華中科技大學發(fā)酵工程第二章工業(yè)用微生物菌種(已改無錯字)
2023-01-17 14:40:06 本頁面
【正文】 養(yǎng) 23代 稀釋分離法分離單菌落 ， 培養(yǎng)基為含麥芽汁 、 CaCO3的瓊脂培養(yǎng)基 根據透明圈挑選菌落 性能測定 （ 鏡檢桿狀 ， 染色陽性；乳酸紙層析鑒定 ） Rf值定性 （ 有機酸呈黃斑點 ） 乳酸生成量測定 （ 滴定法 ） 放線菌的分離： 以產鏈霉素菌種的分離為例 （從退化菌種中篩選） 取工業(yè)發(fā)酵液 （ 含孢子 ） 樣品 1環(huán) 放入帶玻璃珠的裝有 10ml 無菌水的小三角瓶中 ， 搖勻 采用稀釋法制平板 ， 獲取單菌落 斜面保藏 高產菌恢復 根據高產菌的特點 ， 選擇目的菌落 放大培養(yǎng) ， 發(fā)酵液性能測試 篩選模型：形態(tài)依據 真菌的分離篩選：以啤酒酵母的分離為例 取發(fā)酵液少許以 10倍稀釋成 101107 稀釋分離法 取 加入固體培養(yǎng)基鋪平皿 （ 2） 在麥芽汁固體培養(yǎng)基上 ， 25℃ 培養(yǎng) 4872h 形態(tài)篩選 根據正常株特點進行挑選 ， 接種斜面?zhèn)溆? 純化 ， 采用平板分離法進一步純化 ， 至少反復三次 ① 生成子囊孢子速度測定 ② 發(fā)酵力測定 性能測定 ③ 熱死溫度測定 ④ 凝集力測定 ⑤ 雙乙酰含量測定 菌種選育改良的具體目標 ? 提高目標產物的產量 ? 提高目標產物的純度，減少副產物 ? 改良菌種性狀，改善發(fā)酵過程 ? 改變生物合成途徑，以獲得高產的新產品 發(fā)酵工業(yè)菌種改良方法 ? 常規(guī)育種 (誘變育種 ) ? 細胞工程育種 ? 基于代謝調節(jié)的育種技術 ? 基因工程育種 ? 蛋白質工程育種 ? 代謝工程育種 賴氨酸生產菌種的選育改良思路 ? 出發(fā)菌株 ：黃色短桿菌、谷氨酸棒桿菌、乳糖發(fā)酵短桿菌 ? 育種思路 —— 滲漏缺陷型的選育 —— 營養(yǎng)缺陷型的選育：高絲氨酸缺陷型 ： AEC ： Leu 、 抗 Leu結構類似物、 喹啉 s 、 苯醌 s ： Ala、抗 Asp結構類似物 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 7. 選育溫度敏感突變株 8. 應用細胞工程和基因工程育種 選育適宜的 CO2固定酶 /TCA循環(huán)酶活性比突變株 賴氨酸合成中間代謝有以下兩條途徑： ① 通過 TCA循環(huán) 葡萄糖 丙酮酸 草酰乙酸 天冬氨酸 賴氨酸 ② 通過磷酸烯
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