華中科技大學(xué)發(fā)酵工程第二章工業(yè)用微生物菌種(存儲(chǔ)版)
【正文】 產(chǎn)物特點(diǎn)分 選擇性分離方法 隨機(jī)分離方法 (定向篩選 ← 選擇壓力 ) (用篩選方案 檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行間接分離 ） 富集液體培養(yǎng) 固體培養(yǎng)基條件培養(yǎng) (初篩 ) 菌種純化 復(fù)篩 菌種純化 初步工藝條件摸索 再?gòu)?fù)篩 生產(chǎn)性能測(cè)試 較優(yōu)菌株 13株 保藏及進(jìn)一步做生產(chǎn)試驗(yàn) 某些必要試驗(yàn)和 或作為育種的出發(fā)菌株 毒性試驗(yàn)等 含微生物樣品的采集 ? 采樣時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題 : ? 土壤微生物的分布 ? 采土深度 ? 土壤植被情況 ? 采樣季節(jié) ? 土壤的酸堿度 ? 對(duì)于分離篩選新菌種，還存在另兩個(gè)選擇標(biāo)準(zhǔn)： ? 土壤來(lái)源廣泛 ? 在已適應(yīng)相當(dāng)苛刻環(huán)境壓力的微生物類群中尋找新菌種 樣品的預(yù)處理 ? 目的：提高分離效率 ? 方法： ? 物理方法：熱處理；膜過(guò)濾法；離心法 ? 化學(xué)方法 ? 誘餌法 分離方法的選擇 ? 根據(jù)目的菌有無(wú)選擇性特征來(lái)選擇分離方法 ? 菌種的營(yíng)養(yǎng)特征獨(dú)特 ? 生長(zhǎng)特征獨(dú)特 ? 無(wú) 選擇性特征 根據(jù)產(chǎn)物的特征進(jìn)行 隨機(jī)分離 ? 選擇性分離的關(guān)鍵：生長(zhǎng)培養(yǎng)條件的選擇與控制，從而實(shí)現(xiàn)定向富集篩選。 最常用的工業(yè)微生物 ? 細(xì)菌 ? 醋桿菌屬的醋化醋桿菌、弱氧化醋桿菌 ? 乳酸桿菌 ? 枯草桿菌 ? 丙酮丁醇梭菌 ? 大腸桿菌 ? 谷氨酸棒狀桿菌 最常用的工業(yè)微生物 ? 酵母菌 ? 釀酒酵母 ? 假絲酵母屬 ? 產(chǎn)朊假絲酵母 ? 解脂假絲酵母 ? 熱帶假絲酵母 ? 畢赤酵母屬、漢遜酵母屬 最常用的工業(yè)微生物 ? 霉菌 ? 曲霉屬 ? 米曲霉 ? 黑曲霉 ? 青霉屬 ? 青霉菌：點(diǎn)青霉、產(chǎn)黃青霉 ? 桔青霉 ? 根霉屬 ? 德氏根霉 ? 米根霉、小麥曲根霉 ? 紅曲霉屬 ? 紫紅曲霉 最常用的工業(yè)微生物 ? 放線菌 ? 鏈霉菌屬 ? 小單孢菌屬 ? 地中海諾卡氏菌 ? 米蘇里游動(dòng)放線菌 未培養(yǎng)微生物 ? 定義：指迄今所采用的微生物純培養(yǎng)分離及培養(yǎng)方法還未獲得純培養(yǎng)的微生物，其在自然環(huán)境微生物群落中占有非常高的比例，約為 99％。 ? 隨機(jī)分離技術(shù)舉例 ? 抗生素產(chǎn)生菌的篩選 ? 藥理活性化合物產(chǎn)生菌的篩選 ? 生長(zhǎng)因子產(chǎn)生菌的篩選 ? 多糖產(chǎn)生菌的篩選 高產(chǎn)培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的幾個(gè)原則 ? 制備一系列的培養(yǎng)基 ， 其中有各種類型的養(yǎng)分成為生長(zhǎng)限制因素； ? 使用一聚合或復(fù)合形式的生長(zhǎng)限制養(yǎng)分； ? 避免使用容易同化的碳源或氮源 ， 防止分解代謝物阻遏； ? 確定含有所需的輔因子 （ Co2+,Mg2+,Mn2+,Fe2+） ； ? 使 用 pH緩沖劑以減少 pH變化； ? 前體 、 促進(jìn)劑及抑制劑的采用 。 半柔性節(jié)點(diǎn) ：須降低主分支的酶活并同時(shí)提高次分支的酶活或解除其反饋抑制 ，
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