定位轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) （類(lèi)似原核的 Pribnow框） , 也稱(chēng)為選擇子（ selector） ? TATA是絕大多數(shù)真核基因的正確表達(dá)所必需的 （ 3） CAAT框（ CAAT box） 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： ? 位于－ 75bp處 ? 一致序列為 GGC/TCAATCT 功能： ? 前兩個(gè) G 的作用十分重要 (轉(zhuǎn)錄效率 ) ? 增強(qiáng)啟動(dòng)子的效率、頻率，不影響啟動(dòng)子的特異性 （距轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的距離，正反方向） ? 以上三個(gè)保守序列在絕大多數(shù)啟動(dòng)子中都存在 （ 4） GC框 （ GC box） ? 位于－ 90附近，較常見(jiàn)的成分 ? 核心序列為 GGGCGG ? 可有多個(gè)拷貝，也可以正反兩方向排列 （ 5）其他元件 ? 八聚核苷酸元件（ octamer element OCT元件） 一致序列為 ATTTGCAT ? KB元件 一致序列為 GGGACTTTCC ? ATF元件 一致序列為 GTGACGT ? 以及還有一些位于起始點(diǎn)下游的相關(guān)元件 (6) 起始子（ initiator， Inr）： ? 位于起始點(diǎn) 3～ +5 ? Py2CAPy5構(gòu)成， ? 可能提供 RNA pol Ⅱ 識(shí)別。 ? RNA Pol 核心酶和模板結(jié)合，進(jìn)行聚合； (2) 很大程度上決定了啟動(dòng)子的強(qiáng)度。 ? 不同啟動(dòng)子對(duì) RNA聚合酶的親和力各不同， ? 根據(jù)其合成蛋白質(zhì)的多少區(qū)別為 強(qiáng)弱啟動(dòng)子 。 ? 不同的 ?因子可識(shí)別不同的啟動(dòng)子 ?因子更替的現(xiàn)象 ? 在細(xì)菌受到外界環(huán)境的急劇影響時(shí)，會(huì)改變所表達(dá)的基因，產(chǎn)生 ?因子更替的現(xiàn)象 。 ? 不同點(diǎn) ： （ 1） RNA pol沒(méi)有任何校對(duì)功能； （ 2）能起始新的 RNA鏈。 ? 轉(zhuǎn)錄所需的酶叫做依賴(lài) DNA的 RNA聚合酶 。 RNA合成的基本特征 ： ? 5’ →3 ’ 方向； ? 底物三磷酸核苷酸（ NTP） ? 不對(duì)稱(chēng)轉(zhuǎn)錄，以單鏈 DNA為模板。 ? 編碼鏈 ， 有意義鏈 : DNA雙鏈中另一條不做為模板的鏈； ? 不對(duì)稱(chēng)轉(zhuǎn)錄： RNA的轉(zhuǎn)錄合成是以 DNA的一條鏈為模板而進(jìn)行的。 ? β′ 亞基： 由 rpoC編碼 ， 可能與模板結(jié)合 。 第一節(jié) 轉(zhuǎn)錄酶 1 原核生物的 RNA聚合酶 2 真核生物的 RNA聚合酶 2 真核生物的 RNA聚合酶 種類(lèi) 分布 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 相對(duì)活性 對(duì) α鵝膏蕈堿的敏感性分類(lèi) RNA polⅠ 核仁 28S,18S, rRNAs 5070％ 不敏感 RNA polⅡ 核質(zhì) hnRNA，SnRNA