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重亞硫酸鹽測序技術(shù)介紹(存儲版)

2024-09-14 00:12上一頁面

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【正文】 腫瘤所具有的共同特征之一,而且這種高甲基化是導(dǎo)致抑癌基因失活的又一個機制。 PCR法比 Southem法更為敏感,但只能檢測甲基化敏感的限 制性位點的 CpG甲基化,且 DNA必須酶切完全,否 則會出現(xiàn)假陽性。此方法一種可靠性及精確度很高的方法,能明確目的片段中每一個 CpG位點的甲基化狀態(tài)。在啟動子( promotor)或“ 起始 ” 區(qū)域周圍,甲基化經(jīng)常被抑制。重亞硫酸氫鹽直接測序技術(shù)介紹 DNA甲基化含義 ? 在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下, DNA的 CG兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基,形成 5-甲基胞嘧啶,這常見于基因的 539。 GC含量大于 50%,長度超過 200bp。最后,對 PCR產(chǎn)物進行測序,并且與未經(jīng)處理的序列比較,判斷是否 CpG位點發(fā)生甲基化。當用甲基 化不敏感的內(nèi)切酶消化產(chǎn)物作為 PCR模板時,不論 該部位是否甲基化都不應(yīng)有片段擴出。 啟動子的甲基化
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